石房蛤毒素免疫亲和柱制备及柱效测试研究

论文摘要

目的阐明石房蛤毒素（saxitoxin, STX）免疫亲和柱对11种麻痹性贝类毒素的亲和作用。方法通过纯化的STX单克隆抗体与琼脂糖凝胶（sepharose 4B）制备STX免疫亲和柱,采用11种麻痹性贝类毒素（paralytic shellfish poisoning,PSP）标液进行过柱实验,优化上柱条件,采用液相色谱-质谱串联法进行毒素检测。结果STX免疫亲和柱对新石房蛤毒素（neosaxitoxin,neo-STX）、脱氨甲酰基新石房蛤毒素（decarbamoylneosaxitoxin dihydrochloride,dcneo-STX）、膝沟藻毒素1（gonyautoxin-1,GTX1）、膝沟藻毒素4（gonyautoxin-4, GTX4）基本没有亲和力作用;而对7种PSP的亲和力强弱顺序为:STX>N-磺酰氨甲酰基类毒素5（gonyautoxin-5, GTX5）>脱氨甲酰基石房蛤毒素（decarbamoylsaxitoxin dihydrochloride, dcSTX）>膝沟藻毒素3（gonyautoxin-3,GTX3）>脱氨甲酰基膝沟藻毒素3（decarbamoylgonyautoxin-3,dcGTX3）>脱氨甲酰基膝沟藻毒素2（decarbamoylgonyautoxin-2, dcGTX2）>膝沟藻毒素2（gonyautoxin-2, GTX2）,其中对STX、GTX5、dcSTX、GTX3的回收率为61.2%～99.0%。结论该STX免疫亲和柱对STX、GTX5、dcSTX、GTX3有较好的吸附效果,能够满足样品检测前处理的要求,为水产品中麻痹性贝类毒素的提取方法研究提供了新技术的参考依据。

论文目录

• 1 引言
• 2 材料与方法
•   2.1 材料
•     2.1.1 标准品、试剂及耗材
•     2.1.2 主要仪器
•   2.2 实验方法
•     2.2.1 STX单克隆抗体制备
•     2.2.2 STX抗体蛋白浓度测定
•     2.2.3 STX免疫亲和柱的制备
•     2.2.4 PSP标准溶液及PBS缓冲液配制
•     2.2.5 STX免疫亲和柱过柱方法
•     2.2.6 PSP检测仪器条件
• 3 结果与分析
•   3.1 STX标准过免疫亲和柱的效果测试
•   3.2 PSP与STX免疫亲和柱的结合性能
•   3.3 影响PSP与STX抗体相互作用的因素
• 4 小结

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 岳亚军,朱波,伦丽丽,徐娜,梁玉波

关键词: 石房蛤毒素,麻痹性贝类毒素,免疫亲和柱,高效液相色谱串联质谱法,回收率

来源: 食品安全质量检测学报 2019年14期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,轻工业手工业

单位: 深圳市罗湖区疾病预防控制中心,北京美正生物技术有限公司,国家海洋环境监测中心

基金: 深圳市科技计划项目(JCYJ20170303153141776)~~

分类号: O657.63;TS254.7

页码: 4565-4571

总页数: 7

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