氧糖剥夺条件下p75神经营养素受体在人神经母细胞瘤细胞中的表达和作用

论文摘要

目的探讨氧糖剥夺（OGD）条件下p75神经营养素受体（p75NTR）在人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中的表达变化和作用。方法 SH-SY5Y细胞OGD模型的建立采用三气培养箱无糖无血清培养方法。模型成功建立后设立3组:无血清常规培养组（对照组）、OGD组和OGD+p75NTR竞争性阻断剂LM11A-31处理组（OGD+LM11A-31组）。在细胞培养12 h时用利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）活力检测试剂盒测定LDH释放活力,流式细胞术检测凋亡细胞比例,蛋白质印迹法检测p75NTR的蛋白表达。结果成功构建SH-SY5Y细胞OGD模型。细胞培养12 h时,对照组、OGD组和OGD+LM11A-31组细胞存活率分别为（94.80±4.06）%、（50.34±5.55）%、（64.68±4.59）%,LDH释放活力分别为（46.93±5.49）U/L、（353.09±30.67）U/L和（282.20±25.60）U/L,凋亡细胞比例分别为（1.82±0.45）%、（14.98±2.59）%和（7.36±1.98）%,p75NTR蛋白相对表达量分别为0.06±0.01、0.41±0.02和0.19±0.03,差异均有统计学意义（F=67.94、142.10、36.28、221.20,P均<0.05）。多重比较显示,OGD组细胞存活率低于对照组,LDH释放活力高于对照组,凋亡细胞比例高于对照组,p75NTR蛋白表达高于对照组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P′均<0.05）;而LM11A-31处理后OGD+LM11A-31组细胞存活率高于OGD组,LDH释放活力低于OGD组,凋亡细胞比例低于OGD组,p75NTR蛋白表达低于OGD组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P′均<0.05）。结论 OGD条件下p75NTR在人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中表达增加,可能促进了神经损伤和凋亡。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 SH-SY5Y细胞OGD模型建立与分组
•   1.3 MTT法检测细胞存活率与LDH释放活力测定
•   1.4 流式细胞术检测细胞凋亡
•   1.5 蛋白质印迹法检测蛋白表达
•   1.6 统计学处理
• 2 结 果
•   2.1 SH-SY5Y细胞OGD模型的建立
•   2.2 3组细胞存活率和LDH释放活力的比较
•   2.3 3组细胞凋亡检测结果比较
•   2.4 3组细胞中p75NTR蛋白表达水平比较
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈甲,秦鲁平,赵明,陈蕾,吴涛,邓本强

关键词: 神经营养素受体,氧糖剥夺,人神经母细胞瘤细胞,神经凋亡

来源: 第二军医大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 神经病学

单位: 海军军医大学(第二军医大学)长海医院脑血管病中心

基金: 上海市科委医学引导类项目(124119a8900)~~

分类号: R741

DOI: 10.16781/j.0258-879x.2019.12.1325

页码: 1325-1329

总页数: 5

文件大小: 1370K

下载量: 68