导读:本文包含了双特异抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,细胞,内皮,肿瘤,蛋白,肝癌,骨髓。
双特异抗体论文文献综述
高婉莉,杨黎,刘姗,赵智辉[1]（2017）在《抗CD3×CD87单链双特异抗体介导的单个核细胞对前列腺癌细胞杀伤作用的体外研究》一文中研究指出本研究尝试探讨抗CD3×CD87单链双特异抗体介导的单核细胞对CD87+前列腺癌细胞的杀伤作用.首先,利用基因工程手段,构建了pET24a/抗CD3×CD87单链双特异抗体原核表达载体;将重组载体转化BL-21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导蛋白表达;获得的工程菌经超声破碎,先在变性条件下亲和纯化目的蛋白,再采用稀释复性方法对scBsAb进行复性.其次,利用流式细胞术检测表达纯化的scBsAb与两种相应抗原的结合情况.最后,通过CCK-8法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对CD87阳性前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应.结果表明,利用基因工程手段获得了较高纯度的scBsAb;scBsAb能与PC-3细胞表面CD87特异性结合,并且能与CD3特异性结合;scBsAb的浓度及效靶比影响scBsAb介导的杀伤作用.在效靶比为10∶1,scBsAb浓度为100μg/mL时最大杀伤率达到40.86%;在scBsAb浓度为100μg/mL,效靶比为40∶1时达到最大杀伤率60.9%.此外,ELISA检测表明,在scBsAb介导的PBMCs靶向CD87阳性肿瘤细胞杀伤过程中IFN-γ的水平显著增高.结果证明,scBsAb能够在体外有效介导效应细胞杀伤CD87阳性肿瘤细胞.(本文来源于《南京师大学报(自然科学版)》期刊2017年02期）
陈平长[2]（2017）在《微环DNA表达anti-IGF1R/CD3双特异抗体的抗肝癌体外免疫研究》一文中研究指出搜寻合适的治疗靶点被认为是肿瘤免疫治疗开发的前提条件。研究表明,胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor,IGF1R)在肝癌(HCC)细胞中高表达,对促进HCC细胞生长、增殖起关键作用,是一种重要的肝癌标志物。因此,IGF1R成为肝癌治疗的研究热点,已有多个IGF1R单抗药物进入临床开发阶段。然而,单克隆抗体对肿瘤细胞的作用,主要机制是通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC),对肿瘤特别是实体瘤包括肝癌的作用十分有限。双特异抗体是近年来兴起的一种新型肿瘤免疫治疗技术,能桥接肿瘤细胞与T细胞,在肿瘤细胞和T细胞之间形成“免疫突触”,从而高效地介导T细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤。研究表明,双特异抗体介导的肿瘤特异杀伤效率比单抗强万倍以上。此外,双特异性抗体分子量小(仅为单抗1/3),易于渗入肿瘤组织,也有助于提高疗效。因而,双特异抗体具有巨大的应用前景。但双特异性抗体半衰期短,需连续给药,给治疗带来了诸多不便。我们计划用基因载体在长期稳定表达双特异抗体来克服这些问题,具体包括:1)构建基于微环DNA基因载体,表达双特异抗体Anti-IGF1R/CD3;2)开发新型有机-无机基因递送系统stPEI-CaP/MC.DNA。结果表明,stPEI-CaP/MC.DNA能高效转染HEK293t细胞,表达anti-IGF1R/CD3抗体,并且对细胞几乎没有毒性;Anti-IGF1R/CD3双特异抗体能具有介导T细胞靶向、高效清除肝癌细胞。本研究进一步证明,基于微环DNA载体表达双特异抗体的抗癌策略的可行性,并为肝癌的免疫治疗提供一种可供选持的基因药物。(本文来源于《中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院)》期刊2017-05-01）
李路军,杨艳群,胡雪平,谢冕,刘梦元[3]（2014）在《抗TNF-α/抗ED-B双特异抗体的构建与功能分析》一文中研究指出为了赋予TNF-α抗体对炎症组织的特异性,构建了抗TNF-α/抗纤维连接蛋白额外域B(ED-B)的基因工程双特异抗体Bs Db。Bs Db在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物经鉴定、纯化和复性制备后,进行了生物学活性和药动学分析。Bs Db可同时结合重组人TNF-α和ED-B,并中和TNF-α生理作用。在胶原诱导的小鼠关节炎模型中,Bs Db快速从血浆和正常组织清除,但能选择性的积累和保留于炎症关节。说明Bs Db具有炎症组织的特异性和正常组织的低毒性,在类风湿关节炎和其他自身免疫性疾病的治疗上具有较大潜力,为其临床前期研究奠定了基础。(本文来源于《药学学报》期刊2014年12期）
胡雪平,谢冕,李路军,蒋思婧,刘梦元[4]（2015）在《抗TNF-α/抗ED-B双特异抗体在酵母中的分泌表达与活性分析》一文中研究指出赋予抗TNF-α单链抗体片段(TNF-sc Fv)对炎症组织的特异性,用一段来自人清蛋白(HSA)的柔性连接肽在基因水平上连接TNF-sc Fv和抗B型纤维连接蛋白(B-FN)的额外域B(ED-B)的sc Fv L19,构建了抗TNF-α/抗ED-B单链双特异抗体Bs Db,其中B-FN为炎症组织中特异表达的抗原。Bs Db在毕赤酵母中获得了分泌表达,表达产物经鉴定和纯化制备后,进行了功能分析。结果表明,Bs Db保留了其亲本抗体TNF-sc Fv和L19对抗原的免疫反应性,能够同时结合TNF-α和ED-B,并中和TNF-α的生理作用。而且,Bs Db对抗原的亲和力及中和能力与大肠杆菌包涵体来源的亲本抗体相比显着增强。在小鼠佐剂型关节炎(AIA)模型中,Bs Db能选择性地积累和保留于小鼠的炎症关节,并快速从血浆中清除。说明Bs Db兼备炎症组织的特异性和正常组织的低毒性,在类风湿关节炎及其他慢性炎症性疾病的治疗上具有较大潜力。(本文来源于《生物工程学报》期刊2015年05期）
王卓智[5]（2013）在《双特异抗体药物》一文中研究指出双特异抗体能结合两种不同的标靶,因而此类抗体有更好的特异性和功能,可用于各种疾病的治疗。近几十年来各种形式的双特异抗体被设计和研发出来以提高其均匀性和适用于不同的需求。目前一种双特异抗体在欧州批准上市,约二十种双特异抗体在临床试验阶段。此外,生物公司和传统制药公司近几年来签属了价值上亿美元的合约和合并项目以开发创新型的双特异抗体药物。拜耳科学家研制了新型的双特异抗体:蛋白酶调节型双特异抗体。此种抗体的结合性能为微环境中的蛋白酶所调节。我们设计并筛选了了多种类型的蛋白酶调节型双特异抗体,具有广阔应用前景。(本文来源于《抗体研发与人类健康——2013第五届国际抗体大会论文集》期刊2013-03-18）
杨彦,陈庆伟,曹光煜,李桂琼[6]（2012）在《双特异抗体增效内皮祖细胞移植促进心肌血管新生》一文中研究指出目的探讨在双特异抗体(BiAb)的辅助下,内皮祖细胞(EPCs)移植可否更好的定向归巢大鼠缺血心肌促进血管新生。方法体外分离培养鉴定SD大鼠骨髓源性内皮祖细胞;开胸结扎SD大鼠冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型;以anti-CD34(能识别内皮祖细胞)和抗肌凝蛋白轻链抗体(AMLCA)(能特异性结合缺血心肌)2种抗体,化学交联法制备BiAb(CD34×AMLCA)。将此BiAb与EPCs经尾静脉输入心肌梗死大鼠(EPCs+BiAb组),另设单纯EPCs移植组、单纯BiAb组、对照组。细胞移植35 d后M型超声心动图检测大鼠左室收缩功能,免疫组织化学法行5-Brdu及VIII因子检测,实时荧光定量PCR及Western blot检测大鼠心肌VEGF mRNA与蛋白表达。结果与其余组相比,EPCs+BiAb组射血分数及短轴缩短率增加,心梗区周围5-BrdU阳性细胞数及微血管密度增加,心肌VEGF mRNA与蛋白表达增加(P<0.05)。结论 CD34×AMLCA双特异抗体可增效大鼠骨髓源性内皮祖细胞定向归巢到大鼠缺血心肌,改善心功能,更好的促进血管新生。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2012年06期）
杨彦[7]（2012）在《双特异抗体CD34×AMLCA联合内皮祖细胞移植促进心肌血管新生的实验研究》一文中研究指出第一部分大鼠骨髓内皮祖细胞的分离、培养、鉴定目的：建立一种稳定可靠、纯度较高的SD大鼠骨髓内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells，EPCs)分离、鉴定并诱导培养成血管内皮细胞的方法。方法：密度梯度离心法从大鼠骨髓中提取单个核细胞后转入预包被人纤维连接蛋白的培养瓶中，添加适宜浓度的3种生长因子共同诱导培养14d，进行形态学、免疫学（免疫细胞化学染色鉴定细胞表面抗原）、功能学（FITC-UEA-1与Dil-acLDL双荧光染色）鉴定。结果：倒置显微镜下可见贴壁细胞呈梭形、条索状、网格状排列，旋涡状、放射状、铺路石样生长。免疫细胞化学染色显示CD31、CD34、CD133、vWF、Flk-1在不同时段呈现不同的阳性表达率。激光共聚焦显微镜下见EPCs结合FITC-UEA-1（显示绿色荧光）并内吞Dil-acLD（显示红色荧光）显示黄色荧光（红绿两种荧光重合），即免疫双荧光染色阳性，该细胞被认为是正在分化的EPCs。结论： Percoll密度梯度离心法及贴壁筛选法经bFGF、EGF、VEGF共同诱导培养后可获得纯度较高的内皮祖细胞，该细胞具有内皮细胞特性，可体外诱导分化成血管内皮细胞。第二部分双特异抗体增效内皮祖细胞移植促进心肌血管新生目的：探讨在双特异抗体（Bispecific antibody，BiAb）的辅助下，内皮祖细胞移植可否更好的定向归巢大鼠缺血肌促进血管新生。方法：体外分离培养鉴定SD大鼠骨髓源性内皮祖细胞；开胸结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型；以抗肌凝蛋白轻链抗体（AMLCA，能特异性结合缺血心肌）和anti-CD34（能识别内皮祖细胞）两种抗体，化学交联法制备BiAb（CD34×AMLCA）。将此BiAb与EPCs经尾静脉输入心肌梗死大鼠（EPCs+BiAb组），另设EPCs组、BiAb组及对照组。细胞移植35d后M型超声心动图检测LVEF及FS以评价心功能，免疫组织化学法行5-Brdu及VIII因子检测，qRT-PCR及Western blot检测大鼠心肌VEGF的表达。结果：与其余组相比，EPCs+BiAb组射血分数及短轴缩短率增加，心梗区周围5-BrdU阳性细胞数及微血管密度增加，心肌VEGF mRNA与蛋白表达增加（P均<0.05）。结论：CD34×AMLCA可增效大鼠骨髓内皮祖细胞定向归巢到大鼠缺血心肌，更好的促进缺血心肌的血管修复与再生，改善心功能，为干细胞靶向移植提供一种新的途径。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2012-05-01）
邓玮,陈庆伟,李兴升,刘灏,牛司强[8]（2011）在《双特异抗体增效骨髓间充质干细胞干预心肌纤维化》一文中研究指出目的:探讨在双特异抗体(Bispecificantibody,BiAb)的辅助下,骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)移植干预心肌纤维化的效果。方法:以anti-CD29(能识别间充质干细胞)和抗肌凝蛋白轻链抗体(Anti-myosin light chainantibody,AMLCA)(能特异性结合损伤心肌)制备BiAb(CD29×AMLCA)。将此BiAb与雄性小鼠BMSCs经尾静脉输入异丙肾性心肌纤维化雌性小鼠(BMSCs+BiAb组)。另设单纯BMSCs组、单纯BiAb组、正常对照组、未治疗组。5周后处死小鼠,荧光定量PCR检测心肌y染色体鉴别基因(Sex-determiningregion ofY-chromosome,SRY)、基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinas-es-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达。天狼猩红染色比较心脏胶原含量。结果:BMSCs+BiAb组的干细胞归巢数比BMSCs组多(P<0.05)。与未治疗组相比,BMSCs+BiAb组和单纯BMCSs组的心肌MMP-9和TIMP-1表达下调,心脏胶原沉积降低(P<0.05)。与BMSCs组相比,BMSCs+BiAb组的心肌纤维化改善更为明显(P<0.05)。结论:CD29×AMLCA双特异抗体可促进小鼠骨髓间充质干细胞的归巢。BMSCs归巢后能改善缺血心肌MMP-TIMP表达,干预心肌纤维化。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2011年02期）
支黎明,车莹,颜江华,张顺浪,王生育[9]（2010）在《双特异抗体CD3xAFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的杀伤应用》一文中研究指出目的建立双特异抗体anti-CD3xanti-AFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤。方法利用anti-CD3抗体联合细胞因子IL-2活化人外周血淋巴细胞扩增CIK细胞,流式细胞仪分析细胞表型。柠檬酸叁钠还原法制备金溶胶,物理吸附制备载荷anti-CD3和anti-AFP两种单抗的胶体金制剂,光镜检测抗体活性。AlarmaBlue法检测双特异抗体介导CIK细胞对肝癌细胞HepG-2和宫颈癌细胞Hela的杀伤活性。结果 14 d活化后的人外周血淋巴细胞鉴定为CIK细胞。抗体活性检测证实纳米金制剂保持了anti-CD3xanti-AFP的双特异抗体活性,在其介导下,CIK对特异靶细胞HepG-2杀伤效率为42%,提高11.4%(P<0.05),而对非特异靶细胞Hela杀伤无明显变化。结论金标双特异抗体anti-CD3xanti-AFP可以加强CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的杀伤作用。(本文来源于《中国生化药物杂志》期刊2010年05期）
任辉,张研,赵丽纯,房学东[10]（2005）在《基因工程HER2/CD3双特异抗体抑制乳腺癌生长的实验研究》一文中研究指出近年来人们对难治性乳腺癌发生、发展相关生物学因素的认识不断深入。其中癌基因HER2/neu在乳腺癌诊断和免疫治疗中的研究进展最为显着。我们在成功建立BT-474人乳腺癌模型的基础上,探讨了抗HER2×抗CD3双特异抗体(HER2×CD3BsAb)与正常人(本文来源于《中华普通外科杂志》期刊2005年08期）
双特异抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
搜寻合适的治疗靶点被认为是肿瘤免疫治疗开发的前提条件。研究表明,胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor,IGF1R)在肝癌(HCC)细胞中高表达,对促进HCC细胞生长、增殖起关键作用,是一种重要的肝癌标志物。因此,IGF1R成为肝癌治疗的研究热点,已有多个IGF1R单抗药物进入临床开发阶段。然而,单克隆抗体对肿瘤细胞的作用,主要机制是通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC),对肿瘤特别是实体瘤包括肝癌的作用十分有限。双特异抗体是近年来兴起的一种新型肿瘤免疫治疗技术,能桥接肿瘤细胞与T细胞,在肿瘤细胞和T细胞之间形成“免疫突触”,从而高效地介导T细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤。研究表明,双特异抗体介导的肿瘤特异杀伤效率比单抗强万倍以上。此外,双特异性抗体分子量小(仅为单抗1/3),易于渗入肿瘤组织,也有助于提高疗效。因而,双特异抗体具有巨大的应用前景。但双特异性抗体半衰期短,需连续给药,给治疗带来了诸多不便。我们计划用基因载体在长期稳定表达双特异抗体来克服这些问题,具体包括:1)构建基于微环DNA基因载体,表达双特异抗体Anti-IGF1R/CD3;2)开发新型有机-无机基因递送系统stPEI-CaP/MC.DNA。结果表明,stPEI-CaP/MC.DNA能高效转染HEK293t细胞,表达anti-IGF1R/CD3抗体,并且对细胞几乎没有毒性;Anti-IGF1R/CD3双特异抗体能具有介导T细胞靶向、高效清除肝癌细胞。本研究进一步证明,基于微环DNA载体表达双特异抗体的抗癌策略的可行性,并为肝癌的免疫治疗提供一种可供选持的基因药物。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
双特异抗体论文参考文献
[1].高婉莉,杨黎,刘姗,赵智辉.抗CD3×CD87单链双特异抗体介导的单个核细胞对前列腺癌细胞杀伤作用的体外研究[J].南京师大学报(自然科学版).2017
[2].陈平长.微环DNA表达anti-IGF1R/CD3双特异抗体的抗肝癌体外免疫研究[D].中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院).2017
[3].李路军,杨艳群,胡雪平,谢冕,刘梦元.抗TNF-α/抗ED-B双特异抗体的构建与功能分析[J].药学学报.2014
[4].胡雪平,谢冕,李路军,蒋思婧,刘梦元.抗TNF-α/抗ED-B双特异抗体在酵母中的分泌表达与活性分析[J].生物工程学报.2015
[5].王卓智.双特异抗体药物[C].抗体研发与人类健康——2013第五届国际抗体大会论文集.2013
[6].杨彦,陈庆伟,曹光煜,李桂琼.双特异抗体增效内皮祖细胞移植促进心肌血管新生[J].免疫学杂志.2012
[7].杨彦.双特异抗体CD34×AMLCA联合内皮祖细胞移植促进心肌血管新生的实验研究[D].重庆医科大学.2012
[8].邓玮,陈庆伟,李兴升,刘灏,牛司强.双特异抗体增效骨髓间充质干细胞干预心肌纤维化[J].重庆医科大学学报.2011
[9].支黎明,车莹,颜江华,张顺浪,王生育.双特异抗体CD3xAFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的杀伤应用[J].中国生化药物杂志.2010
[10].任辉,张研,赵丽纯,房学东.基因工程HER2/CD3双特异抗体抑制乳腺癌生长的实验研究[J].中华普通外科杂志.2005
论文知识图
