人凝血因子小基因论文_王刚,姜博文,杨林花,聂欣,贾辰亮

导读:本文包含了人凝血因子小基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:因子,基因,凝血,细胞株,载体,血友病,稳定。

人凝血因子小基因论文文献综述

王刚,姜博文,杨林花,聂欣,贾辰亮[1](2013)在《重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株的构建及意义》一文中研究指出本研究构建重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株并探讨其意义。将人凝血因子Ⅸ(F9)小基因克隆到哺乳动物表达载体pCMV-Tag3B上;利用PCR定点突变技术得到在小基因121位氨基酸位置含有一个提前终止密码子(premature termination codon,PTC)的无义突变体;将构建的F9小基因及其无义突变体分别转染人肝癌细胞HepG2,经G418抗性筛选,单克隆化扩大培养,得到稳定细胞株,分别命名为HepG2-WT和HepG2-N。结果显示:通过酶切鉴定、PCR鉴定及DNA测序分析证明,小基因及其无义突变体表达载体构建成功;通过RT-PCR及基因组PCR均扩增到了大小正确的目的基因片段,证明了含有重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体的稳定细胞株构建成功。结论:本研究成功构建了重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株,该细胞株可用于无义突变导致血友病的治疗药物的筛选和PTC通读药物的筛选等。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2013年02期)

王刚,贾辰亮,姜博文,柴宝峰[2](2011)在《重组人凝血因子Ⅸ小基因及其PTC突变体稳定细胞株的建立》一文中研究指出为了筛选能够用于治疗无义突变导致的血友病的药物,本研究建立了一种含有重组人凝血因子Ⅸ(F9)小基因和一种含有重组人F9小基因无义突变体的稳定细胞株。重组人凝血因子Ⅸ小基因(mini-hF9A)及其无义突变体(mini hF9A-N)稳定细胞株的建立方法是首先构建人凝血因子Ⅸ小(本文来源于《泛环渤海地区九省市生物化学与分子生物学会——2011年学术交流会论文集》期刊2011-08-04)

高啸波,侍鼎,王飞,卢大儒,邱信芳[3](2000)在《微小腺病毒载体介导的人凝血IX因子小基因的离体表达》一文中研究指出将带有内源内含子的人凝血IX因子cDNA(hFIX小基因 )构建到不含腺病毒基因而只带有反向末端重复顺序 (ITR)和包装信号 ψ等顺式元件的微小腺病毒 (mini adenovirus)载体GT2 0 73上 ,得到载体GTi’IX。将该载体与带有lacZ报告基因的微小腺病毒载体 pRP10 0 1分别转移入腺病毒包装细胞 2 93Cre4中 ,随后再转染辅助病毒AdLC8,从而包装出微小腺病毒AdGTi’IX和AdRP10 0 1。经超离心纯化后对两种病毒的检测结果表明 ,病毒颗粒浓度分别为 2 4× 10 12 /ml和 2 2× 10 12 /ml,辅助病毒所占比例均小于 0 8% ;用AdRP10 0 1以感染复数 (MOI)为 5 0的比例转染 3T3细胞 ,X - gal染色后发现细胞蓝染率在 90 %以上 ;用AdGTi’IX以MOI =5 0的比例转染 3T3细胞 ,ELISA结果表明 ,其瞬时表达为 1 4μg/10 6细胞·2 4h。此结果显示出该载体系统在血友病B基因治疗方面有很好的应用前景 ,为进一步的动物试验及免疫原性研究等临床前研究奠定了良好的基础。(本文来源于《病毒学报》期刊2000年04期)

张克忠,包云,卢大儒,薛京伦,邱信芳[4](1997)在《反转录病毒介导的人凝血因子IX小基因在奶山羊乳腺中的分泌表达》一文中研究指出通过受精卵显微注射胚胎移植建立哺乳动物乳腺生产系统是近年来生物工程领域的研究热点,但该工作周期长、成本高、难度和工作量都很大.1994年Johanna等人曾经报道以反转录病毒作载体将hGH(human growth hormone)cDNA导入山羊乳腺组织并获得表达.但是由于病毒LTR控制下的hGH基因的表达在活体动物乳腺组织内受到一定程度的抑制,因此表达水平比较低,持续时间短.我们以微小MCK(Muscle creatine kinase)增强子,β-actin启动子控制hFⅨ(human clotting factorⅨ)小基因(minigene)表达顺序反向插入GINa框架,构建为复制缺陷反转录病毒载体.首次通过反转录病毒直接转染活体奶山羊乳腺小叶和乳腺导管导入的方法建立了hFⅨ蛋白的乳腺表达系统.hFⅨ蛋白在羊奶中的最高表达量为47.9ng/mL乳汁,其中1头奶山羊2个月后表达量仍维持在12ng/mL乳汁.Western blot和活性检(本文来源于《科学通报》期刊1997年12期)

人凝血因子小基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了筛选能够用于治疗无义突变导致的血友病的药物,本研究建立了一种含有重组人凝血因子Ⅸ(F9)小基因和一种含有重组人F9小基因无义突变体的稳定细胞株。重组人凝血因子Ⅸ小基因(mini-hF9A)及其无义突变体(mini hF9A-N)稳定细胞株的建立方法是首先构建人凝血因子Ⅸ小

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

人凝血因子小基因论文参考文献

[1].王刚,姜博文,杨林花,聂欣,贾辰亮.重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株的构建及意义[J].中国实验血液学杂志.2013

[2].王刚,贾辰亮,姜博文,柴宝峰.重组人凝血因子Ⅸ小基因及其PTC突变体稳定细胞株的建立[C].泛环渤海地区九省市生物化学与分子生物学会——2011年学术交流会论文集.2011

[3].高啸波,侍鼎,王飞,卢大儒,邱信芳.微小腺病毒载体介导的人凝血IX因子小基因的离体表达[J].病毒学报.2000

[4].张克忠,包云,卢大儒,薛京伦,邱信芳.反转录病毒介导的人凝血因子IX小基因在奶山羊乳腺中的分泌表达[J].科学通报.1997

论文知识图

细胞转染筛选后形成的克隆(A)(B)所示。提取稳定细胞株totalRNA,反转录...);同时提取稳定细胞株基因组DNA,PCR鉴...

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