miR-182靶向抑制FBXW7表达影响非小细胞肺癌细胞增殖研究

论文摘要

目的:研究microRNA-182（miR-182）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,并探讨其对NSCLC细胞增殖的影响及作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）检测miR-182在11例NSCLC及相应癌旁组织中的表达情况;Western blot检测FBXW7,c-Jun,c-Myc及cyclin D蛋白的表达;将miR-182模拟物,抑制物及相应空白对照瞬时转染H460细胞后,以细胞增殖与活性检测和克隆形成实验检测细胞系的增殖情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡变化;荧光素酶报告基因实验证实miR-182对FBXW7的靶向性作用。结果:NSCLC组织中miR-182的相对表达水平显著高于癌旁组织（P<0.05）。转染组与对照组相比,H460细胞生长、克隆形成能力显著增强,细胞周期进程加快,细胞凋亡受到抑制（P<0.05）。在NSCLC组织中,FBXW7蛋白的表达水平明显低于癌旁组织（P<0.05）。miR-182 mimics显著降低野生型FBXW7质粒荧光素酶的活性,然而将结合位点突变后,miR-182 mimics则不再影响荧光素酶的活性。结论:miR-182在NSCLC组织中高表达,与FBXW7之间存在靶向关系,通过下调FBXW7蛋白表达促进NSCLC细胞的增殖,参与肿瘤的发生发展,预示其可能成为一种潜在的生物标志和治疗靶点。

论文目录

• 前言
• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 材料和试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 细胞培养
•     1.2.2 qRT-PCR检测
•     1.2.3 蛋白质印迹检测
•     1.2.4 细胞转染
•     1.2.5 细胞增殖与活性检测
•     1.2.6克隆形成试验
•     1.2.7细胞周期分析
•     1.2.8 细胞凋亡分析
•     1.2.9 荧光素酶报告基因实验
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 mi R-182在非小细胞肺癌组织及细胞系中高表达，且与FBXW7表达水平呈负性相关
•   2.2 mi R-182促进NSCLC细胞增殖
•   2.3 mi R-182抑制NSCLC细胞凋亡
•   2.4 mi R-182调控FBXW7及其底物蛋白的表达水平
•   2.5 FBXW7是mi R-182的直接作用靶点
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 梁喜鹏,常浩,曲峻峰,王巨,王胜发

关键词: 非小细胞肺癌

来源: 现代生物医学进展 2019年22期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 哈尔滨医科大学第一临床医学院胸外科

基金: 黑龙江省教育厅海外学人科研资助项目(1152hq30)

分类号: R734.2

DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.22.003

页码: 4213-4219+4227

总页数: 8

文件大小: 2836K

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