NF-κB通路参与邻苯二甲酸二丁酯诱导U251细胞毒性的作用研究

NF-κB通路参与邻苯二甲酸二丁酯诱导U251细胞毒性的作用研究

论文摘要

为探究nuclear factor-κB (NF-κB)通路及其分子事件相关蛋白参与邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl-phthalate, DBP)诱导神经毒性的作用机制,以人胶质瘤细胞U251为对象,设置6个实验组:Control组,Tween 80组(阳性对照组)、25μmol·L-1DBP组、100μmol·L-1DBP组、20μmol·L-1维生素E (vitamin E, VE)组、100μmol·L-1DBP+20μmol·L-1 VE组.U251细胞经不同处理组分别暴露12 h及24 h后,观察细胞形态学结晶紫染色结果,检测细胞活性(CCK-8)、活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、氧化应激转录因子NF-κB,以及NF-κB通路相关蛋白钙调神经磷酸酶(calcineurin, CaN)、泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin-specific protease 14, USP14)、胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)的表达水平.与对照组相比,100μmol·L-1DBP组U251细胞的数量降低,细胞损伤,CCK-8降低,ROS、MDA含量显著升高,NF-κB水平显著升高,CaN、USP14表达均升高,GDNF表达降低,差异均有统计学意义(p<0.05,p<0.01);加入抗氧化剂VE处理后,与100μmol·L-1DBP组相比,100μmol·L-1DBP+20μmol·L-1M VE组U251细胞的数量增多,细胞损伤得到缓解,CCK-8上升,ROS、MDA含量显著降低,NF-κB水平显著降低,CaN、USP14表达均降低,GDNF表达增加,差异均有统计学意义(p<0.05,p<0.01).NF-κB和NF-κB通路相关蛋白的水平或含量变化表明,NF-κB作为氧化应激转录因子参与DBP诱导的U251细胞毒性作用;VE作为抗氧化剂可阻断ROS的生成从而抑制NF-κB的活化,提示VE在体外对DBP介导的神经毒性具有一定的保护作用.

论文目录

  • 1 引言 (Introduction)
  • 2 材料和方法 (Materials and methods)
  •   2.1 主要仪器与试剂
  •   2.2 细胞与细胞培养
  •   2.3 实验分组
  •   2.4 实验指标测定
  •     2.4.1 细胞活性检测
  •     2.4.2 细胞形态学检查
  •     2.4.3 细胞氧化应激水平检测
  •     2.4.4 NF-κB通路相关蛋白的测定
  •   2.5 统计学分析
  • 3 结果 (Results)
  •   3.1 DBP降低U251细胞活性
  •   3.2 DBP诱导U251细胞损伤
  •   3.3 DBP诱导U251细胞ROS产生及脂质过氧化
  •   3.4 DBP可能通过氧化应激途径激活NF-κB
  •   3.5 CaN、USP 14参与DBP诱导的NF-κB活化
  •   3.6 DBP诱导NF-κB活化释放GDNF
  • 4 讨论 (Discussion)
  • 5 结论 (Conclusions)
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 梁冯,王泽夏,晏彪

    关键词: 邻苯二甲酸二丁酯,细胞,氧化应激,神经毒性

    来源: 环境科学学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,环境科学与资源利用

    单位: 湖北中医药大学检验学院,湖北科技学院基础医学研究中心

    基金: 湖北省卫生计生委面上项目(No.WJ2017M166),湖北省教育厅科学技术研究项目(No.B2018172)

    分类号: X592;X171.5

    DOI: 10.13671/j.hjkxxb.2018.0305

    页码: 640-648

    总页数: 9

    文件大小: 3181K

    下载量: 86

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