猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定及floR基因检测

论文摘要

为探究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）临床分离株对氟苯尼考（FFC）的耐药性及floR基因的流行与分布情况,收集河南、湖北、江西、陕西、湖南、山西、安徽等7个省份合作猪场送检的病死猪肺脏、脾脏、支气管黏液等206份病料样本,从中分离APP并鉴定,采用微量肉汤稀释法测定分离菌株对FFC的敏感性,PCR及测序方法检测floR基因,并用随机引物PCR（AP-PCR）方法分析临床分离菌株之间的同源性。结果表明,成功分离鉴定了APP 28株,分离率为13.59%。4株APP对FFC耐药,耐药率为14.29%;15株携带floR基因,floR检出率为53.57%,高于APP对FFC的耐药率;有11株分离菌floR阳性但对FFC并不耐药。分析RAPD系统树状图发现,28株APP被分为几乎无核苷酸同源性的A和B 2大类、25种RAPD型,其中A类25株,分22种RAPD型,14株携带floR基因,这些菌株间的核苷酸同源性为40%～80%;B类3株,分3种RAPD型,1株携带floR基因。本研究提示APP的floR基因主要以水平方式传播。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 病料的采集
•     1.1.2 标准菌株
•     1.1.3 培养基及相关试剂
•     1.1.4 引物设计与合成
•     1.1.5 药物
•   1.2 方法
•     1.2.1 病原菌分离与镜检
•     1.2.2 分离菌株的生化试验鉴定
•     1.2.3 分离菌株的PCR鉴定
•     1.2.4 药物储备液配制
•     1.2.5 药敏试验
•     1.2.6 细菌基因组DNA的制备
•     1.2.7 floR基因检测
•     1.2.8 随机引物PCR（AP-PCR）
• 2 结果与分析
•   2.1 细菌的分离鉴定
•     2.1.1 分离菌株的培养特性
•     2.1.2 分离菌株的生化试验鉴定结果
•     2.1.3 分离菌株的PCR鉴定结果
•   2.2 药敏试验结果
•   2.3 floR基因检测结果
•   2.4 随机扩增多态性DNA（RAPD）
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 罗行炜,孙华润,魏单单,朱莹莹,徐引弟,贺丹丹,刘建华,潘玉善,吴华,苑丽,胡功政

关键词: 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,耐药性,基因,随机扩增多态性

来源: 江苏农业科学 2019年21期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河南农业大学牧医工程学院,河南省农业科学院畜牧兽医研究所

基金: 国家重点研发计划(编号:2016YFD0501304)

分类号: S852.61

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.21.055

页码: 228-232

总页数: 5

文件大小: 1031K

下载量: 130