鲣鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽酶法制备工艺优化

鲣鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽酶法制备工艺优化

论文摘要

以鲣鱼为原料,利用酶法制备鲣鱼黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)抑制肽。在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面分析法,以水解度、氮回收率、XOD抑制活性、肌肽及鹅肌肽含量为响应值,对酶解工艺中蛋白酶种类、加酶量、酶解pH、温度和时间等影响因素进行优化,得到酶解的最优工艺:采用中性蛋白酶,加酶量为489.86 U/g,酶解pH为7.08,酶解温度为49.5℃,酶解时间为5 h。在此条件下,鲣鱼酶解产物的水解度为22.38%,氮回收率为83.31%,XOD抑制活性达到62.26%,肌肽和鹅肌肽含量分别为0.05%和2.45%(以干基计),与回归模型理论预测值基本一致。由本法所得的鲣鱼XOD抑制肽是以分子质量低于1 000 Da的寡肽为主。皮尔逊相关性分析表明,XOD抑制活性与肌肽或鹅肌肽含量无相关性,推测在酶解过程中产生了其他具有XOD抑制活性的小分子肽。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 鲣鱼XOD抑制肽的制备
  •     1.2.2 蛋白酶的筛选
  •     1.2.3 单因素试验
  •     1.2.4 响应面试验
  •     1.2.5 水解度测定
  •     1.2.6 氮回收率测定
  •     1.2.7 XOD抑制活性测定
  •     1.2.8 肌肽和鹅肌肽含量测定
  •     1.2.9 分子质量测定
  •     1.2.1 0 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 蛋白酶的筛选结果
  •   2.2 单因素试验结果
  •     2.2.1 加酶量对酶解效果的影响
  •     2.2.2 酶解温度对酶解效果的影响
  •     2.2.3 酶解pH对酶解效果的影响
  •     2.2.4 酶解时间对酶解效果的影响
  •   2.3 响应面优化试验结果
  •     2.3.1 响应面优化模型的建立及方差分析
  •     2.3.2 响应面图分析
  •     2.3.3 肌肽、鹅肌肽含量与XOD抑制活性的相关性分析
  •     2.3.4 酶解最优工艺条件分析
  •   2.4 肽分子质量分布
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 邹琳,杭妙佳,李阳,杜鹃,冯凤琴

    关键词: 鲣鱼,黄嘌呤氧化酶抑制肽,酶解工艺,肌肽,鹅肌肽

    来源: 浙江大学学报(农业与生命科学版) 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州康源食品科技有限公司

    基金: 浙江大学科技合作项目“水产动物源功能蛋白肽产品研究开发”(K横20182914),浙江大学实验技术研究项目(SJS201708)

    分类号: TS254.1

    页码: 550-562

    总页数: 13

    文件大小: 2537K

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