几种动物生鲜肌肉组织样品DNA提取方法的比较研究

论文摘要

比较不同提取原理的试剂盒对动物生鲜肌肉组织DNA提取效果,为日常肉制品掺假检测与监测选择合适的DNA提取方法提供参考。以生鲜牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉和鸭肉为试验材料,采用改良CTAB法、蛋白酶K法、SDS法和快速萃取法等原理的8种不同方法来提取组织样品DNA,并对提取DNA的完整性、浓度、纯度、试验耗时和后续实时荧光定量PCR检测等指标进行评价。结果表明,8种提取方法均可用于常见动物源性肌肉DNA的提取。与改良CTAB法相比,原理为蛋白酶K法、SDS法和快速萃取法的试剂盒避免了有机试剂的使用,且操作耗时短。实际操作中,可优先选择基于蛋白酶K法和SDS法的试剂盒进行DNA提取,其提取的DNA纯度和总量高,盐残留少,对实时荧光定量PCR的抑制少,满足肉制品掺假检测与监测的核酸提取需求。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 检测对象
•   1.2 主要试剂
•   1.3 主要仪器
•   1.4 试验方法
•     1.4.1 样品处理和DNA提取
•     1.4.2 DNA质量和浓度测定
•     1.4.3 DNA完整性检测
•     1.4.4 DNA提取物对实时荧光定量PCR的抑制作用
• 2 结果与分析
•   2.1 不同提取方法对生鲜肌肉组织样品DNA完整性的影响
•   2.2 不同提取方法对生鲜肌肉组织样品DNA浓度和纯度的影响
•   2.3 不同提取方法提取的DNA提取物对实时荧光定量PCR的抑制作用
•   2.4 不同DNA提取方法的比较
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 纪艺,姜媛媛,汪小福,徐晓丽,徐俊锋,李玥莹,陈笑芸

关键词: 提取,实时荧光定量,肌肉组织,评估

来源: 浙江农业学报 2019年09期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 沈阳师范大学生命科学学院,浙江省农业科学院农产品质量标准研究所省部共建农产品质量安全国家重点实验室(筹)

分类号: TS251.7

页码: 1471-1477

总页数: 7

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