可溶性CD40配体对Raji细胞的生物学作用研究

论文摘要

目的研究可溶性CD40配体（Soluble CD40 ligand,sCD40L）对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞株增殖、凋亡、细胞周期以及MAPK通路相关因子ras、raf、MEK、ERK1/2 mRNA及蛋白表达的影响。方法取对数期生长期Raji细胞,分为对照组和分别含sCD40L 0.25、0.5、1、2、4μg/mL的实验组,培育24、48、72 h后采用CCK-8法检测sCD40L对Raji细胞体外增殖情况的影响;将Raji细胞分为细胞对照组和含4μg/mL sCD40L的实验组,分别培育24、48、72 h后利用AnnexinV-FITC/PI双染法检测对Raji细胞凋亡的影响;流式细胞术检测对细胞周期的影响;实时荧光定量PCR法检测对ras、raf、MEK、ERK1/2 mRNA表达的影响;以Western blot测定ras、raf、MEK、ERK1/2蛋白水平的变化。结果不同浓度sCD40L对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞有抑制作用,呈剂量—时间效应关系;sCD40L可诱导Raji细胞的凋亡并阻滞细胞在G0/G1期;sCD40L与Raji细胞的ras、raf、MEK、ERK1/2 mRNA及其蛋白的表达有抑制作用。结论 sCD40L在体外可抑制Raji细胞增殖并促进其凋亡,干扰Raji细胞的细胞周期,其作用机制可能与下调ras、raf、MEK、ERK1/2的mRNA及蛋白的表达有关。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 Raji细胞培养
•     1.2.2 CCK-8法检测sCD40L对Raji细胞增殖的影响
•     1.2.3 Annexin/PI 双染法检测Raji细胞凋亡
•     1.2.4 流式细胞仪检测Raji细胞周期
•     1.2.5 荧光定量PCR检测ras、raf、MEK、ERK1/2的mRNA水平表达
•     1.2.6 Western blot测定ras、raf、MEK、ERK1/2蛋白水平的变化
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 CCK-8检测sCD40L对Raji细胞体外增殖的影响
•   2.2 Annexin/PI 双染法检测Raji细胞凋亡
•   2.3 流式细胞仪检测sCD40L对细胞周期的影响
•   2.4 Real-time PCR检测sCD40L对ras、raf、MEK、ERK1/2mRNA的影响
•   2.5 Western blot测定ras、raf、MEK、ERK1/2蛋白水平的变化
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨雨,陈琦

关键词: 可溶性配体,人淋巴瘤细胞,细胞增殖,细胞凋亡,细胞周期,信号通路

来源: 遵义医科大学学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 遵义医科大学研究生院,遵义医科大学附属医院血液内科

基金: 贵州省社会发展攻关项目(NO:黔科合SY字[2014]3025)

分类号: R733.1

DOI: 10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2019.0101

页码: 633-640

总页数: 8

文件大小: 3027K

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