导读:本文包含了免疫沉淀法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:免疫,蛋白,沉淀法,抗原,抗体,脱羧酶,染色质。
免疫沉淀法论文文献综述
梁延连,洪文旭,苏宇清,张印则,梁爽[1]（2018）在《免疫沉淀法与质谱联用检测Rh血型抗原蛋白序列方法的研究》一文中研究指出目的对人类红细胞Rh血型抗原蛋白进行序列分析方法学的建立,为验证Rh血型基因在红细胞膜上抗原量的表达奠定基础。方法随机选取10例已知RhD阳性抗凝血5mL,对标本中的Rh血型抗原蛋白进行免疫沉淀,使用蛋白酶裂解法提取红细胞膜的Rh蛋白并进行浓度定量,蛋白酶切后使用LC-MS质谱平台进行Rh蛋白鉴定。结果制定出适合检测Rh血型蛋白的标准曲线,计算出10例标本的Rh血型蛋白的浓度,鉴定到Rh血型目标蛋白序列,在Blast平台检索到所测蛋白的相合度与Rh参比序列吻合度达80%(本文来源于《中国输血协会第九届输血大会论文专辑》期刊2018-11-01）
韩志霞,刘芳,蒋大伟,许兰菊,孔江南[2]（2016）在《利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选》一文中研究指出为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白,分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract?天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白;应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质;利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34 000~55 000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC-MS/MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2,37 000Laminin receptor precursor,LIM and SH3protein 1,ras-related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础,而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年11期）
韩志霞[3]（2016）在《利用免疫沉淀法初步筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白受体》一文中研究指出志贺菌病是由革兰氏阴性志贺菌引起的,可出现伴有血液和粘液的稀粪便,同时会引起机体的里急后重、腹部疼痛和发热等发病症状。志贺菌除感染人外,还可以感染猪、猕猴、狐狸、牛、鸡、鸭等多种动物。近些年发现的鸡源志贺菌可感染不同品种和日龄的鸡,尤其是雏鸡,给养禽业带来严重的影响。国内外研究发现鸡源志贺菌不仅可引起家禽的相互感染,在人禽之间也会发生交叉感染,不仅给养禽业的发展带来损害,也给人类的卫生安全造成了隐患。志贺菌引起机体发病的关键环节是能侵入肠上皮细胞内进行增殖和扩散,而这一环节的发生又必须具备两个要素,一是肠上皮细胞表面必须存在细菌吸附所需的相应特异性受体,该受体已被证实存在于人肠道上皮细胞的基底外侧膜;二是志贺菌必须具有与细胞表面受体相结合的侵袭性蛋白。主要包括编码Ⅲ型分泌系统的mxi-spa基因和编码侵袭性蛋白Ipa(A、B、C、D)的基因。侵袭性蛋白Ipa B和IpaC结合成复合物,复合物的IpaC端首先与肠上皮细胞基底面的受体结合,并进一步介导细菌侵入细胞。体外实验表明,只有重组纯化的IpaC蛋白才能够在一定程度上恢复志贺菌的侵袭能力。相关研究表明:人源志贺菌可感染雏鸡并引起发病死亡,而且还发现鸡源志贺菌拥有与人源菌株相同的IpaC蛋白分子,但是尚不清楚鸡源志贺菌是否存在与人相似的IpaC蛋白受体分子。本研究进行鸡肠上皮细胞膜上IpaC蛋白受体的筛选,为进一步阐明志贺菌在鸡体内的致病机制奠定了基础、提供了科学依据。研究结果如下:1.鸡源志贺菌IpaC基因的原核表达及IpaC蛋白纯化利用本实验室构建和保存的重组表达菌株pET32a-IpaC/BL21和p ET32a/BL21,进行菌种复苏和培养,并进行PCR鉴定。37℃培养至OD600为0.6-1.0时,加入终浓度为1.0m M的IPTG诱导剂诱导,28℃继续培养8h。利用超声波破碎仪裂解菌液,破碎上清用镍柱亲和纯化,纯化条件为:含咪唑50mM的Washing Buffer洗脱杂蛋白,含咪唑250mM的Elution Buffer洗脱目的蛋白。表达和纯化后的蛋白利用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,SDS-PAGE结果表明不但成功表达出了IpaC蛋白和空载体蛋白,并且两种蛋白的纯化结果都达到95%以上,Western blot结果表明IpaC蛋白和空载体蛋白具有良好的生物学活性。2.鸡肠上皮细胞的培养及膜蛋白的提取采用18日龄的SPF鸡胚进行肠组织的分离,利用300U/mL XI型胶原酶和0.1 mg/mL I型中性蛋白酶进行联合消化肠组织,用贴壁时间差法纯化鸡肠上皮细胞,在倒置显微镜下能看到呈铺路石样的细胞,碱性磷酸酶染色为阳性。利用膜蛋白提取试剂盒提取培养48h的肠上皮细胞的膜蛋白,并用Na+/K+-ATPaseα1兔源多克隆抗体进行Western blot鉴定,结果表明提取物中富集了鸡肠上皮细胞膜蛋白。3.鸡源志贺菌IpaC蛋白受体的筛选利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白和空载体蛋白,由于生物素和亲和素系统具有较强结合能力,利用链霉亲和素磁珠和生物素标记的IpaC蛋白进行磁性分离,能与IpaC蛋白结合的鸡肠上皮细胞膜蛋白会被富集到磁珠上,加入蛋白上样缓冲液分离磁珠和富集物。处理好的磁珠样品进行SDS-PAGE分离和Western blot鉴定,确定能和IpaC结合的目的条带。筛选出的蛋白条带利用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)进行质谱检测和生物信息学分析,结合对IpaC蛋白已有资料的分析,初步将annexin A2,37kD Laminin receptor precursor,LIM and SH3 protein 1,ras-related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白,并明确了其氨基酸序列,关于确切的IpaC受体试验目前正在进行中,有关该受体的蛋白结构和生物学功能有待进一步研究。(本文来源于《河南农业大学》期刊2016-06-01）
叶灵,姜长安[4]（2012）在《免疫沉淀法纯化线粒体的研究》一文中研究指出传统的线粒体分离技术,如差速离心和密度梯度离心不能有效应用于小规模高纯度的线粒体制备。为了提高线粒体纯化的速度和质量,我们尝试运用免疫沉淀法制备线粒体。通过用EGFP-4Flag融合蛋白来标记线粒体外膜,然后用单克隆Flag抗体和Protein G Agarose珠子做免疫沉淀,从培养的细胞中分离出高纯度的线粒体。这一简便高效的方法将有助于线粒体的生化研究。(本文来源于《四川动物》期刊2012年04期）
杨慧,陈恒,顾愹,许馨予,徐宽枫[5]（2011）在《免疫印迹和放射免疫沉淀法检测胰岛自身抗体的比较》一文中研究指出目的探讨免疫印迹法(IB)和放射免疫沉淀法(RIP)在胰岛自身抗体检测中的差异。方法 IB和RIP分别测定本院55例和外院218例1型糖尿病(T1DM)患者的谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)和胰岛素自身抗体(IAA)水平;再从218例外院患者中随机抽取24例,用IB和RIP分别检测血清中GADA和IA-2A,评价两种方法的敏感性。结果 IB和RIP检测IA-2A阳性率无明显差异(P>0.05),而GADA、IAA总阳性率的差异均有统计学意义(P<0.05)。两种方法联合检测GADA和IA-2A的抗体总阳性率为91.7%,高于单一方法的检测结果。结论 IB检测GADA和IAA的敏感性明显低于RIP,且两种方法联合检测的抗体检出率明显高于单一方法。(本文来源于《江苏医药》期刊2011年10期）
吕艳香,梁树辉,刘洋,梁淑丽,乔丽娟[6]（2010）在《胃癌血管特异性短肽GEBP11结合受体的免疫沉淀法筛选》一文中研究指出目的:筛选胃癌血管特异性短肽GEBP11(CTKNSYLMC)的结合受体。方法:采用Western-blot、免疫细胞化学染色法对共培养人脐静脉内皮细胞(co-HUVECs)CD31和KDR的表达进行检测;化学合成生物素标记的GEBP11,应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与GEBP11结合的蛋白质;采用Western-blot检测,确定并获取特异性蛋白条带;利用液相色谱-二级质谱(LC-MS/MS)及生物信息学分析,对条带蛋白进行测序和分析。结果:co-HUVECs表达CD31,KDR表达增加。通过免疫沉淀和Western-blot分析,发现一条与GEBP11特异结合的条带,其分子量约为12KD。经LC-MS/MS和生物信息学分析,获得候选蛋白ATP7B。结论:经鉴定co-HUVECs表达内皮细胞标志性分子且KDR表达上调;利用免疫沉淀-质谱法筛选获得了GEBP11受体的候选蛋白,为研究GEBP11的作用机制奠定了基础。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2010年06期）
林艳丽,周艳荣,阎新龙,熊福银,田利源[7]（2009）在《染色质免疫沉淀法筛选转录因子Nanog调控的目的基因》一文中研究指出目的:利用染色质免疫沉淀法筛选转录因子Nanog调控的目的基因。方法:用甲醛固定胚胎干细胞,利用超声将其染色质随机断裂成0.5～1.0kb的染色质片段,通过免疫沉淀富集与Nanog结合的DNA片段,回复交联后分离纯化DNA片段,最终用凝胶迁移阻滞实验验证Nanog与DNA片段的结合。结果:我们发现fzr为Nanog调控的目的基因,并通过电泳迁移率变动分析证明了二者的结合。结论:Fzr在细胞周期调控中发挥重要作用,这为阐明Nanog的作用机理奠定基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2009年06期）
许晓光,黄海燕,宋朝君,石炳毅,蔡明[8]（2008）在《单克隆抗体-免疫沉淀法筛选肿瘤表面抗原》一文中研究指出目的:筛选新的肿瘤特异性抗原,为探索新的肿瘤诊断标志物和肿瘤疫苗打下基础。方法:将人宫颈癌细胞系Hela细胞免疫BALB/c小鼠,制备杂交瘤,应用人结肠癌细胞系Colo205、人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji等细胞进行花环形成试验筛选阳性杂交瘤。应(本文来源于《第六届全国免疫学学术大会论文集》期刊2008-10-01）
李泽孟,蒋文英,张劲,魏荣,朱建宏[9]（2007）在《免疫沉淀法分离血清APO-B在慢性丙型肝炎与脂代谢研究中的应用》一文中研究指出目的:为研究西安地区慢性丙型肝炎(HCV)感染与脂代谢关系而探讨脂质简便分离技术的可行性。方法:以羊抗人APO-B抗血清沉淀并分离HCV抗体阳性者血清APO-B,再以PCR技术进行扩增检测APO-B中HCV-RNA,并作血清HCV-RNA检测及HCV抗体阴性组对照。结果:在HCV抗体阳性者血清APO-B实验组中,检出了HCV-RNA,且拷贝数占血清中HCV-RNA的较大比率(4.74%~27%),而各对照组中没有HCV-RNA表达。结论:免疫沉淀法分离血清APO-B的实验方法是一项传统的成熟技术,操作方便稳定可靠,实验结果进一步支持和证实了HCV与LDL结合的密切关系。(本文来源于《实用医技杂志》期刊2007年10期）
傅湘辉,刘德培,辛立,郝德龙,董文吉[10]（2003）在《一种简便的染色质免疫沉淀法的建立》一文中研究指出染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的染色质免疫沉淀法 ,并通过对诱导前后的MEL细胞中 β 珠蛋白基因簇组蛋白H3乙酰化的研究 ,证实了其可操作性 .结果表明 :高敏位点HS2和活跃基因 βmaj的启动子区域存在较高的组蛋白乙酰化水平 ,且诱导前后变化显着 ,而不活跃基因Ey的启动子区域则几乎检测不到组蛋白的乙酰化 ,且诱导前后无明显变化 .这一结果与以前的报道相吻合(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2003年04期）
免疫沉淀法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白,分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract?天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白;应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质;利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34 000~55 000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC-MS/MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2,37 000Laminin receptor precursor,LIM and SH3protein 1,ras-related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础,而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫沉淀法论文参考文献
[1].梁延连,洪文旭,苏宇清,张印则,梁爽.免疫沉淀法与质谱联用检测Rh血型抗原蛋白序列方法的研究[C].中国输血协会第九届输血大会论文专辑.2018
[2].韩志霞,刘芳,蒋大伟,许兰菊,孔江南.利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选[J].中国兽医学报.2016
[3].韩志霞.利用免疫沉淀法初步筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白受体[D].河南农业大学.2016
[4].叶灵,姜长安.免疫沉淀法纯化线粒体的研究[J].四川动物.2012
[5].杨慧,陈恒,顾愹,许馨予,徐宽枫.免疫印迹和放射免疫沉淀法检测胰岛自身抗体的比较[J].江苏医药.2011
[6].吕艳香,梁树辉,刘洋,梁淑丽,乔丽娟.胃癌血管特异性短肽GEBP11结合受体的免疫沉淀法筛选[J].现代肿瘤医学.2010
[7].林艳丽,周艳荣,阎新龙,熊福银,田利源.染色质免疫沉淀法筛选转录因子Nanog调控的目的基因[J].生物技术通讯.2009
[8].许晓光,黄海燕,宋朝君,石炳毅,蔡明.单克隆抗体-免疫沉淀法筛选肿瘤表面抗原[C].第六届全国免疫学学术大会论文集.2008
[9].李泽孟,蒋文英,张劲,魏荣,朱建宏.免疫沉淀法分离血清APO-B在慢性丙型肝炎与脂代谢研究中的应用[J].实用医技杂志.2007
[10].傅湘辉,刘德培,辛立,郝德龙,董文吉.一种简便的染色质免疫沉淀法的建立[J].生物化学与生物物理进展.2003
论文知识图
