天然同位素丰度野生型酵母细胞色素c构象变化的核磁共振检测

论文摘要

细胞色素c是一个重要的多功能蛋白,它在呼吸链及细胞凋亡中均发挥着重要作用.细胞色素c的构象变化与其功能密切相关,表征细胞色素c的构象变化对于明确其相关功能的分子机制至关重要.核磁共振（NMR）是近原位环境下表征蛋白构象的重要工具,但通常需要使用13C、15N等同位素.由于野生型细胞色素c存在翻译后修饰,故其同位素标记十分困难.本文尝试使用1H-13C HSQC技术来表征提纯后的天然同位素丰度的野生型细胞色素c的构象变化.结果显示该方法能在2 h内检测到大多数甲基的信号,且化学位移变化明显的甲基与其构象变化一致.这表明该方法有助于研究天然丰度或翻译后修饰蛋白的构象变化.

论文目录

• 引言
• 1 实验部分
•   1.1 实验试剂
•   1.2 突变体y1 Cytc（K72A/C102T）的表达纯化
•   1.3 野生型y1 Cytc的表达纯化
•   1.4 NMR实验
•   1.5 NMR数据处理
• 2 结果与讨论
•   2.1 突变体y1 Cytc（K72A/C102T）侧链甲基归属
•   2.2 野生型的y1 Cytc的侧链甲基归属
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 方仲佩,孙鹏,王倩文,张亮,刘买利,张许

关键词: 核磁共振,构象变化,细胞色素

来源: 波谱学杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 物理学,生物学

单位: 波谱与原子分子物理国家重点实验室武汉磁共振中心(中国科学院武汉物理与数学研究所),中国科学院大学

基金: 国家重点研发计划(2017YFA0505400)

分类号: Q51;O482.532

页码: 481-489

总页数: 9

文件大小: 643K

下载量: 85