阈值法检测人用狂犬病疫苗宿主细胞DNA残留量

阈值法检测人用狂犬病疫苗宿主细胞DNA残留量

论文摘要

目的建立人用狂犬病疫苗宿主细胞DNA残留量的阈值检测法,并进行验证。方法验证阈值法的线性范围、准确性及精密度。采用阈值法和DNA探针杂交法分别对3批狂犬病疫苗原液样品宿主细胞DNA残留量进行测定,并进行比较。结果 DNA标准品浓度为3~200 pg时,与检测信号(μV/s)呈良好的线性关系,直线回归方程为y=10. 812 x-36. 761,R2=0. 994 5;加入100和25 pg DNA标准品的样品回收率为88%~110%,CV分别为7. 7%和7. 4%;精密度各次检测CV均<10%。阈值法检测3批狂犬病疫苗原液样品宿主细胞DNA残留量分别为181. 9、104. 2和64. 6 pg/mL,DNA探针杂交法检测结果分别为约250、约100和<100 pg/mL,二者检测结果相符。结论阈值法有望应用于生物制品宿主细胞残留DNA含量的常规检测,且具有良好的准确性及精密度。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 供试品
  •   1.2 细胞
  •   1.3 主要试剂及仪器
  •   1.4 基因组DNA标准品的制备
  •   1.5 检测方法
  •   1.6 方法的验证
  •     1.6.1 线性范围的确立
  •     1.6.2 准确性
  •     1.6.3 精密度
  •   1.7 两种方法的比较
  •     1.7.1 狂犬病疫苗原液样品宿主DNA的提取
  •     1.7.2 DNA探针杂交法测定
  •     1.7.3 阈值法测定
  • 2 结果
  •   2.1 方法的验证
  •     2.1.1 线性范围
  •     2.1.2 准确性
  •     2.1.3 精密度
  •   2.2 两种方法的比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨萍,孙博,刘大维,隋娜,闫慧,张喜珍,谷铁军,张艳

    关键词: 阈值法,人用狂犬病疫苗,宿主细胞残留,探针杂交法

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 吉林大学艾滋病疫苗国家工程实验室,吉林大学生命科学学院,长春百克生物科技股份公司

    分类号: R392-33

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002684

    页码: 806-809

    总页数: 4

    文件大小: 176K

    下载量: 76

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