ICR小鼠体内染色体畸变试验的优化

论文摘要

目的使用ICR小鼠开展体内染色体畸变实验,通过在不同时间点给予环磷酰胺（cyclophosphamide,CP）及秋水仙素（colchicine,COL）,对比不同给药/取材时间点及不同给药浓度对小鼠骨髓细胞染色体畸变发生率的影响。方法共36只约7～8周龄ICR雄性小鼠首先随机分为药后18 h取材组和给药后24 h取材组,再下设COL4 mg/kg体质量（取材前4 h,i.p.）和10 mg/kg（取材前2 h,i.p.）给药组,以0. 9%氯化钠注射液为溶媒对照,分别给予CP 0 mg/kg、10 mg/kg和40 mg/kg,每小组各3只动物。记录实验期间给药前后动物体质量。阴性对照组和10 mg/kg CP组间隔24 h分两次给药,40 mg/kg CP为单次给药。给药后18 h或24 h取材,取材前2 h或4 h分别腹腔注射COL。取材时摘取全部实验动物双侧股骨,收集骨髓细胞悬液制备Giemsa染色体标本用于分析染色体畸变类型,并计算每组平均结构畸变细胞率（不含ctg及csg,AC%）、结构畸变细胞率（含ctg及csg,ACG%）、多畸变细胞率（不含ctg及csg,MAC%）及多倍体细胞率（PC%）。结果本研究所用CP和COL对动物体质量无明显影响,给药剂量和给药频率可行。与各小组内的溶媒对照组相比,所有CP给药组的AC%、AGC%和MAC%均显著性升高（P<0. 01）,且给药剂量高时染色体损伤更为严重; CP18 h-COL4h组的AC%、ACG%和MAC%均低于CP18 hCOL2h组,并存在显著性差异（P<0. 05）,提示使用高剂量的COL（10 mg/kg）可产生额外的染色体损伤。溶媒对照组中的结构性畸变类型绝大多数为裂隙,而染色体单体及染色体断裂是CP引起的最主要畸变类型。结论开展ICR小鼠染色体畸变试验时,在CP给药后约18 h、COL给药后4 h取材较为理想。本研究通过对试验条件的摸索不但积累了背景数据,也为相关研究者提供借鉴。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•     1.1.1 试剂:
•     1.1.2 实验动物:
•     1.1.3 仪器:
•   1.2 方法
•     1.2.1 动物分组及给药:
•     1.2.2 临床症状观察及体质量测定:
•     1.2.3取材及标本制作:
•     1.2.4 取材及标本制作:
•   1.3 统计方法
• 2 结果
•   2.1 整体毒性评价
•   2.2 染色体畸变分析结果
•     2.2.1 不同给药浓度及取材时间点染色体畸变类型的关系
•     2.2.2 不同CP给药浓度下染色体结构畸变类型分布关系
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 霍桂桃,胡燕平,杨莹,赵婷婷,宋捷,汪祺,文海若

关键词: 小鼠,染色体畸变,环磷酰胺,秋水仙素,方法学研究

来源: 实验动物科学 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 中国食品药品检定研究院

基金: 国家十三五“重大新药创制”专项课题(No.2018ZX09201017),国家自然科学基金(No.81503347)

分类号: Q95-33

页码: 1-8

总页数: 8

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