禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究

论文摘要

为明确禾谷炭疽菌（Colletotrichum graminicola）中CgRab5A（GLRG00019）蛋白在细胞内的定位特点,利用多片段一步克隆法将CgRab5A自身启动子、GFP片段和CgRab5A开放阅读框（ORF）片段克隆到pKNT载体上,转化野生型禾谷炭疽菌的原生质体后,通过新霉素抗性筛选获得阳性候选转化子,利用共聚焦显微镜观察GFP-CgRab5A在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明,一步克隆法获得的pKNT-GFP-CgRab5A重组载体经测序后序列完全正确,亚细胞定位观察发现GFP-CgRab5A在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布,定位于早期内涵体上,暗示其可能参与早期内涵体的相关调控过程。

论文目录

• 1 前言
• 2 材料与方法
•   2.1 材料
•     2.1.1 禾谷炭疽菌菌株和载体
•     2.1.2 生化试剂
•     2.1.3 培养基
•   2.2 方法
•     2.2.1 引物的设计
•     2.2.2 重组质粒的构建
•     2.2.3 原生质体的制备和转化
•     2.2.4 候选转化子的验证
•     2.2.5 亚细胞定位观察
• 3 结果与分析
•   3.1 CgRab5A引物
•   3.2 GFP、CgRab5A自身启动子、ORF片段和pKNT载体
•   3.3 pKNT-GFP-CgRab5A重组载体
•   3.4 GFP-CgRab5A阳性转化子
•   3.5 GFP-CgRab5A的定位
• 4 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘涵,孟成真,刘玉青,李秀红,石晓玲,齐尧尧,张桂玲

关键词: 禾谷炭疽菌,亚细胞定位

来源: 安徽农学通报 2019年22期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,植物保护

单位: 临沂大学农林科学学院

基金: 临沂大学大学生创新创业训练计划项目资助(S201910452087),植物与微生物相互作用福建省高校重点实验室开放基金(PMI2018KF3),生物农药与化学生物学教育部重点实验室开放课题(keylab2018-03)

分类号: Q78;S432.1

DOI: 10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2019.22.038

页码: 99-102

总页数: 4

文件大小: 1806K

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