导读:本文包含了小孢子原生质体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:质体,孢子,曲霉,马铃薯,病毒,植株,组合。
小孢子原生质体论文文献综述
曾伟[1]（2017）在《烟草原生质体培养及小孢子胚胎发生的研究》一文中研究指出植物原生质体细胞由于没有细胞壁,因此它可以作为一个研究细胞壁再生,细胞分裂、分化等基础理论研究的实验系统。同时它也可作为体细胞杂交、无性系变异及突变体筛选、分离细胞器的理想材料和遗传转化的受体。小孢子是单细胞,容易获得,不受花药组织的影响,具有单倍性,发育同步性,易加倍等优点,常常用来研究植物胚胎发育过程。小孢子胚胎发生提供了一种研究植物胚胎发育和植物细胞全能性而不受母体组织干扰的替代系统。本文通过对12种基因型烟草原生质体的培养,探索了不同基因型之间酶解时间、原生质体起始分裂的时间、诱导出芽生根时间和出芽率的差异;研究了不同培养基对烟草原生质体培养愈伤组织的诱导、分化生芽及不定芽生根的影响。通过对游离小孢子的培养,对小孢子胚胎发生的过程和发育模式进行基础的研究,证明了NtDRP可以作为烟草小孢子胚胎发生的一个标记基因。主要的实验结果如下:1.比较不同基因型烟草原生质体分离的酶解时间,随着酶解时间的延长,不同基因型烟草的叶肉细胞的原生质体开始分离出来,由于不同的基因型烟草对酶的敏感性不同,因此不同基因型所需的酶解时间也不同。烟草G3、G4、G5、SR1的最佳酶解时间为3h;G1、NtDRP的最佳酶解时间为3.5h;G2和G6的最佳酶解时间为4.5h;而G7、G8、G9和G10的酶解时间为4h时,其有活力原生质体的产量最高。结果表明相同的酶解条件下,生理状态相近的不同的基因型所需的酶解时间不同。烟草原生质体所需的酶解时间与基因型有关。2.将生理状态相近的幼嫩叶片,经相同的酶解分离纯化过程获得的原生质体,在相同的培养条件下进行培养,发现G1、G8、G10、SR1的原生质体细胞培养2d发生第一分裂,G4和G6的原生质体细胞直到培养5d才发生第一次分裂,其它基因型的原生质体细胞发生首次分裂的时间为培养的2-5d之间。除烟草G4原生质体细胞分裂次数较少,所得到的愈伤组织较少,其它基因型烟草培养的原生质体细胞都能多次分裂。将不同基因型相同大小的愈伤组织转入相同的分化培养基诱导生芽,烟草SR1、G1、G10愈伤组织最早分化出芽点,分化出芽所需的时间为16d,而G4、G6出芽所需的时间最长,为22d。统计不同基因型的出芽率,SR1的出芽率最高,达到97%;G7的出芽率最低,为60%,其他基因型的出芽率都在80%以上。研究发现在相同的培养条件,相同的生长环境、生理状态,不同基因型烟草原生质体细胞的分裂速率,分裂频率,所诱导出的愈伤分化出芽的能力却不同。烟草原生质体的分裂及分化与基因型有关。3.以13种含有不同激素成分和不同激素浓度的培养基,对原生质体进行愈伤组织的诱导和扩增,研究表明培养基及激素直接影响着原生质体愈伤组织的生长和分化。4培养基有利于促进愈伤组织的诱导、扩增,同时4号培养基也能诱导生芽。10和11号培养基既可以诱导形成较多的愈伤组织,也能分化产生大量的芽。因此,前期可以用4号培养基进行愈伤组织的诱导、增值,得到大量的愈伤组织,再将愈伤组织转移到10和11号培养基中分化生芽。4.以长势良好的烟草SR1为例,将烟草SR1原生质体培养诱导产生的不定芽切下转移到四种不同的培养基中进行诱导生根,发现1号培养基诱导生根比率较低,根量少,根虽然粗壮,但产生的根短,诱导生根所需要的时间长,约10d左右;2号培养基诱导生根率最低,根量少;而4号培养基生成的根虽短,诱导生根率却高达86%,生根时间却需要12d左右;以3号培养基最佳,其诱导生根的比率最高,高达92%,根量较多,根较粗壮且长,诱导生根仅需7d就可得到完整的植株。5.烟草小孢子在B培养基中经过饥饿和热激处理5d或6d,改变小孢子的发育途径,由配子体途径转向孢子体途径。在转入AT3培养基中培养2d,细胞核发生均等分裂,产生两个大小相似的细胞核,在培养过程中部分小孢子细胞外壁破裂,产生类似合子胚的发育模式,形成胚柄和胚体结构。具有完整外壁的小孢子经过45-60d,最终发育成子叶形胚胎。6.饥饿和热激对小孢子胚胎发生的诱导作用。饥饿和热激条件下的小孢子诱导胚胎发生的比率比正常温度(饥饿或非饥饿处理)或单独热激处理培养的小孢子不仅诱导效率高,还减少了对胁迫处理的依赖性。实验证明当两种胁迫处理相结合对提高小孢子胚胎发生的诱导率具有迭加效应。7.探索NtDRP基因是否可以作为小孢子胚胎发生的标记基因。在小孢子培养过程中,单核晚期的烟草小孢子在饥饿培养基中热激(32℃)处理后培养48h,小孢子不表达NtDRP,培养72h,小孢子开始表达NtDRP。通过pNtDRP::NtDRP-GFP,野生型SR1,RNAi-Ⅱ和RNAi-Ⅲ四种不同株系的小孢子培养进行比较,发现培养起始阶段,小孢子形态为球形,随着培养时间延长,RNAi株系的烟草小孢子胚胎发生的能力显着下降,RNAi-Ⅲ株系的烟草小孢子几乎不能胚胎发生,小孢子开始出现皱缩,证明NtDRP可以作为烟草小孢子胚胎发生的一个标记基因。(本文来源于《湖北大学》期刊2017-05-31）
陈清霞,江贤章,刘锦清,宋芬芬,黄建忠[2]（2011）在《卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生》一文中研究指出为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备。研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基。用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%。(本文来源于《生物加工过程》期刊2011年02期）
胡杰,潘力,罗立新,王斌,卢锦桃[3]（2007）在《米曲霉孢子原生质体复合诱变及高活力蛋白酶菌株选育》一文中研究指出以沪酿3.042米曲霉的孢子原生质体为诱变对象,经溶菌酶2%+蜗牛酶2%+纤维素酶2%,33℃水浴酶解时间5h的孢子原生质体最佳制备条件作用后,对其进行紫外线-氯化锂,NTG复合诱变,并利用酪蛋白平板初筛和固体发酵测定中性蛋白酶活力复筛,筛选了8株高产中性蛋白酶突变株群,为后续的细胞融合、基因组改组等实验提供了优良的候选文库。其中最高产菌株UN97,经37℃培养40h产酶活力为6834U/g(干基),为原菌株的1.62倍,传代培养8次,遗传性能稳定。(本文来源于《食品工业科技》期刊2007年05期）
潘力,李立风,彭昶,叶燕锐,王斌[4]（2006）在《酱油曲霉孢子原生质体的制备与紫外诱变育种》一文中研究指出由1株分离、纯化自曲精的酱油曲霉的分生孢子制备原生质体,并进行紫外诱变,得到7株中性蛋白酶活提高幅度较大的紫外突变株U系,中性蛋白酶活最高的1株达到6 197.4U,为出发株的1.94倍。对原生质体制备条件进行了优化:选取孢子生长旺盛的新鲜斜面培养物(培养5 d左右)制备孢子悬浮液;采用25 mmol/L-巯基乙醇+5 mmol/L Na2EDTA体系预处理20 min;酶解条件是:1%溶菌酶+1%蜗牛酶+1%纤维素酶,山梨醇作为渗透压稳定剂(0.6 mol/L,pH6.88),酶解温度33℃,酶解5 h;再生培养基为0.6 mol/L NaCl高渗透压豆汁培养基,涂布法再生。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2006年08期）
宋唯一[5]（2005）在《小麦游离小孢子愈伤组织诱导及半原生质体外源DNA电击转化的研究》一文中研究指出电击基因转移技术是从1985 年开始,应用于植物细胞和原生质体的遗传转化的,随着生物技术的发展,现已广范应用于各种植物中。将电击转化技术用于小麦游离小孢子半原生质体,目前还无相关报道。由于小麦游离小孢子半原生质体较之小麦胚性愈伤组织原生质体易于培养,且小麦游离小孢子的培养体系已日趋完善,因此,小麦游离小孢子半原生质体是良好的电击转化受体。鉴于此,本文主要从以下叁个方面进行了研究:①对11 个不同小麦及小黑麦品种的游离小孢子进行培养及活性检测,筛选出了适合于游离小孢子培养的最佳培养基、碳源、最适培养条件,游离小孢子最佳分离方法以及最易于进行游离小孢子培养的品种;②通过酶解试验,筛选出了最佳酶解参数组合,为电击试验做好了准备;③以最佳酶解参数组合处理过的最易于进行培养的品种的小孢子半原生质体作为受体,通过导入香豆素-5-dUTP,筛选出了进行电击转化的最佳参数组合。主要试验结果如下:小麦幼穗在进行4℃低温预处理3 天后分离到的小麦小孢子的平均活性最高达到6.6%。30℃热激处理小麦幼穗后分离的小麦小孢子的平均活性最高,达到6.7%。热激处理小麦幼穗3 天后分离到小孢子的平均活性最高达到6.5%。花药接种密度为1000枚/10mL培养液的游离小孢子在培养的第1天到第4天内的平均活力最高,达到5.28%。以麦芽糖为碳源培养的游离小孢子在培养的4 天内活性最高,达到4.35%,而以蔗糖为碳源培养的游离小孢子活性最低。因此,麦芽糖为小麦游离小孢子培养的最佳碳源,蔗糖不适宜作为小麦游离小孢子培养的碳源。通过对几种游离小孢子分离方法的比较,筛选,发现磁力搅拌器法最适于进行小麦游离小孢子的分离。通过混合酶液酶解破壁试验发现能产生最薄细胞壁厚度的酶解参数组合为:1.5%的混合酶液浓度(其中纤维素酶浓度为1.4%,果胶酶的浓度为0.1%),28℃的酶解处理温度和8h的酶解处理时间。经这一参数组合处理过的小麦游离小孢子的细胞壁厚度最薄,为0.83μm,而CK(3.08μm)是这一厚度的3.7 倍。另外,通过酶解试验,还发现2%的混合酶液浓度(其中纤维素酶浓度为1.9%,果胶酶的浓度为0.1%)能产生大量原生质体,非常适于原生质体培养。通过进行游离小孢子愈伤组织诱导试验,发现Cui2B培养基最适于进行(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2005-06-10）
王玉萍,王蒂,张峰,王清[6]（2000）在《马铃薯小孢子原生质体游离的影响因素》一文中研究指出以马铃薯减数分裂四分体时期的小孢子为材料，研究了小孢子原生质体游离的主要影响因素。结果表明：用1 % 蜗牛酶+1.2 % 纤维素酶+0.5 % 半纤维素酶的混合酶液能大量游离出经低温预处理的马铃薯四分体小孢子原生质体，原生质体的最高产率达78.05 %；2-N吗啉乙烷磺酸 (MES) 对小孢子原生质体有一定的保护作用。0.1 % 的荧光增白剂鉴定脱壁完全，0.01 % 的FDA荧光检测表明原生质体具有生活力。(本文来源于《甘肃农业大学学报》期刊2000年03期）
王玉萍[7]（2000）在《马铃薯小孢子原生质体游离与培养的研究》一文中研究指出小孢子原生质体兼具单倍体和原生质体的双重忧点，是植物细胞工程中一种特殊的实验体系，并可作为马铃薯“分解-综合育种”方案中的一个重要组成部分。本实验以3个优良四倍体栽培种甘农薯1号、甘农薯2号、甘农薯3号以及1个双单倍体81-15的不同发育时期的小孢子（四分体、单核花粉、成熟花粉粒）为供体材料，初步研究了小孢子原生质体游离与培养的基本条件及影响因素。结果表明：（1）用1％蜗牛酶+1.2％纤维素酶+0.8％半纤维素酶的酶类组合能高频率地游离出“甘农薯1号”，“甘农薯2号”，“甘农薯3号”以及“81-15”的四分体原生质体，最高游离率分别达75.17％，71.43％，78.05％以及54.19％；（2）单核期的幼嫩花粉不能游离出原生质体；（3）用“低温-萌发-酶解”叁步法游离出“甘农薯1号”，“甘农着2号”以及“甘农着3号”的成熟花粉原生质体，最高游离率为10.12％，9.70％和17.71％；（4）在四分体原生质体游离过程中用蔗糖作渗透压调节剂，最适浓度10.3％，而从成熟花粉中游离原生质体则用甘露醇做渗透压调节剂效果较好，最适浓度为18.2％；（5）30min的萌发时间最适于游离成熟花粉原生质体；（6）适当降低酶浓度，有利于减少原生质体的破碎及后期培养过程中多核现象发生，有利于提高原生质体的活力；（7）酶液中添加各种保护剂（MES，PDS，PVP）对减少原生质体的破碎和褐化现象，提高其活力具有一定效果。 对小孢子原生质体培养的研究结果表明：（1）在原生质体培养液中加2，4-D1.0mg/L，KT 0.5mg/L，6-BA 0.4mg/L；去除NH_4~+，NAA能提高四分体原生质体的稳定性，降低后期培养过程中的出芽率，提高分裂频率；（2）高Ca~(2+)和高H_2PO_4~-浓度的K_3培养基和“药壁因子”的加入显着提高 了低密度（IX10’个／ml）四分什原生质体的分裂频率；（3）花蕾低温预 处理对于四分体原生质体的脱分化以及诱导其分裂起了重要作用，在液体 浅层培养中，使植板密度为 IX！0‘个／mL培养细胞的分裂频率达到’ 12石％：（4）在蔗糖密度梯度离心中，位于20％蔗糖液面的四分体原生质 体较位于25％蔗糖液面的启动分裂所需的时问短，原生质体持续分裂能力 强；（5）成熟花粉原生质体在培养中不能诱导分裂；（6）在原生质体的 培养过程中，对四分体原生质体用固液双层培养法和液体浅层培养法效果 好，细胞持续分裂能力强：（）花药愈伤组织与四分体原生质体基因型差 异较小的的看护作用明显，反之效果较差。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2000-05-01）
谢加华,高明尉,薛庆中,梁竹青[8]（1998）在《水稻小孢子原生质体分离研究》一文中研究指出初步研究了分离水稻小孢子原生质体的条件，首次从具小萌发孔的水稻小孢子中分离出原生质体．小孢子原生质体的分离途径是：小孢子在混合酶液作用下，质膜先脱离小孢子壁，然后原生质体缓慢地从萌发孔中挤出．混合酶液中的渗透压高低和分离时的温度条件对小孢子原生质体的分离有很大影响，在２４℃温度和０．６ｍｏｌ／Ｌ甘露醇的渗透压下分离效果最佳，此时原生质体的分离率达到９．８％～１１．２％．(本文来源于《浙江农业大学学报》期刊1998年01期）
何子灿,蔡起贵,钱迎倩,黄宏文[9]（1997）在《美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅱ.性别性状变异和小孢子发生及其发育命运》一文中研究指出对美味猕猴桃同一雌株叶原生质体再生植株进行了形态学、细胞学以及育性特性的比较研究，确认该体细胞无性系性别性状发生变异。其中60％雄性再生植株退化的雌蕊仍保留不同程度的雌性化特征，但雌性全不育；小孢子则能发育成有功能的雄配子体，但有一定的功能缺陷。再生雌株中P1组群性状特征与母株相似；P2组群花发育畸形，导致雌性不育或育性极差。细胞学研究表明，小孢子母细胞减数分裂时染色体异常行为对小孢子发生的影响不能决定其性别类型；雌株类型小孢子败育过程有受基因调控的细胞学特征。认为雌株和雄株小孢子的发育受控于不同的基因体系，具性别的特异性。再生植株性别性状发生变异可能是性别控制基因或染色体发生结构性变异所致。母株染色体上累积的结构性变异与该遗传基础具易变性密切有关。(本文来源于《武汉植物学研究》期刊1997年03期）
李思经[10]（1991）在《病毒粒子转移到植物原生质体和小孢子中》一文中研究指出丹麦Danisco公司科学家M.Joersbo和J.Brunstedt最近描述了利用轻微的声处理转化植物原生质体的报道.他们声称,已采用“新型而有效”的声处理技术把甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)粒子导入甜菜原生质体中,包裹的病毒粒子能在原生质体内复制. 尽管在超声波处理之前通过BNYVV粒子与原生质体的混合可获得最佳的有效的病毒转移,但当原生质体声处理一小时后通过把病毒粒子加入原生质体也可获得显着水平的感染.(本文来源于《生物技术通报》期刊1991年08期）
小孢子原生质体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备。研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基。用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小孢子原生质体论文参考文献
[1].曾伟.烟草原生质体培养及小孢子胚胎发生的研究[D].湖北大学.2017
[2].陈清霞,江贤章,刘锦清,宋芬芬,黄建忠.卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生[J].生物加工过程.2011
[3].胡杰,潘力,罗立新,王斌,卢锦桃.米曲霉孢子原生质体复合诱变及高活力蛋白酶菌株选育[J].食品工业科技.2007
[4].潘力,李立风,彭昶,叶燕锐,王斌.酱油曲霉孢子原生质体的制备与紫外诱变育种[J].食品与发酵工业.2006
[5].宋唯一.小麦游离小孢子愈伤组织诱导及半原生质体外源DNA电击转化的研究[D].甘肃农业大学.2005
[6].王玉萍,王蒂,张峰,王清.马铃薯小孢子原生质体游离的影响因素[J].甘肃农业大学学报.2000
[7].王玉萍.马铃薯小孢子原生质体游离与培养的研究[D].甘肃农业大学.2000
[8].谢加华,高明尉,薛庆中,梁竹青.水稻小孢子原生质体分离研究[J].浙江农业大学学报.1998
[9].何子灿,蔡起贵,钱迎倩,黄宏文.美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅱ.性别性状变异和小孢子发生及其发育命运[J].武汉植物学研究.1997
[10].李思经.病毒粒子转移到植物原生质体和小孢子中[J].生物技术通报.1991
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