MCU介导的线粒体Ca2+稳态失调参与模拟失重引起的大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡

论文摘要

目的观察线粒体钙单向转运体(mitochondrial Ca2+ uniporter,MCU)在模拟失重引起大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡中的作用。方法采用尾吊大鼠方法建立模拟失重模型,实验大鼠分为对照（Control,CON）组和尾吊（tail suspension,SUS）组。造模成功后,分离脑动脉血管,取病理切片行TUNEL染色及细胞色素C免疫荧光染色检测平滑肌细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白及MCU蛋白表达水平,最后急性分离脑动脉平滑肌细胞,分别采用Rhod-2 AM、mitoSOX染色检测细胞线粒体内Ca2+水平和活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平。结果与对照组比较,尾吊组模拟失重大鼠基底动脉平滑肌细胞TUNEL阳性率显著增加（P<0.05）,细胞色素C入核率显著增加（P<0.05）,促凋亡蛋白cleaved caspas-9、cleaved caspas-3、Bax表达显著增加（P<0.05）,抑制凋亡蛋白Bcl-2显著降低（P<0.05）;同时,MCU蛋白表达水平下调（P<0.05）;此外,尾吊组大鼠脑动脉平滑肌细胞线粒体内Ca2+浓度下降（P<0.05）及ROS水平增加（P<0.05）。结论模拟失重引起大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡,同时MCU表达降低,提示MCU可能参与了模拟失重引起的脑动脉平滑肌细胞凋亡这一病理过程。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 模拟失重大鼠模型的建立
•     1.2.2 TUNEL染色法检测细胞凋亡
•     1.2.3 Western blot法检测蛋白表达
•     1.2.4 急性分离大鼠脑动脉平滑肌细胞
•     1.2.5 免疫荧光检测脑动脉平滑肌细胞MCU与细胞色素C
•     1.2.6 脑动脉平滑肌细胞线粒体ROS与Ca2+浓度检测
•   1.3 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 实验动物建模
•   2.2 模拟失重对大鼠脑动脉血管平滑肌细胞凋亡的影响
•   2.3 模拟失重大鼠脑动脉血管平滑肌细胞MCU表达的检测
•   2.4 模拟失重大鼠脑动脉平滑肌细胞线粒体Ca2+浓度的检测
•   2.5 模拟失重大鼠脑动脉平滑肌细胞ROS水平的检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨璐,贾敏,葛逸玲,谢满江,陈励

关键词: 模拟失重,脑动脉平滑肌,线粒体钙单向转运体,凋亡

来源: 心脏杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅱ辑

专业: 航空航天科学与工程,特种医学,军事医学与卫生

单位: 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室,空军军医大学学员一旅,空军军医大学航空航天生理学教研室

基金: 国家自然科学基金项目资助(81700712),陕西省自然科学基金项目资助(2018JQ8038)

分类号: R85

页码: 456-461

总页数: 6

文件大小: 2934K

下载量: 176