过表达CLPTM1L降低95-D肺癌细胞对吉西他滨的敏感性

论文摘要

目的研究CLPTM1L基因与肺癌细胞对吉西他滨敏感性的关系,并探讨其潜在的作用机制。方法构建针对CLPTM1L基因的过表达慢病毒,并感染肺癌95-D细胞,将细胞分为CLPTM1L过表达组和对照组;采用CCK-8法检测吉西他滨处理后过表达组和对照组细胞增殖的变化;采用荧光定量PCR、Western blot和免疫化学发光法检测CLPTM1L基因和蛋白变化;采用生物荧光法检测Caspase-3/7和Caspase-9活性的变化;采用Western blot检测p-4E-BP1蛋白变化。结果 CLPTM1L过表达慢病毒感染95-D细胞后,CLPTM1L过表达组的CLPTM1L基因水平（P=0.036）和蛋白表达（P<0.01）均高于对照组;与对照组相比,吉西他滨处理后CLPTM1L过表达组细胞增殖显著上升（P<0.01）;Caspase活性检测显示,CLPTM1L过表达组Caspase-3/7和Caspase-9活性较对照组明显下降（P<0.01）;Western blot检测显示,CLPTM1L过表达组4E-BP1的磷酸化水平与对照组比较显著增高（P<0.01）。结论 CLPTM1L过表达可降低肺癌细胞对吉西他滨的敏感性,其机制可能是增加了4E-BP1的磷酸化水平。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验试剂
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 肺癌细胞95-D培养
•     1.2.2 CLPTM1L基因过表达慢病毒制备及感染
•     1.2.3 荧光定量PCR检测CLPTM1L mRNA表达水平
•     1.2.4 免疫细胞化学法检测CLPTM1L蛋白表达
•     1.2.5 CCK-8检测细胞增殖
•     1.2.6 Caspase-3/7和Caspase-9活性检测
•     1.2.7 Western blot检测蛋白表达变化
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 CLPTM1L过表达细胞株构建
•   2.2 CLPTM1L过表达对吉西他滨抑制95-D细胞增殖的影响
•   2.3 CLPTM1L过表达对吉西他滨激活95-D细胞内Caspase-3/7和Caspase-9的影响
•   2.4 CLPTM1L过表达对p-4E-BP1的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孙亦鹏,倪振华,吴颖颖,陈清阁,毕俊杰,林玉华,王雄彪

关键词: 肺癌,吉西他滨

来源: 实用肿瘤学杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 上海中医药大学附属普陀医院

基金: 上海市科学技术委员会科研计划项目(编号:18140904000,17401970900)

分类号: R734.2

页码: 486-490

总页数: 5

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