CO2分压对贴壁细胞MRC-5连续传代培养的影响

CO2分压对贴壁细胞MRC-5连续传代培养的影响

论文摘要

研究培养过程中CO2的使用和pH稳定性对MRC-5细胞增殖、传代培养及产毒水平的影响。采用不同浓度的NaHCO3调节细胞培养液pH值,结合CO2使用,监测细胞培养过程中pH变化情况,以及在连续传代过程中的细胞形态和增殖情况。接种水痘-带状疱疹病毒比较不同状态下细胞的产毒能力。采用碳酸氢盐缓冲体系时,无CO2分压的封闭培养组细胞培养液pH波动较大,在传代培养中观察到细胞形态较差,细胞状态下滑快;细胞连续传代至35-37代;细胞在31代平均产毒水平4.64Lg PFU/mL。有CO2分压的开放组细胞培养液pH相对平稳,在传代培养中细胞活率维持80%以上,细胞状态下滑趋势平缓,可连续传代至41代;31代细胞平均产毒水平4.83 Lg PFU/mL。采用碳酸氢盐缓冲体系的细胞培养液匹配合适的CO2分压有助于细胞状态的优化提升。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞
  •     1.1.2 主要试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 配制细胞培养液
  •     1.2.2 细胞复苏
  •     1.2.3 细胞传代培养
  •     1.2.4 细胞监测
  •     1.2.5 病毒接种及收获
  •     1.2.6 病毒滴定
  • 2 结果
  •   2.1 培养条件对细胞培养液pH稳定性的影响
  •   2.2 培养条件对细胞传代培养的影响
  •   2.3 培养条件对细胞产毒影响
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张伊丽,刘照平,陆敏依,蔡明勇,吴根鹏

    关键词: 细胞培养,分压,稳定性

    来源: 生物技术通报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学

    单位: 上海荣盛生物药业有限公司

    分类号: Q813.11

    DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0390

    页码: 169-173

    总页数: 5

    文件大小: 3134K

    下载量: 138

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