绵羊BMPR1B基因真核表达及产物互作蛋白的鉴定

论文摘要

旨为研究BMPR1B蛋白及其相互作用蛋白在绵羊卵巢卵母细胞发育及排卵的作用通路。通过构建BMPR1B基因真核表达体系并表征BMPR1B蛋白质,利用CoIP-MS技术鉴定母羊卵巢提取物中与BMPR1B特异性相互作用的蛋白质,构建目的蛋白质互作网络,通过生物信息学分析并预测BMPR1B蛋白及其相互作用蛋白在绵羊卵巢卵母细胞发育及排卵的作用通路。母羊卵巢提取物中23种蛋白质与BMPR1B蛋白具有关联性,其中6种目的蛋白（BMP2、BMP4、GDF5、GDF9、RhoD和HSP10）与BMPR1B具有特异性相互作用,通过生物信息学分析表明目的蛋白在TGF-β信号转导通路、卵巢类固醇生成通路和MAPK信号转导通路构成复杂且紧密的交互网络,基于互作结果设计BMPR1B蛋白调节绵羊卵母细胞的发育和排卵的代谢途径。BMPR1B蛋白与绵羊产羔性状途径中Smads家族蛋白具有交互作用,在绵羊卵母细胞发育和排卵中具有重要作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 BMPR1B基因的PCR扩增及克隆
•     1.2.2 重组靶基因的真核表达
•     1.2.3 单克隆抗体的制备
•     1.2.4 母羊卵巢BMPR1B相互作用蛋白的鉴定
•     1.2.5 蛋白质鉴定和生物信息学分析
• 2 结果
•   2.1 绵羊总RNA提取及PCR扩增
•   2.2 重组BMPR1B基因的真核表达
•   2.3 抗BMPR1B单克隆抗体的产生
•   2.4 绵羊卵巢BMPR1B相互作用蛋白的鉴定
•   2.5 BMPR1B互作蛋白的验证
•   2.6 GO及KEGG分析
•   2.7 蛋白质-蛋白质相互作用通路预测分析
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 贾建磊,陈倩,靳继鹏,袁赞,张利平

关键词: 绵羊,互作蛋白,生物信息学

来源: 生物技术通报 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 畜牧与动物医学

单位: 青海大学农牧学院,甘肃农业大学动物科学技术学院

基金: 国家自然科学基金地区项目(31660662),青海省自然科学基金青年项目(2016-ZJ-935Q)

分类号: S826

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0447

页码: 94-104

总页数: 11

文件大小: 7397K

下载量: 151