2种猪冠状病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用

论文摘要

【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RT-PCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验,然后用单项RT-PCR方法和双重RT-PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重RT-PCR检测方法的PEDV与TGEV的检测敏感度分别为59、49copies/μL,该方法对当前常见猪源RNA病毒的检测结果都为阴性。该方法对2013—2016年18个猪场的235份仔猪腹泻样品的检测结果显示,PEDV和TGEV的个体阳性率分别为73.6%和2.1%,与单项RTPCR方法检测结果无显著性（P>0.05）差异,临床样品中PEDV的猪场阳性率与个体阳性率都极显著（P<0.01）高于TGEV。【结论】建立了一种有较高灵敏性与特异性的PEDV与TGEV的双重RT-PCR检测方法,近年来猪传染性腹泻样品中PEDV检出率极显著高于TGEV。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒模板与质粒
•   1.2 引物设计
•   1.3 单项PCR方法条件的筛选
•   1.4 双重PCR方法条件的筛选
•   1.5 双重PCR方法的特异性与敏感性试验
•   1.6 临床样品检测与统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 单项PCR反应条件的优化
•   2.2 双重PCR反应条件的优化
•   2.3 双重PCR方法的特异性与敏感性
•   2.4 临床样品的检测与分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 温海京,贾超伟,刘芊麟,张喜喜,刘鑫宇,周双海

关键词: 猪冠状病毒,猪传染性胃肠炎病毒,猪流行性腹泻病毒,双重

来源: 北京农学院学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 北京农学院动物科学技术学院,门头沟区动物疫病预防控制中心

基金: 北京农学院大学生科研训练项目(2017)

分类号: S852.651

DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2019.0110

页码: 51-55

总页数: 5

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