[目的]本研究调查了家禽大肠杆菌中blaNDM基因的流行状况和blaNDM阳性质粒特征。[方法]在2016年～2017年间,从五个采样点（山东省1个,广东省4个）分别采集了35、182、87、63、103份器官样本,对其筛查blaNDM阳性细菌并进行药敏试验;采用PCR和一代测序方法对blaNDM基因进行分型,并检测其它耐药基因;采用PFGE分型、Southern blot杂交、接合转移以及复制子分型等方法,探究大肠杆菌中blaNDM基因的传播特点以及质粒特征;对8种典型blaNDM阳性质粒的转化子和接合子进行了质粒稳定性试验、生长曲线试验和竞争试验;并对不同复制子类型的blaNDM阳性质粒进行了测序和分析。[结果]五处来源样品的blaNDM基因阳性率分别为20.0%、14.3%、1.1%、3.2%和0%。blaNDM亚型包括blaNDM-1、blaNDM-5和blaNDM-9,分别占3.3%、72.7%和24.2%;blaNDM阳性大肠杆菌普遍携带多种其他耐药基因,表现多药耐药。PFGE分析显示blaNDM基因以水平传播为主,但在小范围内也存在克隆传播;所有大肠杆菌的blaNDM基因均定位于质粒上,质粒大小从45～400 kb不等,复制子类型包括IncX3、IncB/O/K/Z、IncY、IncHI2、IncI1以及IncX1-FIB （K）、IncI1-HI2等7种类型。87.9%的blaNDM阳性质粒可接合。所有blaNDM阳性质粒在宿主菌DH5α中存在均较稳定,IncX3型和IncY型质粒对宿主菌适应性无显著影响,IncB/O/K/Z型质粒以及IncI1型质粒可增强宿主菌的适应性,但IncHI2型和IncI1-HI2杂合型质粒则降低宿主的适应性。本研究中的blaNDM基因环境类型主要为IS26-Intl1-dfrA2-hp-aadA2-qacEΔ1-sul1-hp-ISCR1-dct-tat-trpF-bleMBL-blaNDM-ISAba125-IS26和ΔumuD-ΔTn2-IS3000-ΔISAba125-IS5-ΔISAba125-blaNDM-bleMBL-trpF-tat-Δdct-IS26-Δum uD两种,前者存在于IncB/O/K/Z质粒中,而后者主要存在于IncX3质粒中。本研究发现了一种新的blaNDM转移结构IS3000-ΔISAba125-IS5-ΔISAba125-blaNDM-bleMBL-trpF-tat-Δdct-IS26-ΔumuD-hp-ISL3-IS3000。[结论]blaNDM阳性大肠杆菌多药耐药现象严重,blaNDM基因以可接合质粒介导的水平传播为主,blaNDM阳性质粒一般可在宿主大肠杆菌中稳定存在并增强宿主的适应性,IS26和IS300等可移动元件对blaNDM阳性质粒的演化起到了促进作用。
类型: 国内会议
作者: 朱家杭,张莉娟,蔡润茂,郑兴润,蒋红霞
关键词: 家禽,大肠杆菌,耐药性,水平传播,质粒特征
来源: 中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会 2019-10-13
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室
分类号: S852.61
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.034655
页码: 229-230
总页数: 2
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