导读:本文包含了谱系限制性神经前体细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:脊髓损伤,谱系限制性神经前体细胞,移植,大鼠
谱系限制性神经前体细胞论文文献综述
黄雷[1]（2008）在《谱系限制性神经前体细胞（NPC）移植治疗脊髓损伤的实验研究》一文中研究指出背景:着名神经解剖学家Ramony Cajal[1]在20世纪初期曾报道:中枢神经系统的损伤不可修复。这个理论在其后的很长时间内被广为接受。自从人们从胚胎鼠和成年鼠纹状体中分离出神经干细胞,并发现它具有多向分化的潜能以来[2],彻底改变了以往认为中枢神经系统神经元不能再生的认识。但随着广大学者应用神经干细胞移植治疗中枢神经系统损伤研究的不断深入,神经干细胞作为移植物的缺陷也逐渐被认识,如在非神经发生区存活能力差及主要分化为胶质细胞等。进而国外学者逐渐将研究重点转向神经前体细胞,神经前体细胞移植治疗脊髓损伤成为新的研究热点。目的:探讨谱系限制性神经前体细胞(NRP/GRP)在脊髓中度挫伤后即刻移植对脊髓损伤的修复作用。方法:成年雌性SD大鼠48只,随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)、DMEM培养基移植组(C组)、NRP/GRP移植组(D组)。利用自制电控打击器制作脊髓中度挫伤的动物模型。通过BBB评分、斜板试验、皮层体感诱发电位测定,评价运动、感觉功能恢复情况。术后4天、2周和5周时,分别观察BrdU标记的移植细胞在体内的存活、迁移和分化情况。结果:NRP/GRP移植组(D组)自术后4周起,BBB评分明显恢复,自术后5周起,斜板试验最大角度优于其它脊髓损伤组。术后5周D组CSEP波形恢复仍不明显。D组在术后4天见有较多的BrdU标记细胞在体内存活、2周时出现明显迁移、5周时分化为成熟神经元,星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论:谱系限制性神经前体细胞在大鼠脊髓中度挫伤后移植,可以在体内存活、迁移并分化为成熟细胞表型,促进损伤脊髓的神经纤维修复与再生。(本文来源于《大连医科大学》期刊2008-04-01）
李鹏[2]（2008）在《滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞抗过氧化损伤的实验研究》一文中研究指出背景:脊髓损伤是骨科的常见多发伤,后果严重,预后差,临床治疗效果尚不满意。近年来人们逐渐认识到脊髓损伤后的永久性神经损害是原发损伤引起的一系列继发反应所致。通过大量研究,有学者认为可以通过神经干细胞移植治疗脊髓损伤,而谱系限制性神经前体细胞(NRPS细胞)是目前较好的选择。然而在不断改进移植方式的同时,人们发现损伤脊髓的局部微环境对移植的成败也起到了至关重要的作用。我校长期对“滋补脾阴方药”进行研究,发现其有保护脊髓继发损伤,提高脑神经线粒体膜抗氧化的能力。本药是否可以克服损伤脊髓微环境,提高移植细胞存活率是一崭新课题,有待于进一步研究。目的:研究滋补脾阴方药对过氧化氢(H2O2)诱导限制性神经元前体细胞(NRPS细胞)脂质过氧化损伤的保护作用,为进一步体内移植实验治疗脊髓损伤奠定基础。方法:取SD大鼠胚胎脊髓,行原位免疫荧光鉴定确认为NRPS细胞。将脊髓消化吹打后贴壁培养3-5天,利用流式细胞仪行抗Nestin、抗PSA-NCAM、抗A2B5免疫荧光鉴定,确认培养的细胞为NRPS细胞。利用红外光谱对含药血清和空白血清成分进行测定,确认含药血清和空白血清成分有所不同,滋补脾阴方药确实进入到血清中。建立实验模型,将细胞分为正常组、损伤组、空白血清干预组、中药血清干预组、空白血清干预后损伤组、中药血清干预后损伤组。其中血清浓度分别为0.25%、0.5%、1%、2%、4%,预保护时间为8小时;H2O2浓度分别为0.05、0.1、0.2mmol/L,损伤时间为4小时。将各组于倒置相差显微镜下对细胞进行一般形态学观察和分组比较;利用MTT法计算各组细胞存活率;并对各组进行Hoechst染色,于倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡情况;检测细胞内SOD、MDA含量,得知细胞状态和受损程度,确定滋脾阴方药血清保护作用及最佳保护浓度。结果:H2O2可造成细胞MDA增高,SOD下降,符合脂质过氧化特征,并使细胞存活率降低,加快细胞凋亡,与H2O2浓度呈正性关系。滋补脾阴方药在0.25-2%浓度下对H2O2诱导的过氧化损伤细胞有保护作用,可以提高细胞存活率,预防NRPS细胞在脂质过氧化损伤下SOD的减少,并抑制MDA的生成,且在1%浓度时最保护能力最强。但含药血清大于4%浓度后便呈现出较明显的药理毒性作用,可以加快细胞的凋亡。结论:滋补脾阴方药血清在一定浓度下有抗脂质过氧化损伤作用,可以预防细胞SOD下降,减少MDA生成,提高了NRPS细胞在脂质过氧化条件下的存活率和存活状态,且在1%浓度时能发挥最佳保护作用。而空白血清对NRPS细胞无明显预保护及抗过氧化损伤作用,间接证明了滋补脾阴方药具有抗脂质过氧化作用。(本文来源于《大连医科大学》期刊2008-04-01）
南丰[3]（2007）在《滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞移植治疗脊髓损伤的研究》一文中研究指出脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是骨科领域致残率、死亡率最高的创伤之一,是交通、工矿事故及运动意外中常见的损伤。近年来,神经干细胞(neural stem cell, NSC)移植成为SCI截瘫治疗的研究焦点之一。但最近国外有研究表明,将体外悬浮方式培养的大鼠胚胎NSC移植入成鼠损伤脊髓后,移植细胞只能分化成星形胶质细胞;并认为这是由于宿主损伤脊髓内环境不支持NSC向神经元祖细胞分化所致,但损伤脊髓却允许谱系限制性的神经元前体细胞(neuronal-restricted precursor cell, NRP)和胶质前体细胞(glial-restricted precursor cell,GRP)的存活及分化。贴壁方式培养的神经前体细胞主要由NRP/GRP组成,于是贴壁培养手段重新受到国外一些学者的重视。然而,究竟何种类型细胞更适于SCI移植治疗,目前尚无定论。本实验比较了神经前体细胞在悬浮与贴壁两种培养方式下的生长特性,旨在为选择合适类型的细胞移植治疗SCI提供参考依据。SCI包括原发性损伤和继发性损伤。原发性损伤为不可逆性改变,故治疗主要针对继发性损伤。研究已发现由氧自由基介导的脂质过氧化反应对脊髓继发性损伤起主要作用。脂质过氧化损伤的程度对移植细胞的命运影响也很大。祖国医学将SCI所致的截瘫,归属于体惰和痿证的范畴,治疗上以活血化瘀、疏通督脉、通经活络、益气补血、补肾填精为主。肾主骨生精髓,精髓伤则肾伤,精血互生,且肾所生精髓需靠后天之本、气血化生之源的脾胃源源不断地充盈。滋补脾阴方药(nourishing piyin remedy)具有益气补血、补肾填精、充盈脾胃等功效,可以改善脊髓细胞线粒体ATP酶活性,缓解脂质过氧化反应;并能通过调节磷脂代谢,增强线粒体膜抗氧化能力以保护脑神经细胞。本实验探讨了滋补脾阴方药含药血清对NRP/GRP细胞脂质过氧化损伤的保护作用及机制,旨在为进一步联合应用含药血清和NRP/GRP细胞移植治疗SCI奠定基础。目前在SCI模型建立方面,国内外以Allen装置或NYU装置打击的轻度挫伤模型(致伤力2.5g×10cm)应用较为广泛。中度挫伤模型(致伤力5g×10cm)涉及很少。轻度脊髓挫伤后,早期的组织缺失及后期的继发损伤均较轻。而中度挫伤在形态学及病理生理学上的损伤均较重,移植物的生存环境更差,其中过氧化损伤作用尤为明显。因此,本实验利用滋补脾阴方药含药血清的抗过氧化损伤作用,预先保护移植NRP/GRP细胞,以探讨二者联合应用对脊髓中度挫伤的神经修复作用。实验一胚胎脊髓源神经前体细胞悬浮与贴壁培养的生长特性研究目的:比较胚胎脊髓源神经前体细胞在悬浮与贴壁两种培养方式下的生长特性,为选择合适类型的细胞移植治疗脊髓损伤提供参考依据。方法:取孕13.5天的SD大鼠胚胎脊髓组织,按悬浮和贴壁两种方式分组培养神经前体细胞。观察细胞生长形态学变化。描绘细胞生长曲线。培养72小时后行BrdU增殖率检测,Nestin、PSA-NCAM、A2B5抗体荧光鉴定和流式细胞检测。部分细胞行胎牛血清诱导分化试验。结果:悬浮组细胞多以细胞球形态生长,贴壁组细胞呈散在生长。悬浮组细胞生长状态更旺盛。培养72小时悬浮和贴壁组细胞的BrdU增殖率分别为28.50%±4.67%和9.11%±1.82%(P<0.05);两组细胞Nestin、NCAM、A2B5抗体荧光反应均呈阳性;悬浮组各抗体表达率相对较均匀,而贴壁组以NCAM、A2B5抗体表达为主(>80%)。两组细胞经胎牛血清诱导,均能逐渐分化成熟,表达NF-200,GFAP,Gal-C荧光抗体。结论:悬浮组细胞增殖能力强于贴壁组。早期悬浮培养细胞以神经干细胞和祖细胞为主;而贴壁培养细胞则以谱系限制性神经前体细胞为主(>80%)。悬浮及贴壁组细胞经胎牛血清诱导,均可分化成为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。实验二滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞抗脂质过氧化损伤的研究目的:探讨滋补脾阴方药含药血清对谱系限制性神经前体细胞脂质过氧化损伤的保护作用,为进一步体内移植实验治疗脊髓损伤奠定基础。方法:取贴壁培养3天的谱系限制性神经前体细胞,分正常组、损伤组、空白血清干预组、中药血清干预组、空白血清干预后损伤组和中药血清干预后损伤组,建立过氧化氢损伤模型。观察细胞形态学变化;利用MTT法计算细胞存活率;检测细胞内MDA含量和SOD活力;并行Hoechst33258荧光染色,观察细胞荧光分布和凋亡情况。结果:过氧化氢损伤可造成细胞存活率显着降低;细胞内MDA含量明显增加,SOD活力明显下降;并加快细胞凋亡。经含药血清干预后的细胞在同样损伤条件下,细胞存活率提高;并避免了细胞内MDA含量的过度增加,和SOD活力的过度下降;还能减轻细胞凋亡。结论:滋补脾阴方药含药血清对谱系限制性神经前体细胞脂质过氧化损伤起一定程度的保护作用;并能改善过氧化损伤后细胞的存活率和存活状态。实验叁滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的研究目的:探讨谱系限制性神经前体细胞(NRP/GRP)移植对脊髓中度挫伤的神经修复作用,及滋补脾阴方药含药血清对移植细胞在体内存活、迁移和分化的影响。方法:成年雌性SD大鼠60只,随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)、DMEM培养基移植组(C组)、NRP/GRP移植组(D组)、NRP/GRP与空白血清共移植组(E组),和NRP/GRP与中药血清共移植组(F组)。利用自制电控打击器制作动物模型。通过BBB评分、皮层体感诱发电位测定,评价运动、感觉功能恢复情况。术后4天、2周和5周时,分别观察BrdU标记的移植细胞在体内的存活、迁移和分化情况。结果:F组在术后2周,BBB评分明显恢复。D组、E组在术后4周,BBB评分明显恢复。术后5周F组CSEP波形略恢复。术后4天、2周和5周时,细胞移植叁组分别可见较多的BrdU标记细胞在体内存活、迁移和分化,均以F组最明显。结论:谱系限制性神经前体细胞移植后,可以在体内存活、迁移并分化成熟,促进大鼠脊髓中度挫伤后神经纤维的修复与再生。滋补脾阴方药含药血清可以改善损伤脊髓内环境,有利于移植细胞的存活、迁移及分化。二者联合应用具有协同效应。综上所述,本实验通过对滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的研究,获得了以下成果:1.早期悬浮培养细胞是以神经干细胞和神经祖细胞为主的混合物;而贴壁培养细胞则以谱系限制性神经前体细胞为主(>80%)。悬浮及贴壁培养细胞经胎牛血清诱导,均可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。2.滋补脾阴方药含药血清通过避免细胞过氧化损伤后SOD过度下降,减少损伤后MDA生成,对谱系限制性神经前体细胞脂质过氧化损伤起一定程度的保护作用。3.谱系限制性神经前体细胞在脊髓中度挫伤后即刻移植,可以在体内存活、迁移并分化为成熟的神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞,从而促进大鼠脊髓损伤后神经纤维的修复与再生;是治疗脊髓损伤较有前景的细胞移植物。4.滋补脾阴方药含药血清可以改善损伤脊髓的内环境,减轻移植细胞的过氧化损伤反应,有利于移植谱系限制性神经前体细胞在体内的存活、迁移和分化。滋补脾阴方药含药血清与谱系限制性神经前体细胞移植联合应用治疗脊髓损伤,具有协同效应。5.如何进一步增强谱系限制性神经前体细胞的增殖能力,增强滋补脾阴方药含药血清的抗氧化损伤作用,还有待今后的实验研究与完善。谱系限制性神经前体细胞与组织工程支架的联合应用,与基因转染技术的联合应用方面还有广阔的研究空间,待广大学者研究探讨。(本文来源于《大连医科大学》期刊2007-05-01）
谱系限制性神经前体细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:脊髓损伤是骨科的常见多发伤,后果严重,预后差,临床治疗效果尚不满意。近年来人们逐渐认识到脊髓损伤后的永久性神经损害是原发损伤引起的一系列继发反应所致。通过大量研究,有学者认为可以通过神经干细胞移植治疗脊髓损伤,而谱系限制性神经前体细胞(NRPS细胞)是目前较好的选择。然而在不断改进移植方式的同时,人们发现损伤脊髓的局部微环境对移植的成败也起到了至关重要的作用。我校长期对“滋补脾阴方药”进行研究,发现其有保护脊髓继发损伤,提高脑神经线粒体膜抗氧化的能力。本药是否可以克服损伤脊髓微环境,提高移植细胞存活率是一崭新课题,有待于进一步研究。目的:研究滋补脾阴方药对过氧化氢(H2O2)诱导限制性神经元前体细胞(NRPS细胞)脂质过氧化损伤的保护作用,为进一步体内移植实验治疗脊髓损伤奠定基础。方法:取SD大鼠胚胎脊髓,行原位免疫荧光鉴定确认为NRPS细胞。将脊髓消化吹打后贴壁培养3-5天,利用流式细胞仪行抗Nestin、抗PSA-NCAM、抗A2B5免疫荧光鉴定,确认培养的细胞为NRPS细胞。利用红外光谱对含药血清和空白血清成分进行测定,确认含药血清和空白血清成分有所不同,滋补脾阴方药确实进入到血清中。建立实验模型,将细胞分为正常组、损伤组、空白血清干预组、中药血清干预组、空白血清干预后损伤组、中药血清干预后损伤组。其中血清浓度分别为0.25%、0.5%、1%、2%、4%,预保护时间为8小时;H2O2浓度分别为0.05、0.1、0.2mmol/L,损伤时间为4小时。将各组于倒置相差显微镜下对细胞进行一般形态学观察和分组比较;利用MTT法计算各组细胞存活率;并对各组进行Hoechst染色,于倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡情况;检测细胞内SOD、MDA含量,得知细胞状态和受损程度,确定滋脾阴方药血清保护作用及最佳保护浓度。结果:H2O2可造成细胞MDA增高,SOD下降,符合脂质过氧化特征,并使细胞存活率降低,加快细胞凋亡,与H2O2浓度呈正性关系。滋补脾阴方药在0.25-2%浓度下对H2O2诱导的过氧化损伤细胞有保护作用,可以提高细胞存活率,预防NRPS细胞在脂质过氧化损伤下SOD的减少,并抑制MDA的生成,且在1%浓度时最保护能力最强。但含药血清大于4%浓度后便呈现出较明显的药理毒性作用,可以加快细胞的凋亡。结论:滋补脾阴方药血清在一定浓度下有抗脂质过氧化损伤作用,可以预防细胞SOD下降,减少MDA生成,提高了NRPS细胞在脂质过氧化条件下的存活率和存活状态,且在1%浓度时能发挥最佳保护作用。而空白血清对NRPS细胞无明显预保护及抗过氧化损伤作用,间接证明了滋补脾阴方药具有抗脂质过氧化作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
谱系限制性神经前体细胞论文参考文献
[1].黄雷.谱系限制性神经前体细胞（NPC）移植治疗脊髓损伤的实验研究[D].大连医科大学.2008
[2].李鹏.滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞抗过氧化损伤的实验研究[D].大连医科大学.2008
[3].南丰.滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞移植治疗脊髓损伤的研究[D].大连医科大学.2007
标签：脊髓损伤; 谱系限制性神经前体细胞; 移植; 大鼠;