维药新塔花(Ziziphora bungena)zbHDS基因克隆及组织表达分析

维药新塔花(Ziziphora bungena)zbHDS基因克隆及组织表达分析

论文摘要

对维药新塔花(Ziziphora bungena)萜类化合物生物合成途径中,关键酶1-羟基-2甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸合成酶HDS基因克隆,进行组织表达特异性分析,为研究新塔花萜类化合物生物合成途径与基因调控提供基础。结合新塔花转录组数据库,根据编码区序列设计引物,通过RT-PCR方法对Z. bungena基因HDS (zbHDS)的编码区cDNA进行克隆,对其进行相关生物信息学分析,通过Real-Time进一步分析其组织表达特异性。RT-PCR扩增了一个长2 465 bp的zbHDS (登录号:MG065856)基因片段,含一个2 229 bp的开放阅读框,编码742个氨基酸。进化树分析结果显示,与丹参(Salvia miltiorrhiza)具有较近的亲缘关系。Real-Time PCR结果显示zbHDS基因在各器官中均有表达,在茎和叶中表达量较高,根和花中表达量相对较低。本研究首次从新塔花中克隆HDS基因并获得其编码区序列,zbHDS基因具有组织表达特异性,为进一步研究新塔花中萜类化合物生物合成途径提供数据支持。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 zbHDS基因的克隆
  •   1.2 zbHDS蛋白理化性质分析
  •   1.3 zbHDS蛋白疏水性、信号肽、亚细胞定位及跨膜结构域预测与分析
  •   1.4 zbHDS蛋白二级结构分析
  •   1.5 zbHDS氨基酸序列系统进化分析
  •   1.6 zbHDS mRNA在不同组织中相对表达分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 主要试剂
  •   3.3 总RNA的提取及cDNA的合成
  •   3.4 新塔花zbHDS基因克隆与测序
  •   3.5 zbHDS基因生物信息学及系统进化分析
  •   3.6 Real-Time PCR
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 程波,何江,地力努尔·吐尔逊江,杨伟俊,满尔哈巴·海如拉,刘冲

    关键词: 新塔花,羟甲基丁烯基磷酸合成酶,基因克隆,组织表达

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

    专业: 生物学,农作物

    单位: 新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室

    基金: 新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2017D01B45)资助

    分类号: S567.239;Q943.2

    DOI: 10.13417/j.gab.038.002686

    页码: 2686-2691

    总页数: 6

    文件大小: 821K

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