产气荚膜梭菌β毒素蛋白抗原表位预测及CPB-N蛋白免疫原性分析

产气荚膜梭菌β毒素蛋白抗原表位预测及CPB-N蛋白免疫原性分析

论文摘要

为获得具有与β毒素蛋白相同免疫原性的新蛋白,本研究对产气荚膜梭菌β毒素蛋白的氨基酸序列进行综合分析,预测其抗原表位并筛选出有效的新蛋白。采用生物信息学方法综合分析β毒素蛋白二级结构、亲水性、可塑性、抗原性、跨膜区域以及信号肽,同时参考ElliPro服务器在线预测。最终预测aa108~aa320区段为优势抗原表位,在此基础上建立β毒素蛋白三维结构模型,标记特殊位点并筛选出B型产气荚膜梭菌新蛋白(CPB-N)。诱导表达CPB-N后通过SDS-PAGE和western blot鉴定,结果显示在约24 ku处有明显条带。采用间接ELISA方法对免疫小鼠的血清和肠道灌洗液样品进行检测,结果表明CPB-N与β毒素蛋白的免疫原性基本相同。CPB-N蛋白的筛选及预防产气荚膜梭菌引起的疾病奠定了重要的研究基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 β毒素蛋白抗原表位预测
  •   1.3 CPB-N蛋白表达与鉴定
  •   1.4 小鼠免疫及样品采集
  •   1.5 特异性抗体测定
  •   1.6 数据统计
  • 2 结果
  •   2.1 β毒素蛋白抗原表位预测
  •   2.2 β毒素蛋白三级结构预测及CPB-N蛋白筛选
  •   2.3 CPB-N蛋白的表达及鉴定
  •   2.4 CPB-N蛋白与β毒素蛋白免疫原性比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王玉建,商红旗,朱琳,徐煜琳,胡莉萍,朱瑞良

    关键词: 产气荚膜梭菌,毒素蛋白,抗原表位,免疫原性

    来源: 中国预防兽医学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 山东农业大学动物科技学院/山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室,山东省动物疫病预防与控制中心

    基金: 十三五国家重点研发计划(2016YFD0500905),山东省重点研发计划项目(2016GGH3115),山东省农业重大应用技术创新资金资助,山东省现代农业产业技术体系建设经费(SDAIT-10-06)

    分类号: S852.61

    页码: 188-191

    总页数: 4

    文件大小: 609K

    下载量: 142

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