导读:本文包含了多巴胺神经细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:多巴胺,SH-SY5Y细胞,环指蛋白20,泛素化
多巴胺神经细胞论文文献综述
董婷婷,刘艳萍,李云芳,李胜,张国安[1]（2019）在《多巴胺通过促进RNF20降解抑制神经细胞中组蛋白H2B泛素化》一文中研究指出表观遗传修饰参与了药物成瘾的形成过程,而在药物成瘾过程中组蛋白泛素化水平的变化仍未可知。药物成瘾过程中常表现为多巴胺(dopamine, DA)表达量的升高,因此本研究欲探讨多巴胺升高对神经细胞组蛋白泛素化的影响及其机制。Western印迹结果显示,在终浓度0.8 mmol/L的多巴胺作用8 h后,人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞中环指蛋白20(ring finger protein 20, RNF20)表达量降低(0.29±0.032 vs. 1.0±0.025,P<0.0001),泛素化组蛋白H2B(H2Bub1)表达量下降(0.28±0.032 vs. 1.0±0.017,P<0.0001)。但是RT-PCR结果显示,多巴胺处理SH-SY5Y细胞后,RNF20在mRNA水平的表达无明显变化。在SH-SY5Y细胞中沉默RNF20的表达,H2Bub1在蛋白质水平的表达明显降低(0.20±0.069 vs. 1.0±0.060,P=0.001)。在加入多巴胺的基础上,分别加入蛋白酶体抑制剂MG132、自噬体形成抑制剂3-MA以及空泡型H~+-ATP酶特异性抑制剂Baf-A1等药物来检测RNF20的降解途径,结果发现,加入MG132、3-MA以及Baf-A1后,RNF20表达量均比DA处理组显着上升(1.51±0.095,P=0.0003; 0.89±0.075,P=0.0021; 2.74±0.099,P<0.0001;vs. 0.27±0.044)。上述结果表明,在SH-SY5Y细胞中,RNF20对H2Bub1具有调控作用,多巴胺可通过泛素化及自噬两种途径促进RNF20降解,从而抑制组蛋白H2B泛素化。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2019年04期）
牛世霸[2]（2019）在《应激对大鼠中脑多巴胺能神经细胞的影响及机制探讨》一文中研究指出目的:应激是机体在各种内外环境因素及社会、心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应。目前的研究提示过度的应激会造成机体心理、生理及代谢功能等多方面的改变。本研究是结合法医学实践中亟待解决的重要科学问题而设计的,法医学检案中时有遭受重大精神打击的当事人或被羁押的犯罪嫌疑人发生死亡的案例,在排除所有其他死因的前提下,有部分学者认为属应激性死亡,但目前尚缺少足够的基础研究依据。众所周知应激反应首先引起中枢神经系统的改变,黑质(substantia nigra,SN)和腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)是中脑两个重要的多巴胺能神经核团,以往研究提示多巴胺能神经细胞可能在应激反应中发挥作用,但详细的作用机制尚不清楚,因此本研究旨在系统观察不同时程应激大鼠中脑黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的病理性改变,探明多巴胺能神经细胞特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)及内质网应激相关蛋白的表达变化,为应激性损伤的机制研究提供病理形态学依据。方法:1本实验将60只SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠,体重200±20g,随机分组,每组6只,分为1天、3天、7天、14天和21天组及各相应时间点的对照组。实验组采用束缚加冰水游泳应激模型(RS+IS应激模型),即给予大鼠每天6小时(8:00-14:00)仰卧位固定的束缚处理,同时禁食水,束缚完毕后,立即进行5分钟冰水游泳。在实验组处理期间,各对照组禁食水并自由活动于笼中,其余时间所有大鼠自由进食水,各实验组及相应对照组大鼠于实验结束第二天处死,取脑组织固定、脱水、透明、包埋及连续性切片,待做各种组织病理学染色使用。1)记录大鼠体重变化2)HE染色观察黑质和腹侧被盖区病理形态学改变3)硫堇特殊染色观察黑质和腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化4)TH免疫组织化学染色计数黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞数目改变5)免疫荧光多重标记探讨黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞内质网应激相关蛋白GRP78(glucose-regulated protein 78),CHOP(C/EBP homologous protein)表达变化2阳性细胞计数及统计学分析:运用全景组织定量分析系统(MMTC)对两区域多巴胺能神经细胞(棕色)进行数量统计,目前此软件已经在国内、外得到广泛认可。统计分析:采用SPSS21.0统计软件进行统计分析,各组均数的比较行单因素方差分析(One-way ANOVA),用最小显着差法(Least Significant Difference,LSD)作两两比较,以P<0.05为有显着统计学差异。结果:1.大鼠体重变化结果对照组大鼠体重随时间的延长呈逐渐上升趋势。束缚加冰水游泳应激实验组除1天组的体重略有下降外,其余各实验组随时间的延长大鼠体重逐渐增加且各实验组与相应对照组相比,实验组大鼠体重增长速度明显降低。2.黑质和腹侧被盖区病理形态学改变对照组两区域组织结构清晰,细胞体积正常,胞核和胞质层次清晰;应激1天组、3天组、7天组和对照组相比,组织未见明显病理学改变;应激14天组、21天组部分神经细胞固缩,胞浆深染,嗜酸性染色明显增强。3.黑质和腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化3.1黑质神经细胞尼氏体变化对照组黑质神经细胞结构清晰,尼氏体均匀分布于胞浆内。与对照组相比,应激1天组无明显变化,3天组部分神经细胞水肿,尼氏体结构不清,7天组、14天组部分细胞尼氏体消失,神经细胞胞浆固缩浓染,21天组尼氏体消失及胞浆浓染固缩的神经细胞数目增多。3.2腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化对照组腹侧被盖区神经细胞胞浆丰富且分布均匀。与对照组相比,应激1天、3天组部分区域神经细胞出现水肿,胞浆染色加深,应激7天组、14天组部分神经细胞胞浆固缩浓染,尼氏体结构不清。21天组胞浆浓染固缩,尼氏体消失的神经细胞数目增多。4.黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞数目变化4.1黑质多巴胺能神经细胞数目变化在显微镜下用MMTC计数分析系统计数,结果:与对照组相比,应激1天组多巴胺能神经细胞数目未见明显改变,应激3天组、7天组、14天组和21天组,多巴胺能神经细胞数目随应激时间的延长呈逐渐减少趋势。4.2腹侧被盖区多巴胺能神经细胞数目变化在显微镜下用MMTC计数分析系统计数,结果:与对照组多巴胺能神经细胞数目相比,应激1天组未见明显差异,3天组、7天组、14天组和21天组,随着应激时间的延长,多巴胺能神经细胞数目明显减少。5.黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞TH~+-GRP78~+、TH~+-CHOP~+共表达变化5.1黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞TH~+-GRP78~+共表达变化黑质:与对照组相比,应激1天组,3天组TH~+-GRP78~+共表达阳性细胞数目迅速增多并到达高峰,随着应激时程的延长,TH~+-GRP78~+共表达阳性细胞数目在应激7天组、14天组和21天组明显减少。腹侧被盖区:和对照组相比,TH~+-GRP78~+共表达阳性细胞在应激1天组,3天组急剧升高,并在3天组到达峰值,随着应激时间的延长,7天组、14天组和21天组共表达阳性细胞数目显着减少。5.2黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞TH~+-CHOP~+共表达变化黑质:与对照组相比,TH~+-CHOP~+共表达阳性细胞在应激1天组,3天组,7天组,14天组逐渐升高,尽管应激21天组共表达阳性细胞数目减少,但仍明显高于对照组。腹侧被盖区:与对照组相比,TH~+-CHOP~+共表达阳性细胞在应激1天组,3天组,7天组,14天组逐渐上升并到达高峰,虽然应激21天组共表达阳性细胞数目减少,但仍明显高于对照组。6.多巴胺神经细胞数量与TH~+-CHOP~+共表达细胞数量相关分析。两区域多巴胺神经细胞数量与TH~+-CHOP~+共表达细胞数量的变化呈明显的负相关关系。结论:本研究成功建立了不同时程束缚加冰水游泳应激大鼠模型,采用HE染色、硫堇染色、免疫组织化学染色和免疫荧光多重标记进行了系统研究。研究结果表明较长时程的应激可以导致黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的损伤及数目的减少,内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP的表达呈现了动态变化,提示内质网应激可能参与了中脑多巴胺能神经细胞的病理性改变。(本文来源于《河北医科大学》期刊2019-03-01）
李敏,张月月,刘江波,王丽华,李茜[3]（2018）在《类神经细胞释放多巴胺的实时监测》一文中研究指出采用火焰刻蚀法制备碳纤维纳米电极(CFNE),通过扫描电子显微镜对纳米电极直径进行表征,采用循环伏安法对纳米电极的电化学性能进行验证。选用差分脉冲伏安法验证了纳米电极对多巴胺(Dopamine,DA)的体外响应,最后采用膜片钳电压钳模式,施加电压700 mV (Ag/Ag Cl为参比),对高分化的PC12细胞施加高钾刺激,实时监测DA的释放。结果表明:CFNE的直径可低至～100 nm,电极表面存在优良的非线性扩散特性;CFNE在体外对DA有灵敏的响应,检测限达10pmol/L;对PC12细胞高钾刺激后,实时监测到PC12细胞单个释放位点的DA释放过程。(本文来源于《辐射研究与辐射工艺学报》期刊2018年05期）
张峪涵,刘艳,朱义芳,邓茜[4]（2018）在《还原型谷胱甘肽对多巴胺能神经细胞氧化损伤的保护作用》一文中研究指出目的:探讨1-甲基-4-苯基-吡啶盐(MPP~+)作用下,还原型谷胱甘肽(GSH)对MES 23.5多巴胺神经元细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:CCK8法检测MES 23.5细胞存活率,细胞分为5组:对照组、MPP~+组、MPP~++L-Dopa组、MPP~++GSH组、MPP~++L-Dopa+GSH组。流式细胞术检测凋亡率及线粒体膜电位;通过DCFH-DA探针检测ROS含量;用比色法,检测MDA水平、CAT活性。结果:GSH可以抑制MPP~+所致的MES 23.5细胞存活率、△ψm及CAT活性水平降低,凋亡率、ROS含量及MDA水平升高(P<0.05);GSH与L-Dopa合用,这种抑制作用更明显(P<0.05)。结论:GSH与L-Dopa合用对MPP~+诱导的MES 23.5细胞氧化损伤有明显保护作用,机制可能与抑制细胞线粒体损伤及脂质过氧化,发挥抗氧化作用有关。(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2018年03期）
李梦楠[5]（2018）在《姜黄素抑制BV2细胞RAGE/NF-κB通路发挥对多巴胺能神经细胞的保护作用》一文中研究指出背景与目的帕金森病(parkinson disease,PD)是继阿尔茨海默病(Al-zheimer's disease,AD)之后中老年第二大流行的神经变性疾病,患病率随年龄的增加而升高。其主要病理特征是中脑黑质致密部(SN-pc)多巴胺(Dopamine,DA)神经元细胞丢失和神经元细胞质内包涵体的形成。由于黑质多胺能神经元的丢失,导致纹状体多巴胺递质水平下降,降至70%-80%以上时出现临床症状。其运动症状特点主要是静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势障碍。非运动症状主要包括嗅觉减退、睡眠障碍、自主神经功能障碍、精神障碍(抑郁或焦虑)。目前研究表明,帕金森主要与环境因素、遗传因素及神经系统老化等多因素交互作用相关,具体发病机制与氧化应激、线粒体功能障碍、钙离子稳态失调、蛋白酶体功能障碍、炎症、免疫反应、兴奋性毒性、细胞凋亡等相关,但PD具体机制尚未完全清楚,需要进一步研究证实。姜黄素是姜黄的有效成分,是从黄金植物姜黄的根茎中提取的一种多酚类物质,分子式为C_(21)H_(20)O_6,相对分子质量368.89,颜色为橙黄色结晶粉末,不溶于水和乙醚。易溶于醇类和碱性溶液,在碱性呈红褐色,在中性、酸性时呈浅黄色。通常用作肉类食品着色剂、酸碱指示剂、食物调料和传统草药。姜黄素有抗氧化、抗炎、抗凝、降脂、降胆固醇、抗动脉粥样硬化、抗衰老、消除自由基及抑制肿瘤生长、利胆、抗菌等功效,其毒性低,不良反应小。研究表明姜黄素通过抑制核转录因子κB(NF-κB)及炎症介质如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)等发挥效应。RAGE为免疫球蛋白超家族受体,广泛表达于包括神经元细胞和小胶质细胞在内的多种细胞,并能与晚期糖基化产物(AGEs)等多种配体结合后产生一系列生物学效应。NF-κB是从B细胞中提取的核转录因子,是重要的转录调控因子,也是炎症反应的关键转导因子。RAGE受体激活后可唤醒静息状态的NF-κB,NF-κB进一步调节其下游因子的表达。NF-κB参与细胞生长增殖、细胞凋亡、炎性反应、机体免疫等重要过程。AGEs与细胞表面特异性受体RAGE结合激活核转录因子NF-κB,NF-κB刺激多种炎症相关细胞因子如ICAM-1、TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS的形成和释放。姜黄素可能通过抑制AGEs与细胞表面的特异性受体RAGE相结合进而抑制核转录因子的NF-κB的激活、炎症因子的释放发挥对多巴胺神经细胞的保护作用。本研究选择姜黄素(curcumin,Cur)和鱼藤酮(rotenone,RO)处理BV2和SH-SY5Y细胞,收集BV2细胞上清液作为条件培养基(CM)处理SH-SY5Y细胞。检测BV2、SH-SY5Y细胞活力,BV2细胞内RAGE、NF-κB蛋白的表达,BV2细胞培养上清液炎症因子的含量,CM对SH-SY5Y细胞增殖活力的影响。探讨姜黄素对多巴胺神经细胞的保护作用及姜黄素、RAGE、NF-κB之间的关系及其所介导的机制,为姜黄素应用于临床提供新的思路和理论依据。材料与方法选用鼠小胶质细胞系BV2细胞株和神经元SH-SY5Y细胞作为研究对象,选择适宜浓度的RO10nmol/L,用10nmol/L RO分别处理BV2和SH-SY5Y细胞,不同浓度(1,5,10μmol/L)Cur处理BV2和SH-SY5Y细胞,不同浓度Cur(1,5,10μmol/L)与RO共孵育BV2和SH-SY5Y细胞,收集不同浓度Cur(1,5,10μmol/L)与RO共孵育BV2细胞组上清液作为CM作用于未处理的SH-SY5Y细胞,并设置空白对照组。采用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测两种细胞活力,Western blot检测细胞BV2细胞内RAGE、NF-κB表达,ELISA法测定BV2细胞培养上清液炎症因子含量,MTT法检测条件培养基对SH-SY5Y细胞增殖活力。结果1.MTT检测细胞活性:无论有无10nmol/LRO存在,不同浓度Cur(0-10μmol/L)干预后并未对BV-2细胞和SH-SY5Y细胞活力造成影响,各组间并无显着性差异。2.Western-blot检测RAGE、NF-κB蛋白表达:与空白对照组相比,RO组RAGE、NF-κB的蛋白表达明显升高(P<0.01),与RO组相比,Cur处理组RAGE、NF-κB的蛋白表达量显着减少(P<0.05)。3.ELISA法测定BV2细胞培养上清液炎症因子含量:与空白对照组相比,RO组炎症因子的分泌量明显升高(P<0.01),与RO组相比,Cur处理组随着浓度的升高炎症因子的分泌量逐渐减少(P<0.05)。4.MTT法检测条件培养基对SH-SY5Y细胞增殖活力的影响:受条件培养基处理的SH-SY5Y细胞,与对照组相比,RO组细胞活力明显减弱(P<0.01),但Cur处理组的细胞活力较RO组升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.10nmol/L的RO对BV2细胞及SH-SY5Y细胞没有明显的神经毒性,Cur浓度在0-10μmol/L之间时对BV2细胞和SH-SY5Y细胞两种细胞的活力无明显影响。2.RO能明显升高BV2细胞内RAGE、NF-κB的蛋白表达,Cur能减弱RAGE、NF-κB蛋白表达,随着浓度的升高这种减弱作用逐渐增强。3.RO能诱导BV2细胞分泌炎症因子,而Cur能抑制BV2细胞炎症因子的分泌,随着浓度的升高这种抑制作用增强。4.Cur可能通过抑制RAGE、NF-κB蛋白的表达,进而抑制RAGE/NF-κB通路及下游炎症反应,从而发挥对PD的神经保护作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2018-05-01）
张蓓,陶冬,罗英,范希敏,范奇元[6]（2018）在《锰致大鼠多巴胺能神经细胞DA分泌减少效应中PARK2基因的调控作用》一文中研究指出目的研究锰对经RNA沉默PARK2基因后的多巴胺(DA)能神经元细胞功能的影响。方法用原代培养新生大鼠纹状体细胞,分3类处理组,即:单纯锰处理组、慢病毒对照组和慢病毒PARK2 SiRNA干扰处理组。各处理组均用不同浓度锰(0、300和500μmol/L)处理,分别用q PCR检测PARK2表达,Western blot检测Parkin,ELISA法检测细胞分泌的DA水平。结果在各处理组中:与0μmol/L相比较300和500μmol/L染锰组PARK2表达及Parkin蛋白、DA分泌含量均下降,差异有统计学意义(P<0.05);单纯染锰处理组及慢病毒对照组与PARK2 SiRNA干扰处理组比较,相同染锰剂量的PARK2表达及Parkin蛋白、DA分泌含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05);单纯染锰处理组与慢病毒对照组比较,相同染锰剂量的PARK2表达及Parkin蛋白、DA分泌含量均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对大鼠多巴胺(DA)能神经元细胞进行PARK2RNA干扰后再染锰,可加重其DA分泌量的降低,锰暴露作用下DA能神经元的功能与PARK2的改变相关。(本文来源于《毒理学杂志》期刊2018年02期）
罗东辉,罗坤,刘宏德[7]（2018）在《帕金森病多巴胺神经细胞的差异表达基因分析》一文中研究指出帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经退行性疾病,影响群体广泛。该文分析了帕金森病多巴胺细胞的表达和DNA甲基化信息,识别出了新的表达或者DNA甲基化异常的基因,并分析了这些基因与帕金森病的关联。结果表明:相比于正常细胞,帕金森病细胞中与微管形成相关的基因表达上调,这些基因包括SLAIN1、TAGLN3和TUBB2B;天然免疫关联的基因(如LY96)下调。另一个上调基因SCG5推测与免疫应激响应相关。DNA甲基化变化在启动子区显着,除了调节基因转录,这些变化可能通过PRC1和Pc G复合物改变染色质的活性水平。此外,表达水平和DNA甲基化同时调整的基因与轴突定向、胞内运输、神经元分化及迁移等功能有关。以上结果提供了对帕金森病机理特征的新的认识。(本文来源于《生命科学研究》期刊2018年01期）
李梦楠,马振凯,白宏英[8]（2017）在《姜黄素抑制BV2细胞RAGE/NF-κB通路发挥对多巴胺能神经细胞的保护作用》一文中研究指出目的探讨小胶质细胞在多巴胺能神经细胞损伤中所起的作用以及姜黄素通过抑制小胶质细胞的炎症反应发挥保护作用。方法选用鼠小胶质细胞系BV2细胞株和神经元SH-SY5Y细胞作为研究对象,利用鱼藤酮(Rotenone,RO)建立细胞损伤模型,10 nmol/L RO处理BV2细胞6 h后再经不同浓度(1、5、10μmol/L)姜黄素(Curcumin,Cur)处理4 h,收集BV2细胞上清液作为条件培养基处理SH-SY5Y细胞,并设置空白对照组。采用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测两种细胞活力,Western blot检测细胞BV2细胞内RAGE/NF-κB表达,ELISA法测定BV2细胞培养上清液细胞因子含量。结果 1~10μmol/L的Cur并未影响BV2细胞的增殖活力;与空白对照组相比,RO组RAGE/NF-κB的蛋白表达明显升高(P<0.01),与RO组相比,Cur处理组RAGE/NF-κB的蛋白表达量显着减少(P<0.05);与空白对照组相比,RO组炎症因子的分泌量明显升高(P<0.01),与RO组相比,Cur处理组随着浓度的升高炎症因子的分泌量逐渐减少(P<0.05);受条件培养基处理的SH-SY5Y细胞,与对照组相比,RO组细胞活力明显减弱(P<0.01),但Cur处理组的细胞活力较RO组升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Cur通过抑制小胶质细胞反应,从而保护多巴胺能神经细胞。(本文来源于《中风与神经疾病杂志》期刊2017年12期）
熊婧,胡丹,张振涛,张兆辉[9]（2017）在《丙酮酸乙酯对鱼藤酮诱导的多巴胺能神经细胞损伤的保护作用》一文中研究指出目的建立鱼藤酮(Rotenone,Rot)诱导的SH-SY5Y细胞模型,探讨丙酮酸乙酯(Ethyl pyruvate,EP)对多巴胺能神经细胞的保护作用及机制。方法 Rot作用于SH-SY5Y细胞,构建Rot诱导的PD细胞模型,使用不同浓度的EP作用于PD细胞模型,MTT法检测细胞活力,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,免疫印迹法检测LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白的表达,免疫荧光染色观察HMGB1的表达及定位。结果 EP减轻了Rot引起的多巴胺能神经细胞凋亡,并提高了细胞活力;EP减少了Rot诱导的LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比例增高,增加P62蛋白的表达,且与EP的水平呈正相关。激光共聚焦显微镜观察到EP抑制了HMGB1的胞浆转位。结论 EP可能通过抑制HMGB1的转位来减少Rot诱导的自噬性损伤,从而对多巴胺能神经细胞起到保护作用。(本文来源于《卒中与神经疾病》期刊2017年06期）
鲁峻,王小林,降建新,刘小星[10]（2017）在《硫辛酸对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经细胞及炎症因子的影响》一文中研究指出目的探讨硫辛酸(LA)对帕金森病(PD)大鼠黑质多巴胺能神经细胞及炎症因子的影响。方法选取无特定病原体的Wistar大鼠36只,将其按照随机数字表法分成对照组、模型组、LA组各12只,对照组大鼠给予背部皮下注射1 ml/kg的葵花油,模型组、LA组给予注射2 mg·kg-1·d-1的鱼藤酮,LA组注射鱼藤酮前30 min给予腹腔注射20 mg·kg~(-1)·d~(-1)的LA,均为1次/d,共注射30 d。观察各组大鼠在建模期间的活动量、食欲、步态、毛色等一般状态。检测各组大鼠黑质和纹状体内的酪氨酸羟化酶(TH)含量,对比各组大鼠的黑质TH/β-actin值、纹状体TH/β-actin值,同时检测并对比各组大鼠黑质区域的肿瘤坏死因子(TNF)-α光密度值、白介素(IL)-1β光密度值以及纹状体的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平。结果对照组黑质TH/β-actin值、纹状体TH/β-actin值显着高于模型组和LA组(P<0.05);LA组黑质TH/β-actin值、纹状体TH/β-actin值显着高于模型组(P<0.05);对照组黑质区域TNF-α和IL-1β的光密度值显著低于模型组和LA组(P<0.05);LA组黑质区域TNF-α和IL-1β的光密度值显著低于模型组(P<0.05)。对照组纹状体MDA水平显着低于模型组和LA组(P<0.05),LA组纹状体MDA水平显着低于模型组(P<0.05);对照组纹状体GSH水平显着高于模型组和LA组(P<0.05),LA组纹状体GSH水平显着高于模型组(P<0.05)。结论 LA能有效改善PD大鼠的疾病症状,同时能保护PD大鼠黑质多巴胺能神经细胞,抑制炎症反应,减轻氧化应激反应,LA可作为研究PD治疗药物新的切入点。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2017年24期）
多巴胺神经细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:应激是机体在各种内外环境因素及社会、心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应。目前的研究提示过度的应激会造成机体心理、生理及代谢功能等多方面的改变。本研究是结合法医学实践中亟待解决的重要科学问题而设计的,法医学检案中时有遭受重大精神打击的当事人或被羁押的犯罪嫌疑人发生死亡的案例,在排除所有其他死因的前提下,有部分学者认为属应激性死亡,但目前尚缺少足够的基础研究依据。众所周知应激反应首先引起中枢神经系统的改变,黑质(substantia nigra,SN)和腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)是中脑两个重要的多巴胺能神经核团,以往研究提示多巴胺能神经细胞可能在应激反应中发挥作用,但详细的作用机制尚不清楚,因此本研究旨在系统观察不同时程应激大鼠中脑黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的病理性改变,探明多巴胺能神经细胞特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)及内质网应激相关蛋白的表达变化,为应激性损伤的机制研究提供病理形态学依据。方法:1本实验将60只SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠,体重200±20g,随机分组,每组6只,分为1天、3天、7天、14天和21天组及各相应时间点的对照组。实验组采用束缚加冰水游泳应激模型(RS+IS应激模型),即给予大鼠每天6小时(8:00-14:00)仰卧位固定的束缚处理,同时禁食水,束缚完毕后,立即进行5分钟冰水游泳。在实验组处理期间,各对照组禁食水并自由活动于笼中,其余时间所有大鼠自由进食水,各实验组及相应对照组大鼠于实验结束第二天处死,取脑组织固定、脱水、透明、包埋及连续性切片,待做各种组织病理学染色使用。1)记录大鼠体重变化2)HE染色观察黑质和腹侧被盖区病理形态学改变3)硫堇特殊染色观察黑质和腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化4)TH免疫组织化学染色计数黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞数目改变5)免疫荧光多重标记探讨黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞内质网应激相关蛋白GRP78(glucose-regulated protein 78),CHOP(C/EBP homologous protein)表达变化2阳性细胞计数及统计学分析:运用全景组织定量分析系统(MMTC)对两区域多巴胺能神经细胞(棕色)进行数量统计,目前此软件已经在国内、外得到广泛认可。统计分析:采用SPSS21.0统计软件进行统计分析,各组均数的比较行单因素方差分析(One-way ANOVA),用最小显着差法(Least Significant Difference,LSD)作两两比较,以P<0.05为有显着统计学差异。结果:1.大鼠体重变化结果对照组大鼠体重随时间的延长呈逐渐上升趋势。束缚加冰水游泳应激实验组除1天组的体重略有下降外,其余各实验组随时间的延长大鼠体重逐渐增加且各实验组与相应对照组相比,实验组大鼠体重增长速度明显降低。2.黑质和腹侧被盖区病理形态学改变对照组两区域组织结构清晰,细胞体积正常,胞核和胞质层次清晰;应激1天组、3天组、7天组和对照组相比,组织未见明显病理学改变;应激14天组、21天组部分神经细胞固缩,胞浆深染,嗜酸性染色明显增强。3.黑质和腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化3.1黑质神经细胞尼氏体变化对照组黑质神经细胞结构清晰,尼氏体均匀分布于胞浆内。与对照组相比,应激1天组无明显变化,3天组部分神经细胞水肿,尼氏体结构不清,7天组、14天组部分细胞尼氏体消失,神经细胞胞浆固缩浓染,21天组尼氏体消失及胞浆浓染固缩的神经细胞数目增多。3.2腹侧被盖区神经细胞尼氏体变化对照组腹侧被盖区神经细胞胞浆丰富且分布均匀。与对照组相比,应激1天、3天组部分区域神经细胞出现水肿,胞浆染色加深,应激7天组、14天组部分神经细胞胞浆固缩浓染,尼氏体结构不清。21天组胞浆浓染固缩,尼氏体消失的神经细胞数目增多。4.黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞数目变化4.1黑质多巴胺能神经细胞数目变化在显微镜下用MMTC计数分析系统计数,结果:与对照组相比,应激1天组多巴胺能神经细胞数目未见明显改变,应激3天组、7天组、14天组和21天组,多巴胺能神经细胞数目随应激时间的延长呈逐渐减少趋势。4.2腹侧被盖区多巴胺能神经细胞数目变化在显微镜下用MMTC计数分析系统计数,结果:与对照组多巴胺能神经细胞数目相比,应激1天组未见明显差异,3天组、7天组、14天组和21天组,随着应激时间的延长,多巴胺能神经细胞数目明显减少。5.黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞TH~+-GRP78~+、TH~+-CHOP~+共表达变化5.1黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞TH~+-GRP78~+共表达变化黑质:与对照组相比,应激1天组,3天组TH~+-GRP78~+共表达阳性细胞数目迅速增多并到达高峰,随着应激时程的延长,TH~+-GRP78~+共表达阳性细胞数目在应激7天组、14天组和21天组明显减少。腹侧被盖区:和对照组相比,TH~+-GRP78~+共表达阳性细胞在应激1天组,3天组急剧升高,并在3天组到达峰值,随着应激时间的延长,7天组、14天组和21天组共表达阳性细胞数目显着减少。5.2黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞TH~+-CHOP~+共表达变化黑质:与对照组相比,TH~+-CHOP~+共表达阳性细胞在应激1天组,3天组,7天组,14天组逐渐升高,尽管应激21天组共表达阳性细胞数目减少,但仍明显高于对照组。腹侧被盖区:与对照组相比,TH~+-CHOP~+共表达阳性细胞在应激1天组,3天组,7天组,14天组逐渐上升并到达高峰,虽然应激21天组共表达阳性细胞数目减少,但仍明显高于对照组。6.多巴胺神经细胞数量与TH~+-CHOP~+共表达细胞数量相关分析。两区域多巴胺神经细胞数量与TH~+-CHOP~+共表达细胞数量的变化呈明显的负相关关系。结论:本研究成功建立了不同时程束缚加冰水游泳应激大鼠模型,采用HE染色、硫堇染色、免疫组织化学染色和免疫荧光多重标记进行了系统研究。研究结果表明较长时程的应激可以导致黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的损伤及数目的减少,内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP的表达呈现了动态变化,提示内质网应激可能参与了中脑多巴胺能神经细胞的病理性改变。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
多巴胺神经细胞论文参考文献
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