贴壁培养法鉴定海马神经干/祖细胞的增殖与分化能力

论文摘要

背景:神经干/祖细胞广泛应用于神经发育、神经相关性疾病和细胞移植等研究,体外分离培养的神经干/祖细胞能够为相关研究提供细胞模型。目的:探讨分离新生小鼠海马组织并高效培养出神经干/祖细胞的方法,并使用贴壁培养法对其增殖以及分化能力进行鉴定。方法:分离新生C57BL/6小鼠海马组织,培养原代神经干/祖细胞并扩增,进行形态学观察;联合使用多聚赖氨酸和层粘连蛋白促进细胞贴附,进行贴壁培养;免疫荧光法检测特异性标志蛋白Nestin表达和增殖指标Ki-67的表达;使用神经干/祖细胞分化培养基诱导分化培养7 d后,免疫荧光法检测GFAP、DCX、Tuj1和S100β的表达。结果与结论:（1）培养的神经干/祖细胞约82%表达Nestin,约49%表达Ki-67;（2）诱导分化后,少数细胞为DCX阳性,大多数细胞为GFAP阳性。荧光双色染色后显示Tuj1和S100β表达的神经元和星形胶质细胞比例为1∶1.7;（3）结果显示,从新生C57BL/6小鼠海马组织中成功分离并高效培养出神经干/祖细胞,贴壁培养后有效地对其增殖和分化能力进行了鉴定,能够为进一步实验研究提供足够的细胞来源。

论文目录

• 文章快速阅读:
• 文题释义:
• 0引言Introduction
• 1 材料和方法Materials and methods
•   1.1 设计
•   1.2 时间及地点
•   1.3 材料
•     1.3.1 实验动物
•     1.3.2 实验试剂和仪器
•     1.3.3 培养基配方
•   1.4 实验方法
•     1.4.1 神经干/祖细胞原代培养
•     1.4.2 神经干/祖细胞传代培养
•     1.4.3 Chamber 8孔腔室玻片包被
•     1.4.4 神经干/祖细胞贴壁培养
•     1.4.5 神经干/祖细胞鉴定
•     1.4.6 免疫荧光细胞化学染色
•   1.5 主要指标观察
• 2 结果Results
•   2.1 神经干/祖细胞原代和传代培养形态变化
•   2.2 神经干/祖细胞贴壁培养形态变化
•   2.3 神经干/祖细胞贴壁培养后Nestin的表达
•   2.4 神经干/祖细胞贴壁培养后增殖指标Ki-67的表达
•   2.5 神经干/祖细胞贴壁培养诱导分化及鉴定结果
• 3 讨论Discussion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 胡玉婷,刘菲,刘静,陶欣荣

关键词: 神经干细胞,海马,组织工程,神经干,祖细胞,悬浮培养法,贴壁培养法,干细胞,国家自然科学基金

来源: 中国组织工程研究 2019年09期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 安徽理工大学医学院

基金: 国家自然科学基金面上项目(81471161),项目负责人:陶欣荣,安徽省RC18-学科(专业)拔尖人才(gxbjZD16),项目负责人:陶欣荣~~

分类号: R329.2

页码: 1330-1335

总页数: 6

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