Hg2+和Pb2+对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响

论文摘要

节肢动物蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（EC3.2.1.52,NAGase）密切相关。为了探究Hg2+和Pb2+这2种重金属离子对节肢动物NAGase的影响,以中国鲎（Tachypleus tridentatus）为材料,从其内脏分离提取了NAGase。利用酶促反应动力学方法,研究Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的影响;通过对酶荧光发射光谱的测定,研究NAGase酶蛋白经Hg2+和Pb2+作用后的空间构象变化。结果表明,Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase均有较强的抑制作用,Hg2+对NAGase的抑制作用强于Pb2+,Hg2+和Pb2+对NAGase的抑制作用均表现为可逆过程,其中Hg2+对NAGase的抑制属于竞争性抑制作用,抑制常数KI为22.68μmol·L-1,Hg2+只与游离酶结合,不与酶-底物络合物结合;而Pb2+对NAGase的抑制是属于竞争性-非竞争性混合型抑制作用,抑制常数KI和KIS分别为19.13 mmol·L-1和75.23 mmol·L-1,Pb2+与游离酶的亲和力相比与酶-底物络合物的亲和力更强。NAGase经Hg2+和Pb2+作用后荧光发射强度均降低,但荧光发射峰值并没有发生位移,说明Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的抑制作用均为酶蛋白空间构象的变化所致。这证明了Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase活力具调控作用。

论文目录

• 1 材料与方法（Materials and methods）
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 中国鲎NAGase活力测定
•     1.2.2 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase活力的影响
•     1.2.3 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的抑制作用机理
•     1.2.4 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的抑制作用类型
•     1.2.5 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase荧光发射光谱的影响
• 2 结果（Results）
•   2.1 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase活力的影响
•   2.2 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的抑制作用机理
•   2.3 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase的抑制作用类型
•   2.4 Hg2+和Pb2+对中国鲎NAGase内源荧光发射光谱的影响
• 3 讨论（Discussion）

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 林建城,罗新明,林娟娟

关键词: 中国鲎,乙酰氨基葡萄糖苷酶,抑制作用,构象变化

来源: 生态毒理学报 2019年05期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,环境科学与资源利用

单位: 莆田学院环境与生物工程学院,福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室(莆田学院)

基金: 福建省自然科学基金项目(2018J01467),福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室开放课题(PY16009),莆田学院科研课题(2018005)

分类号: X171.5

页码: 236-243

总页数: 8

文件大小: 1512K

下载量: 62