Mst1/2激酶在巨噬细胞维持胞内ROS稳态中的作用研究

论文摘要

Hippo信号通路是一条进化上保守的信号通路,它在器官大小调控、促进组织稳态和调控肿瘤发生发展等方面具有重要作用。在哺乳动物中,经典Hippo信号通路核心成员包括激酶Mst1/2,Lats1/2以及下游效应子Yap/TAZ。近年来的研究表明,Hippo信号通路关键激酶Mst1/2在调控T细胞增殖、迁移、分化以及促进吞噬细胞清除病原体、调节炎症发生等方面扮演关键角色。在天然免疫系统中,巨噬细胞需要产生大量活性氧（reactive oxygen species,ROS）作为杀菌介质以抵御病原体感染。然而ROS的过量积累或无法有效清除则会使DNA、蛋白或脂类氧化受损,造成细胞衰老加速和细胞凋亡。目前,人们对非免疫细胞抵御氧化损伤已经有一定了解,但针对免疫细胞特别是巨噬细胞抵御氧化应激损伤的机制并不十分清楚。本研究我们发现与野生型相比,Mst1/2缺失（cDKO）的巨噬细胞中ROS水平和细胞凋亡比例都显著增加,并且用抗氧化剂NAC处理则能被明显缓解。随后我们发现,巨噬细胞中Mst1/2能够感应胞内ROS的产生并被激活并迁移至线粒体外膜,这暗示Mst1/2可能直接参与了氧化应激过程的调控,但Mst1/2调节巨噬细胞氧化应激的具体机制仍不清楚。我们发现巨噬细胞中抗氧化转录因子Nrf2具有较高表达;进一步的研究证实在cDKO巨噬细胞中几种Nrf2下游基因如Gclc、Gclm、Ho-1和Nqo1的表达都出现显著下调,并且Nrf2缺失的巨噬细胞表现出与cDKO巨噬细胞同样的缺陷,这进一步证实Nrf2很可能是Mst1/2的下游调节因子。综上所述,我们发现,Mst1/2缺失后无法有效清除ROS和维持氧化还原稳态从而更容易导致细胞凋亡,而野生型巨噬细胞中Mst1/2能够感应胞内ROS并通过调节Nrf2及其下游基因使之被清除,从而维持自身氧化还原稳态。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
•   1.1 Hippo信号通路简介
•     1.1.1 经典Hippo信号通路
•     1.1.2 Hippo信号通路的调控因素
•   1.2 Hippo信号通路在免疫系统中的功能
•     1.2.1 Hippo信号通路与天然免疫
•     1.2.2 Hippo信号通路与适应性免疫
•     1.2.3 Hippo信号通路与肿瘤免疫
•   1.3 活性氧与天然免疫系统
•     1.3.1 活性氧的概念、来源与产生
•     1.3.2 活性氧在天然免疫系统中的作用
•     1.3.3 活性氧的清除机制
•     1.3.4 激酶Mst1/2与ROS
•   1.4 巨噬细胞简介
•     1.4.1 巨噬细胞的来源
•     1.4.2 巨噬细胞的不同亚群
•     1.4.3 巨噬细胞的功能
• 第二章 材料与方法
•   2.1 实验材料
•     2.1.1 细胞株和菌株
•     2.1.2 实验小鼠
•     2.1.3 仪器与耗材
•     2.1.4 实验相关药品与试剂
•   2.2 实验方法
•     2.2.1 核酸相关实验
•     2.2.2 蛋白质相关实验
•     2.2.3 细胞相关实验
•     2.2.4 小鼠相关实验
• 第三章 结果与分析
•   3.1 敲除Mst1和Mst2的巨噬细胞氧化损伤增加
•   3.2 激酶Mst1和Mst2感知胞内ROS水平并被激活后招募到线粒体
•   3.3 转录因子Nrf2（Nfe2I2）对巨噬细胞维持胞内氧化还原稳态是必需的
• 第四章 讨论与展望
• 参考文献
• 在学期间发表论文
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 高佳慧

导师: 陈兰芬,周大旺

关键词: 巨噬细胞,活性氧,激酶,转录因子,氧化应激

来源: 厦门大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 厦门大学

分类号: Q25

总页数: 85

文件大小: 5203K

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