USP18分子通过Ⅰ型干扰素通路影响猪瘟病毒复制的研究

USP18分子通过Ⅰ型干扰素通路影响猪瘟病毒复制的研究

论文摘要

猪瘟病毒(CSFV)感染无特定病原(SPF)猪后,分离猪外周血单个核细胞进行转录组分析,数据显示病毒感染后泛素特异性蛋白酶18(USP18)基因的转录水平明显上升。为研究USP18分子对CSFV复制的影响及其作用机制,本研究通过构建过表达USP18的细胞系及应用特异性小干扰RNA下调表达USP18的方法,采用荧光定量PCR验证USP18对CSFV增殖的影响,结果显示USP18分子能够促进CSFV的复制;通过检测IFN-β、NF-κB及ISRE的启动子活性及I型干扰素(IFN-I)信号通路的下游分子m RNA的转录水平,采用荧光定量PCR和双荧光酶报答试验分析USP18对IFN-I信号通路的影响,结果显示USP18分子抑制IFN-I信号通路。以上结果表明CSFV通过诱导USP18分子的上调表达,抑制了IFN-I途径,从而逃避天然免疫防御,进而促进自身的复制。本研究为明确CSFV与宿主之间的相互作用及CSFV致病机制提供参考依据和奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 引物的设计与合成
  •   1.3 真核表达质粒的构建
  •   1.4 CSFV感染对USP18基因转录影响的检测
  •   1.5 过表达USP18对CSFV复制影响的检测
  •   1.6 下调USP18分子表达后对CSFV复制影响的检测
  •   1.7 USP18分子对I型干扰素信号通路影响的检测
  •   1.8 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 CSFV感染对USP18基因转录的影响
  •   2.2 过表达USP18蛋白对CSFV复制的影响
  •   2.3 下调USP18蛋白的表达对CSFV复制的影响
  •   2.4 猪源USP18分子对I型干扰素信号通路的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王文静,李素,王竞晗,仇华吉,肖书奇

    关键词: 猪瘟病毒,型干扰素,天然免疫

    来源: 中国预防兽医学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 西北农林科技大学动物医学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(31630080,31672537)

    分类号: S852.651

    页码: 455-461

    总页数: 7

    文件大小: 445K

    下载量: 90

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