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H5亚型禽流感病毒荧光检测试纸条的研制

论文摘要

为了对引起家禽重大经济损失和具有公共卫生意义的H5亚型禽流感病毒(AIV)进行快速超敏检测,本研究研制了针对HA蛋白的4株单克隆抗体(MAb)杂交瘤细胞株,通过MAb的两两配对试验,以荧光量子点作为抗体标记生物材料,基于夹心法原理建立了H5亚型AIV荧光免疫层析检测试纸条。结果显示,该方法能够特异性检测出H5N1、H5N2等H5亚型AIV,而与H1N1、H3N2、H7N9、H9N2、NDV等其他病原无交叉反应;对标准检测抗原H5N1(Re-6)的最低检测量为1 ng/mL,比市售H5亚型AIV胶体金检测试纸条灵敏度高100倍;该方法的变异系数(CV)值在10%以内,与商品化的试剂盒检测结果符合率达99.8%。本文建立的H5亚型AIV荧光检测试纸条快速、敏感,检测结果准确可靠,为H5亚型禽流感的流行病学调查和快速诊断提供了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要试验材料
  •   1.2 单克隆抗体(MAb)的制备
  •   1.3 H5-AIV-QD-LFIA试纸条的研制
  •   1.4 H5-AIV-QD-LFIA试剂条的评估试验
  •     1.4.1 特异性试验
  •     1.4.2 敏感性试验
  •     1.4.3 重复性试验
  •     1.4.4 临床样品的检测
  • 2 结果
  •   2.1 获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株
  •   2.2 H5-AIV-QD-LFIA试剂条特异性试验结果
  •   2.3 H5-AIV-QD-LFIA试剂条敏感试验结果
  •   2.4 H5-AIV-QD-LFIA重复性试验结果
  •   2.5 H5-AIV-QD-LFIA临床样品检测结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 孙洁,陈雨,吴峰,王津津,陈兵,郑晓聪,陶虹,刘建利,陈书琨,林庆燕,秦智锋

    关键词: 亚型禽流感病毒,荧光量子点,检测试纸条,快速检测

    来源: 中国兽医杂志 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 深圳海关动植物检验检疫技术中心,深圳市检验检疫科学研究院,大连海洋大学水产与生命学院,清华大学深圳研究生院

    基金: 国家重点研发计划(2016YFD0501103),深圳市知识创新计划基础研究布局项目(JCYJ20170816143646446)

    分类号: S852.65

    页码: 32-35+132

    总页数: 5

    文件大小: 931K

    下载量: 60

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    本文来源: https://www.lunwen90.cn/article/27d487e2141d4ca77ecf95c9.html