重组漆酶降解黄曲霉毒素B1分子对接分析及产物结构解析

论文摘要

以重组漆酶lac3基因同源性最高的3KW7作为模板进行同源模建,采用分子对接预测漆酶与黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）的结合模式,结果显示漆酶与AFB1可以相互作用,氢键是其关键作用力,漆酶可用于黄曲霉毒素的降解。随后,通过实际的降解实验进行验证,响应面优化获得AFB1降解率最优的条件为底物AFB1 1μg、孵育时间15 h、孵育温度34℃、酶活力2 U,降解率可达91.08%。在此条件下利用超高效液相色谱-飞行时间串联质谱分析AFB1降解产物结构,发现4个主要降解产物,根据其二级质谱信息和精确分子质量,推测出降解产物的分子式分别为C16H22O4、C14H16N2O2、C7H12N6O和C24H30O6。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 栓菌漆酶的同源模建
•     1.3.2 AFs三维结构绘制
•     1.3.3 漆酶与AFB1分子对接
•     1.3.4 AFs标准溶液的制备
•     1.3.5 菌株活化及发酵液制备
•     1.3.6 漆酶活力检测
•     1.3.7 漆酶与AFs作用的降解条件
•     1.3.8 AFs的提取
•     1.3.9 HPLC-MS/MS检测AFs及标准曲线的绘制
•     1.3.1 0 响应面试验设计
•     1.3.1 1 AFB1降解产物的测定及结构解析
• 2 结果与分析
•   2.1 漆酶的同源模建结果
•   2.2 漆酶与AFB1的相互作用分析
•   2.3 各因素对AFB1降解率的影响
•   2.4 响应面法优化漆酶降解AFB1条件
•   2.5 AFB1降解条件的响应面分析
•   2.6 AFB1最优降解条件的确定
•   2.7 AFB1降解产物的总离子流色谱
•   2.8 AFB1降解产物的分子式及结构分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘英丽,毛慧佳,杨梓妍,万真,王静,孙宝国

关键词: 黄曲霉毒素,栓菌漆酶,分子对接,降解产物

来源: 食品科学 2019年24期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心中国-加拿大食品营养与健康联合实验室(北京)北京市食品添加剂工程技术研究中心

基金: 国家自然科学基金青年科学基金项目（31601564）,国家自然科学基金面上项目（31571940）,北京优秀人才培养资助青年拔尖团队项目（2016000026833TD01）,北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划项目（IDHT20180506）

分类号: TS201.2;TS201.6

页码: 119-127

总页数: 9

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