鸭甲肝病毒RT-LAMP检测方法的建立

论文摘要

基于A型和C型鸭甲肝病毒（Duck hepatitis A virus,DHAV）3D基因的6个保守区域设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在60℃恒温保持45min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了鸭甲肝病毒的一步反转录环介导等温扩增（RT-LAMP）方法。该方法具有良好的特异性,除DHAV外,对其他4种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对DHAV-A和DHAV-C病毒RNA的最低检出量均为0.1pg,是常规RT-PCR方法的10倍。临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为92.5%,而且对仪器要求低,适于基层实验室和现场检测。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 毒株
•     1.1.2 试剂与材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 病毒增殖与纯化
•     1.2.2 引物设计与合成
•     1.2.3 反应条件优化
•     1.2.4 特异性试验
•     1.2.5 敏感性试验
•     1.2.6 临床应用
• 2 结果
•   2.1 RT-LAMP反应体系与条件优化
•   2.2 特异性试验
•   2.3 敏感性试验
•   2.4 临床应用
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 扈琴吉,杨宏禹,路晓,于可响,孙晓军

关键词: 鸭甲肝病毒,基因,一步反转录环介导等温扩增,仪器要求低

来源: 家禽科学 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 山东省农业科学院家禽研究所

基金: 国家重点研发计划(2016YFD0500800),国家重点研发计划(2016YFD0500100),山东省现代农业产业技术体系家禽创新团队计划(SDAIT-11-01),山东省农业科学院创新工程项目(CXGC2016B14)

分类号: S852.65

页码: 38-42

总页数: 5

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