导读:本文包含了酶标抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,层析,李斯特,碘酸,免疫,卵黄,鹅卵。
酶标抗体论文文献综述
王彩红[1]（2019）在《基于金属有机框架的新型酶标抗体制备及其免疫分析研究》一文中研究指出近年来,酶联免疫吸附测定(ELISA)已被广泛应用于生物医学领域。但是,ELISA在实际应用过程中仍然存在一些不可避免的缺点,特别是以共价结合法制备酶标抗体这一环节。金属有机框架(MOFs)因其具有比表面积大,孔隙高以及结构可调节等优点,已被广泛应用于气体储存、气体吸附、药物递送等领域。本论文结合MOF优秀的载体性能,发展了一系列新型的酶标抗体,并探讨了它们在免疫分析中的应用。主要工作如下:(1)以铜基金属有机框架(Cu-MOF)为载体,利用共沉淀法制备了负载有兔抗鼠免疫球蛋白G抗体(RIgG)的酶标抗体(RIgG@Cu-MOF)。研究发现,RIgG对其抗原的特异识别性能和效率不会受Cu-MOF的影响。不仅如此,与辣根过氧化物酶标记的RIgG(HRP-RIgG)相比,RIgG@Cu-MOF还具有更好的生物和化学稳定性,并能够在室温下进行长期储存。在此基础上,结合Cu-MOF的过氧化物模拟酶的催化活性,RIgG@Cu-MOF可以实现在比色免疫分析中的应用。在免疫分析中,我们发现Cu-MOF可以放大检测信号,提高检测灵敏度,检出限约为0.3 ng/mL,比HRP-RIgG低3倍。因此,制备基于MOF的新型酶标抗体并应用于比色免疫分析是可行的。(2)上述工作表明MOF可以作为载体,与抗体原位结合。但是,与自然酶相比,模拟酶的催化活性与选择性相对较差。因此在上述工作基础上,我们利用Zn-MOF为载体,将Zn-MOF,CEA抗体(anti-CEA)和碱性磷酸酶(ALP)通过原位融合,形成一种新型酶标抗体(anti-CEA&ALP@Zn-MOF)。结果表明,此方法可以同时实现酶的催化和抗体特异识别的双功能。一方面我们发现,与游离ALP相比,Zn-MOF不仅不会影响融合ALP的活性,而且它还能提高ALP在高温和有机溶剂等极端条件下的稳定性。同时,由于Zn-MOF对酶底物的限域效应,ALP的催化效率显着提高。另一方面,研究表明,融合的anti-CEA仍具有与游离抗体相当的识别能力和效率。基于此,我们利用anti-CEA&ALP@Zn-MOF作为检测抗体,同时结合phen-Fe~(2+)反应体系,对CEA抗原进行了比色免疫分析。由于ALP和抗坏血酸的级联放大效应,该传感体系的检测限能达到22.7 pg/mL,并实现了血清中CEA抗原的高灵敏检测。(3)在MOF不影响抗体识别性能的基础上,我们不但利用葡萄糖氧化酶(GOx)改善模拟酶(Fe-MOF)的选择性,而且进一步结合它的催化性能和限域效应,构建了一种可在限域环境中实现信号级联放大的新型酶标抗体。利用自组装方法,将前列腺特异性抗原抗体(anti-PSA)和GOx融合于具有过氧化物模拟酶活性的Fe-MOF载体中,制得具有双功能的新型酶标抗体(anti-PSA&GOx@Fe-MOF)。研究发现,与游离GOx和Fe-MOF体系相比,GOx@Fe-MOF不仅具有更高的催化活性,而且由于Fe-MOF的保护作用,还具有更高的生物和化学稳定性。更重要的是,由于Fe-MOF的限域效应,anti-PSA&GOx@Fe-MOF在作为检测抗体时,PSA抗原的灵敏度会得到极大地提高,检测限可达到1.5 pg/mL。(本文来源于《江西师范大学》期刊2019-05-01）
贺佳慧,白满元,郭慧琛,孙世琪,张小丽[2]（2019）在《兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用》一文中研究指出为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口蹄疫VLPs的酶标抗体(rabbit anti-type O foot-and-mouth disease IgG-HRP)。结果显示,兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清效价达1∶4 096,纯化后的IgG纯度达90%,效价达1∶512 000。表明获得了高纯度的兔抗O型口蹄疫VLP的酶标抗体,可用于O型口蹄疫的ELISA检测。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年01期）
赵健,胡桂学,董浩,张双,邵洪泽[3]（2015）在《鹅卵黄抗体IgY的提纯及其酶标抗体的制备》一文中研究指出本试验采用辛酸去脂、饱和硫酸铵溶液盐析法提纯鹅卵黄抗体Ig Y,采用SDS-PAGE方法分析其纯度;用纯化后的Ig Y免疫试验兔,收集血清,测定血清抗体效价;采用辛酸-硫酸铵法结合Protein G树脂亲和层析法纯化兔血清Ig G,用改良的高碘酸钠法进行辣根过氧化物酶标记,直接ELISA法测定标记物效价。结果表明,提纯的鹅卵黄Ig Y浓度为11.5 mg/m L,纯度约为92%;血清琼脂扩散抗体效价为1:32;Western Blotting试验证明,兔血清中含有抗鹅卵黄抗体Ig Y重链及轻链的特异性抗体;直接ELISA法测得标记物效价为1:1 100。(本文来源于《现代畜牧兽医》期刊2015年03期）
李亚璞[4]（2014）在《不同酶标抗体稀释液对酶标抗体稳定性的影响》一文中研究指出为筛选一种较好的酶标抗体稀释液,试验以磷酸盐缓冲液(PBST)为基础溶液,通过添加甘油、酪蛋白、海藻糖及防腐剂Proclin 300等试剂配制了4种不同组合的酶标抗体稀释液,分别在4℃和37℃条件下考察其对酶标抗体稳定性的影响。结果表明,处理5(0.01 mol/L PBST+3%酶稳定剂M+3%海藻糖+0.05%Proclin 300)的保护效果最好,在4℃保存6个月,酶标抗体的活性仅降低18%。(本文来源于《湖南农业科学》期刊2014年14期）
刘雅莉,刘芳,刘箐,韩舜愈,孙志博[5]（2012）在《两种酶标抗体制备方法的比较及李斯特菌TASELISA试剂盒性能的优化》一文中研究指出研制一种低成本、快速、准确的叁抗体夹心酶联免疫(Three antibodies sandwich ELISA,TAS-ELISA)检测试剂盒。采用戊二醛法、改良过碘酸钠法分别制备碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AP)、辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)标记的山羊抗兔IgG,比较单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)TAS-ELISA试剂盒两种酶标抗体的检测效果,并考察了试剂盒的检测灵敏度、特异性、稳定性、保存周期等指标。结果表明,采用改良过碘酸钠法制备的HRP-IgG效果好,克分子比最高可达2.9,酶结合率达27%;试剂盒检测周期6h,检测成本为3.5元/孔,特异性实验、干扰实验、重复性实验、稳定性实验表明采用该方法制备的酶标抗体,特异性好、结果稳定可靠。自制TAS-ELISA试剂盒检测性能可达到商业化试剂盒水平,为该产品的产业化提供了一定的理论依据。(本文来源于《食品工业科技》期刊2012年15期）
刘先菊,林树柱,杨帆,佟巍,刘云波[6]（2012）在《兔抗金黄地鼠酶标抗体的制备及应用》一文中研究指出目的纯化金黄地鼠血清IgG,制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(IgG-HRP),开展金黄地鼠仙台病毒的初步检测。方法采用亲和层析纯化法纯化金黄地鼠IgG,用SDS-PAGE电泳测定IgG纯度并制备兔抗金黄地鼠IgG抗体(second antibody,Ab2);用免疫双扩散法检测抗血清效价后,再用亲和层析纯化抗血清IgG(Ab2);采用改良过碘酸钠标记法制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(rabbit anti-hamster IgG-HRP);用直接ELISA和Western-blot法对兔抗金黄地鼠IgG酶标抗体进行工作浓度测定;应用金黄地鼠酶标抗体对金黄地鼠仙台病毒进行酶免检测(IEA)。结果金黄地鼠血清IgG纯度达95%;兔抗金黄地鼠IgG抗体(Ab2)免疫双扩散效价为1:64;兔抗金黄地鼠IgG-HRP经直接ELISA和Western-Blot测定工作浓度分别为1∶5000和1∶2000;酶免(IEA)效价为1∶2000。结论高效快速纯化了金黄地鼠IgG,制备了金黄地鼠IgG-HRP,为金黄地鼠病原微生物的血清学检测提供了条件。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2012年01期）
曾昭伟,王学谦[7]（2011）在《促红细胞生成素多克隆抗体及酶标抗体的制备及纯化研究》一文中研究指出目的以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素(rhEPO)并免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记抗体,为进一步建立ELISA检测体系做准备。方法购买rhEPO,用淋巴结内注射法制备多克隆抗体,EPO抗体与葡聚糖凝胶偶联,制成抗体亲和层析柱,以rhEPO作为抗原上样纯化。抗体先盐析粗提纯再过SPA亲和层析柱纯化。用高碘酸钠法制备酶标抗体。结果亲和层析纯化的抗原、抗体纯度较高,蛋白质含量测定分别为0.560、.41 mg/ml;酶结合率为0.578。结论免疫亲和层析法纯化rhEPO,制备的多克隆抗体及酶标记抗体的纯度好,可以满足下一步组建试剂盒的需求。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2011年10期）
刘菲,唐卫杰,韩清林,赵婷婷,高丽芹[8]（2011）在《兔抗鹅IgG酶标抗体的制备及初步应用》一文中研究指出为了研究兔抗鹅IgG酶标抗体的制备,试验采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提,透析除盐,DEAEA-50纤维素层析相结合的方法提取鹅卵黄IgG,经核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG浓度;制备兔抗鹅IgG酶标抗体;利用酶标抗体检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗的免疫效果。结果表明,粗提的IgG浓度为10 mg/mL,抗体纯度可达到94.5%;免疫扩散得出兔抗鹅IgG抗血清效价约1∶32,抗体酶标后效价为1∶3000;酶标抗体可以作为检测疫苗效果一种很好的工具。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2011年06期）
张趁华,蔡家利[9]（2011）在《兔抗小鼠IgG-HRP酶标抗体的制备及应用》一文中研究指出制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1:32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。(本文来源于《莆田学院学报》期刊2011年02期）
曾凡锁[10]（2008）在《抗BGT蛋白多克隆抗体和酶标抗体(HRP)的制备与纯化》一文中研究指出本文以转基因白桦(Betula platyphylla Suk.)中蜘蛛杀虫肽与 Bt-toxin C 肽融合蛋白(BGT)基因的表达产物为研究目标,采用原核表达及纯化出融合蛋白 His-BGT 作为抗原进行兔免疫,得到相应的抗血清,采用 ELISA 法检测效价在1:10 000以上,并对抗血清进行了免疫亲和层析,获得了高纯度的 IgG,Western blot 检测具有较好的特异性。采用过碘酸钠法将抗体标记辣根过氧化物酶(HRP).得到第二抗体即酶标抗体。标记率在85%以上。为建立快速酶联免疫检测技术对 BGT 基因表达特性研究奠定了基础(本文来源于《中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）》期刊2008-10-01）
酶标抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口蹄疫VLPs的酶标抗体(rabbit anti-type O foot-and-mouth disease IgG-HRP)。结果显示,兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清效价达1∶4 096,纯化后的IgG纯度达90%,效价达1∶512 000。表明获得了高纯度的兔抗O型口蹄疫VLP的酶标抗体,可用于O型口蹄疫的ELISA检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶标抗体论文参考文献
[1].王彩红.基于金属有机框架的新型酶标抗体制备及其免疫分析研究[D].江西师范大学.2019
[2].贺佳慧,白满元,郭慧琛,孙世琪,张小丽.兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用[J].动物医学进展.2019
[3].赵健,胡桂学,董浩,张双,邵洪泽.鹅卵黄抗体IgY的提纯及其酶标抗体的制备[J].现代畜牧兽医.2015
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[10].曾凡锁.抗BGT蛋白多克隆抗体和酶标抗体(HRP)的制备与纯化[C].中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）.2008
论文知识图
