miR-422a通过调控SOX6抑制H2O2对PC12细胞的损伤

论文摘要

目的:研究微小RNA-422a （miR-422a）靶向调控人性别决定区Y框6（SOX6）对过氧化氢（H2O2）刺激下大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12（具有神经细胞特性）损伤的作用。方法:采用real-time PCR检测H2O2处理后PC12细胞中miR-422a表达的变化,在PC12细胞中转染miR-422a mimics,MTT法测定细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）漏出率,流式细胞术测定细胞凋亡水平。靶基因预测软件预测SOX6可能是miR-422a的靶基因,萤光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。在PC12细胞中共转染miR-422a mimics和SOX6过表达载体,检测过表达SOX6对miR-422a mimics调控H2O2条件下PC12细胞活力、LDH漏出率和凋亡的影响。结果:H2O2处理后PC12细胞中miR-422a表达水平降低（P<0.05）。H2O2处理后的PC12细胞的活力降低,LDH漏出率和细胞凋亡率升高（P<0.05）。miR-422a mimics能够提高H2O2条件下PC12细胞活力,降低LDH漏出率和凋亡率（P<0.05）。miR-422a靶向负调控SOX6表达。SOX6过表达载体可以逆转miR-422a对PC12细胞活力提高和LDH漏出率、细胞凋亡率降低的作用（P<0.05）。结论:miR-422a通过靶向抑制SOX6可降低H2O2对PC12细胞的损伤作用。

论文目录

• 材 料 和 方 法
•   1 材料
•   2 方法
•     2.1 real-time PCR法测定H2O2处理后PC12细胞中miR-422a的表达
•     2.2 细胞转染和分组
•     2.3 MTT法测定细胞活力
•     2.4 LDH漏出率的检测
•     2.5 流式细胞术测定细胞凋亡
•     2.6 miR-422a靶基因的预测及鉴定
•     2.7 Western blot检测SOX6蛋白的表达
•     2.8 SOX6过表达对细胞活力、凋亡和LDH漏出的影响
•   3 统计学处理
• 结 果
•   1 H2O2诱导PC12细胞中miR-422a表达下调
•   2 miR-422a mimics提高H2O2刺激下PC12细胞中miR-422a的水平
•   3 miR-422a对H2O2刺激下PC12细胞凋亡、LDH漏出和细胞活力的影响
•   4 miR-422a靶向调控SOX6
•   5 miR-422a负调控SOX6蛋白表达
•   6 SOX6过表达载体逆转过表达miR-422a对H2O2处理后PC12细胞凋亡、LDH漏出和细胞活力的影响
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张广华,铁婷婷,巨虎,许常林,肖宗宇,苑乐

关键词: 微小,细胞,基因,细胞凋亡,细胞活力

来源: 中国病理生理杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 神经病学

单位: 青海大学附属医院神经外科,青海大学附属医院神经内科,青海大学附属医院教学管理部

基金: 青海大学附属医院中青年科技基金项目(No.ASRF-2015-ZD-01)

分类号: R741

页码: 2235-2240

总页数: 6

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