D6-Cre、Emx1-Cre、hGFAP-Cre三种大脑皮层发育相关工具鼠表达特征的比较研究

论文摘要

大脑皮层内部区域组织高度专业化,是哺乳动物中枢神经系统的重要组成部分。大脑皮层的生成过程具有时序性和时空特异性。大脑皮层中各层神经元可以投射到不同的区域,发挥不同的功能,以维持神经系统正常的功能。如果产生的神经元类型及其分布发生异常,则会导致众多临床上的疾病,如自闭症,精神分裂症,癫痫等。所以研究大脑皮层发育过程中神经元精确有序的生成和定位具有重要意义。在实验室前期工作中,通过原位杂交技术发现D6-Cre和hGFAP-Cre介导的Dicer条件性敲除小鼠端脑中均出现了由Dicer敲除导致的microRNA缺失,但是不同Cre介导的条件性敲除小鼠也出现了不同的表型。为了探索其表型差异的原因,我们进行了在研究大脑皮层方面应用较多的三种Cre工具鼠D6-Cre、Emx1-Cre、hGFAP-Cre表达特征的比较。在本研究中发现,Emx1-Cre、D6-Cre、hGFAP-Cre工具鼠Cre重组酶在大脑皮层中的起始表达时间分别为胚胎期第9.5天（即E9.5）、E10.5以后（约为E11）和E12.5。随着发育的进行,D6-Cre重组酶的表达始终局限于端脑,而Emx1-Cre和hGFAP-Cre的表达范围在不断扩大。同时,在利用不同Cre工具鼠条件性敲除Dicer时均出现了神经元放射状迁移异常的现象。前期工作提示miR-129可能与大脑皮层神经元迁移有关。因此我们通过鼠胚电转将miR-129过表达后,发现大脑皮层中神经元迁移过程受到抑制。而过表达Fmr1后,可以促进大脑皮层中神经元的迁移,且不影响神经元命运决定。在鼠脑中同时过表达miR-129和Fmr1能够部分缓解由过表达miR-129引起的神经元迁移抑制现象。综上所述,我们发现D6-Cre、Emx1-Cre、hGFAP-Cre三种工具鼠具有不同的表达模式,且与文献报道略有不同;在microRNA调控大脑皮层神经元迁移方面,发现miR-129可以靶向Fmr1基因,进而调控大脑皮层神经元迁移过程。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
•   1.Cre/loxP系统在转基因小鼠中的应用
•   2.大脑皮层发育相关Cre工具鼠的种类和表达情况
•   3.Cre工具鼠重组酶的表达检测方法
•   4.MicroRNA在大脑皮层发育过程中的作用
•   5.不同Cre工具鼠介导的Dicer条件性敲除小鼠表型不同
•   6.本研究的目的、方法及意义
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
•   1.D6-Cre工具鼠Cre重组酶的时空表达情况
•   2.D6-Cre工具鼠Cre重组酶表达存在个体差异
•   3.Emx1-Cre工具鼠Cre重组酶的时空表达情况
•   4.hGFAP-Cre工具鼠Cre重组酶的时空表达况
•   5.不同Cre工具鼠条敲Dicer出现表型存在差异
•   6.过表达miR-129抑制神经元迁移
•   7.miR-129靶基因鉴定
•   8.Fmr1调控大脑皮层神经元迁移
•   9.miR-129靶向Fmr1调控大脑皮层神经元迁移
• 讨论
•   1.三种Cre工具鼠Cre重组酶表达模式不同
•   2.构建的Cre工具鼠本身可能会存在效率问题
•   3.MiR-129靶向Fmr1调控大脑皮层神经元迁移过程
• 总结
• 不足与展望
• 文献综述 大脑皮层发育常用Cre工具鼠研究进展
• 参考文献
• 个人简历
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 张小灵

导师: 彭小忠

关键词: 工具鼠,大脑皮层,神经元迁移

来源: 北京协和医学院

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 北京协和医学院

分类号: Q42

DOI: 10.27648/d.cnki.gzxhu.2019.000709

总页数: 65

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