导读:本文包含了截短体蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:EBI3,截短体,信号肽,外泌体
截短体蛋白论文文献综述
刘泽宇,潘林鑫,李紫阳,冯成,刘晓颖[1]（2019）在《人EBI3及其截短体蛋白在哺乳动物细胞中的分泌》一文中研究指出目的研究人EB病毒诱导基因3(EBI3)蛋白氨基端的缺失是否影响人EBI3蛋白在哺乳动物细胞中的分泌,并探究人EBI3蛋白能否经由外泌体介导的非经典蛋白分泌途径分泌至胞外。方法将pcDNA3.1-EBI3-FLAG、pcDNA3.1-EBI3(1～135)-FLAG、pcDNA3.1-EBI3(125～230)-FLAG真核表达重组质粒分别转染至HEK 293T细胞中,Western blot检测相关蛋白在细胞中及细胞培养液中的表达情况;分别收集转染了上述重组质粒的HEK 293T细胞的培养液,提取外泌体,Western blot检测相关蛋白在外泌体中的表达情况。结果 Western blot结果表明,人野生型EBI3及其截短体重组蛋白在HEK 293T细胞中均能正常表达,细胞培养液中能够检测到EBI3与EBI3(1～135)蛋白的表达,但并不能检测到EBI3(125～230)蛋白的表达。HEK 293T细胞外泌体的Western blot结果表明,外泌体中仅能检测到EBI3蛋白的表达,而无法检测到EBI3(1～135)和EBI3(125～230)蛋白的表达。结论人EBI3及其截短体真核表达重组质粒均能在HEK 293T细胞中正常表达;人EBI3蛋白氨基端的缺失会抑制EBI3蛋白在哺乳动物细胞中的分泌,人EBI3蛋白能够通过外泌体介导的非经典分泌途径分泌至细胞外,而EBI3氨基端或羧基端的缺失都会导致这一过程受到阻碍。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2019年11期）
杨汐静,陈晓婷,刘道龙,杨阳,杨光[2]（2018）在《金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A r10-11截短体蛋白基因片段的原核表达与免疫原性》一文中研究指出目的构建金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(fibronectin binding protein A,FnBPA)r10-11截短体融合蛋白的原核表达菌株并研究其免疫原性。方法采用重组聚合酶链反应(ploymerase chain reaction,PCR)技术从金黄色葡萄球菌Newman株全基因组序列中进行PCR扩增,对扩增产物进行纯化,连接T载体后转入大肠杆菌DH5α中进行克隆,提取重组后的质粒进行双酶切鉴定,并回收目的片段连接到pET-32a质粒中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,采用HIS蛋白纯化柱纯化截短蛋白FnBPAr10-11,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定,纯化后的FnBPAr10-11用于免疫小鼠[分为无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)组、FnBPA组、FnBPAr10-11组],检测小鼠血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平、细胞因子水平、免疫保护率。结果 SDS-PAGE分析显示,表达后的蛋白相对分子质量约为33.1×103。FnBPAr10-11组与FnBPA组IgG抗体效价达1∶128 000,与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。FnBPAr10-11组的细胞因子水平与FnBPA组比较差异无统计学意义(P>0.05),与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.01)。攻毒试验中FnBPAr10-11组的免疫保护作用在50%以上。结论成功构建了金黄色葡萄球菌Fn BPAr10-11截短体融合蛋白的原核表达菌株,该截短蛋白免疫原性良好。(本文来源于《华西医学》期刊2018年12期）
周珊,徐修礼,马越云,刘家云,程晓东[3]（2014）在《HBHA截短体蛋白的表达纯化及其诊断活性研究》一文中研究指出目的原核表达HBHAΔC及HBHAΔN蛋白,比较HBHA系列蛋白活性。为进一步研究HBHA临床诊断价值提供实验依据。方法克隆HBHAΔC和HBHAΔN目的基因,用于大肠杆菌(E.coli)BL-21系统表达纯化。将蛋白通过CL-6B柱检测肝素结合能力。并加入到培养BCG的7H9液体培养基中,观察其诱导BCG聚集情况。结果nHBHA,rHBHA及HBHAΔN蛋白均具有肝素结合能力。nHBHA、rHBHA和HBHAΔC蛋白具备诱导BCG聚集的作用。结论成功获得HBHA截短体蛋白;证实HBHA蛋白碳端参与肝素结合功能;蛋白氮端参与诱导BCG聚集反应。该实验结果为进一步研究TB感染分子机制及临床诊断应用奠定基础。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2014年24期）
周珊,徐修礼,马越云,刘家云,程晓东[4]（2014）在《HBHA截短体蛋白的表达纯化及其》一文中研究指出目的构建重组质粒表达纯化肝素结合血凝素蛋白的碳端截短体HBHA△C和氮端截短体HBHA△N,分别比较天然蛋白nHBHA,重组蛋白rHBHA,HBHA△C和HBHA△N的肝素结合及聚集BCG凝集活性。为进一步研究HBHA的临床诊断价值提供实验依据。方法根据结核分枝杆菌HBHA△C及HBHA△N基因序列设计引物,通过PCR获得目的基因。构建PQE-80L-HBHA△C,PQE-80L-HBHA△N重组质粒,将测序正确的重组质粒转化大肠杆菌BL-21(本文来源于《中华医学会第十一次全国临床微生物学术年会暨全球华人临床微生物与感染症学会学术论坛暨第四届国际临床微生物及抗微生物化疗学术会议(4th SICCMAC)日程&论文汇编》期刊2014-10-24）
胡小许,张义全,黄倩,王丽,杨瑞馥[5]（2014）在《副溶血弧菌ToxR截短体蛋白的表达纯化及其DNA结合活性》一文中研究指出【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3表达系统,表达出有活性的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)ToxR截短体蛋白,为进一步研究ToxR的转录调控机制奠定基础。【方法】以VP基因组DNA为模板,PCR扩增ToxR蛋白DNA结合结构域(ToxR-N)的DNA片段,并将其直接克隆入pET28a中,获得重组质粒;将重组质粒导入大肠杆菌BL21λDE3中,所得菌株经IPTG诱导后能表达出His-ToxR-N蛋白。利用限制级凝血酶切除His-ToxR-N中的His-标签,进而以VP的calR和VP1687为靶基因,通过体外的凝胶阻滞实验(EMSA)验证ToxR-N蛋白的DNA结合活性。分别构建克隆有calR和VP1687上游启动子区的LacZ重组质粒,并将重组质粒转入野生株(WT)和toxR突变株(ΔtoxR)中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较两株重组菌中靶基因启动子活性,以验证ToxR对calR和VP1687的调控关系。【结果】成功表达出有活性的ToxR-N蛋白,该蛋白对calR启动子区具有结合活性。LacZ结果显示ToxR对calR的转录具有激活作用,而对VP1687的转录具有抑制作用。【结论】所表达的ToxR-N可用于后续的转录调控机制研究;ToxR通过直接激活calR的转录表达,而间接抑制T3SS1相关基因的表达。(本文来源于《微生物学报》期刊2014年08期）
严昊,朱远茂,史鸿飞,王雪枝,蔡红[6]（2014）在《牛腺病毒3型六邻体蛋白的截短表达、单克隆抗体制备及初步应用》一文中研究指出为制备牛腺病毒3型(BAV-3)的单克隆抗体(MAb),本研究采用原核表达系统截短表达了BAV-3六邻体蛋白(Hexon),并以纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合筛选出14株杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验表明14株MAbs均具有良好的反应性。特异性试验表明这些MAbs与牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒及牛传染性鼻气管炎病毒无交叉反应。免疫组化试验表明其中一株1F8亲和力最强,可以用于检测BAV-3。本研究为进一步鉴定BAV-3抗原表位及研发相应的诊断试剂奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2014年06期）
徐小峰,田衍平,陈宗涛,陈炜,江雯[7]（2008）在《重组Rab8截短体蛋白的原核表达、纯化和抗体制备》一文中研究指出目的获得Rab8纯化蛋白,制备多克隆抗体,为深入研究Rab8在病毒感染宿主细胞过程中的作用奠定基础。方法首先从HepG2细胞中克隆Rab8基因,然后从Rab8质粒中亚克隆Rab8C端编码122个氨基酸的基因片段,构建Rab8与6His的融合蛋白原核表达质粒。原核表达与蛋白纯化后,免疫动物,制备Rab8多克隆抗体。采用ELISA法检测其效价,Western检验抗体特异性,间接免疫荧光染色法验证其免疫组化特性。结果克隆了人Rab8编码基因,构建了表达Rab8C端编码122个氨基酸的原核表达质粒pQE31-Rab8-122,经过大肠杆菌表达、镍亲和层析柱纯化,获得相对分子量约15000的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠后收获抗血清。ELISA显示抗体效价达1/20000。Western blot和免疫荧光染色结果显示此多克隆抗体能够与原核表达的Rab8蛋白发生特异性反应,并能够识别HepG2细胞中内源性Rab8蛋白。结论本研究获得原核表达的Rab8纯化蛋白,成功的制备了Rab8多克隆抗体,为进一步研究Rab8参与病毒感染宿主细胞提供了重要的实验材料。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2008年02期）
截短体蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(fibronectin binding protein A,FnBPA)r10-11截短体融合蛋白的原核表达菌株并研究其免疫原性。方法采用重组聚合酶链反应(ploymerase chain reaction,PCR)技术从金黄色葡萄球菌Newman株全基因组序列中进行PCR扩增,对扩增产物进行纯化,连接T载体后转入大肠杆菌DH5α中进行克隆,提取重组后的质粒进行双酶切鉴定,并回收目的片段连接到pET-32a质粒中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,采用HIS蛋白纯化柱纯化截短蛋白FnBPAr10-11,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定,纯化后的FnBPAr10-11用于免疫小鼠[分为无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)组、FnBPA组、FnBPAr10-11组],检测小鼠血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平、细胞因子水平、免疫保护率。结果 SDS-PAGE分析显示,表达后的蛋白相对分子质量约为33.1×103。FnBPAr10-11组与FnBPA组IgG抗体效价达1∶128 000,与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。FnBPAr10-11组的细胞因子水平与FnBPA组比较差异无统计学意义(P>0.05),与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.01)。攻毒试验中FnBPAr10-11组的免疫保护作用在50%以上。结论成功构建了金黄色葡萄球菌Fn BPAr10-11截短体融合蛋白的原核表达菌株,该截短蛋白免疫原性良好。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
截短体蛋白论文参考文献
[1].刘泽宇,潘林鑫,李紫阳,冯成,刘晓颖.人EBI3及其截短体蛋白在哺乳动物细胞中的分泌[J].安徽医科大学学报.2019
[2].杨汐静,陈晓婷,刘道龙,杨阳,杨光.金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白Ar10-11截短体蛋白基因片段的原核表达与免疫原性[J].华西医学.2018
[3].周珊,徐修礼,马越云,刘家云,程晓东.HBHA截短体蛋白的表达纯化及其诊断活性研究[J].国际检验医学杂志.2014
[4].周珊,徐修礼,马越云,刘家云,程晓东.HBHA截短体蛋白的表达纯化及其[C].中华医学会第十一次全国临床微生物学术年会暨全球华人临床微生物与感染症学会学术论坛暨第四届国际临床微生物及抗微生物化疗学术会议(4thSICCMAC)日程&论文汇编.2014
[5].胡小许,张义全,黄倩,王丽,杨瑞馥.副溶血弧菌ToxR截短体蛋白的表达纯化及其DNA结合活性[J].微生物学报.2014
[6].严昊,朱远茂,史鸿飞,王雪枝,蔡红.牛腺病毒3型六邻体蛋白的截短表达、单克隆抗体制备及初步应用[J].中国预防兽医学报.2014
[7].徐小峰,田衍平,陈宗涛,陈炜,江雯.重组Rab8截短体蛋白的原核表达、纯化和抗体制备[J].免疫学杂志.2008