高效毛细管电泳指纹图谱法检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的实验研究

高效毛细管电泳指纹图谱法检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的实验研究

论文摘要

建立了用高效毛细管电泳指纹图谱法来检测全蝎酶解液中蛋白类成分(>10k Da)的分析方法。采用未涂层弹性熔融石英毛细管柱(93 cm×0.75μm),有效柱长为79 cm;二极管阵列检测器;50 mbar压力进样10s;运行电压为-30 kV;柱温为20℃;运行时间为60 min;考察不同检测波长、缓冲溶液种类、pH、浓度等对色谱峰的影响,并对10批样品做了相似度评价。在缓冲溶液浓度为0.2 mol·L-1、pH=5.0硼酸缓冲溶液时响应值较高,谱图效果最好;检测波长为220 nm时出峰较多、吸收好,初步建立了以25个峰为共有峰的指纹图谱。结论:25个峰的高效毛细管电泳指纹图谱共有模式可以作为全蝎酶解液中蛋白类成分(>10 kDa)的鉴别方法。

论文目录

  • 1 实验部分
  •   1.1 仪器
  •   1.2 试剂
  • 2 方法与结果
  •   2.1 供试品的制备
  •   2.2 电泳条件
  •   2.3 单因素考察
  •     2.3.1 检测波长确定[4]
  •     2.3.2 缓冲溶液种类的确定
  •     2.3.3 缓冲溶液浓度的确定
  •     2.3.4 缓冲溶液p H的确定[4]
  •   2.4 方法学考察[10, 11, 17]
  •     2.4.1 稳定性实验
  •     2.4.2 精密度实验
  •     2.4.3 重现性实验
  •   2.5 指纹图谱的建立[18, 19]
  •   2.6 指纹图谱分析
  •     2.6.1 共有指纹图谱的标定
  •     2.6.2 相似度评价
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张政,孙志艺,王涵琪,王集会,史磊

    关键词: 高效毛细管电泳,蛋白,全蝎酶解液

    来源: 当代化工 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

    专业: 化学,中药学

    单位: 山东中医药大学药学院,山东中医药大学外国语学院,山东中医药大学实验中心

    基金: 山东省高等学校科技计划,项目号:J17KA244,山东省中医药科技发展计划项目,项目号:2017-025,山东中医药大学大学生研究训练计划,项目号:2018046

    分类号: O658.9;R284.1

    DOI: 10.13840/j.cnki.cn21-1457/tq.2019.06.008

    页码: 1144-1148

    总页数: 5

    文件大小: 1227K

    下载量: 137

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