狼毒素通过Akt途径诱导Hep-2细胞凋亡的实验研究

论文摘要

目的研究狼毒素与人Hep-2喉癌细胞生长之间的关系,并探究其可能的作用机制。方法 MTT法检测狼毒素对Hep-2的增殖的影响。Western Blot法检测狼毒素作用于Hep-2细胞后的裂解产物表达,并作定量分析。构建裸鼠模型,喂饲狼毒素后观察裸鼠的变化。ELISA法检测裸鼠移植瘤中的细胞凋亡。结果狼毒素抑制Hep-2细胞生长,总体表现为剂量-时间依赖性。经狼毒素处理过的Hep-2细胞中Akt在473位点丝氨酸的磷酸化呈现显著的剂量依赖性下降,此外,狼毒素作用后显著减少了caspase-9和caspase-3的活性。在动物实验中,灌饲狼毒素的裸鼠的瘤体显著缩小（P<0.05）。凋亡检测显示移植瘤体内细胞凋亡。结论狼毒素可以抑制体外及体内人Hep-2喉癌细胞生长,其机制最有可能为直接通过AKT信号通路发挥其潜在的抗肿瘤作用。狼毒素可能成为一种新的治疗喉癌的化疗药物。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 细胞毒性试验:
•     1.2.2 狼毒素作用后的Hep-2细胞的免疫印迹分析:
•     1.2.3 肿瘤异种移植研究
•       1.2.3.1 荷Hep-2细胞移植瘤裸鼠模型的建立:
•       1.2.3.2 狼毒素作用后的移植瘤的凋亡检测:
•     1.2.4 统计学处理:
• 2 结果
•   2.1 细胞增殖抑制实验
•   2.2 狼毒素作用后的Hep-2细胞的免疫印迹分析
•     2.2.1 狼毒素抑制Akt中的丝氨酸473（Ser473）和下游目标的磷酸化:
•     2.2.2 狼毒素引起IGF-IRα蛋白表达和磷酸化的下调:
•     2.2.3 狼毒素诱导活化caspase-9和caspase-3:
•   2.3 肿瘤异种移植研究
•     2.3.1 狼毒素作用于荷瘤裸鼠后裸鼠及移植瘤的变化:
•     2.3.2 酶联免疫吸附试验检测M-30反应判定移植瘤内细胞凋亡:
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王宇,杨国娜,林丽红,王超

关键词: 狼毒素,凋亡

来源: 哈尔滨医科大学学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉-头颈外科,黑龙江省亚布力林区人民医院耳鼻喉科,哈尔滨市第四医院耳鼻喉科

基金: 黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12531376)

分类号: R285.5

页码: 576-579+583

总页数: 5

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