论文摘要
目的从样本获取方式、储存条件和DNA提取方法等方面探索快速有效、低成本、无创伤、适合于大规模流行病学研究的基因组DNA提取方法。方法对来源于血液和唾液的各种样本DNA提取方法进行优化,并采用大量的样本验证不同方法提取唾液基因组DNA的稳定性。随机抽取两份质检合格的DNA,采用二代测序技术对MTHFR C677T基因多态性位点分型检测。结果带有分离胶的血细胞样本提取到的合格的DNA仅占全部样本的30%,凝胶严重影响DNA的提取效果;EDTA抗凝血样本DNA提取效果良好,DNA浓度为180.20±20.30ng/μL,OD260/280为1.90±0.10;分离血清后的凝固血细胞样本中DNA降解严重,提取的DNA浓度在28.91-34.53ng/μL之间;新鲜唾液和-20℃保存一个月的唾液样本经提取后得到的DNA浓度和纯度均合格,且不存在显著性差异;不同唾液保护液作用下的唾液样本经过提取后得到的DNA浓度和纯度均合格,且不存在显著性差异,但与新鲜唾液相比DNA浓度偏低。二代测序图谱显示按照质量控制标准筛选出的合格DNA样品,可以实现体外目的片段的成功扩增和MTHFR C677T基因多态性位点分型检测。结论血液和唾液样本均是人体基因组DNA的良好来源,唾液样本以其低成本,无创伤和质量合格的特点成为一种更有效的人体基因组DNA采样方式。
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文章来源
类型: 国际会议
作者: 张春红,霍军生,陈晨,孙静,黄建
关键词: 血液,唾液,提取,单核苷酸多态性
来源: 营养研究与临床实践——第十四届全国营养科学大会暨第十一届亚太临床营养大会、第二届全球华人营养科学家大会 2019-09-20
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 生物学,基础医学
单位: 中国疾病预防控制中心营养与健康所海军军医大学
分类号: R394
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.010706
页码: 449-450
总页数: 2
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