固定化柚皮苷酶解转化制备普鲁宁

固定化柚皮苷酶解转化制备普鲁宁

论文摘要

选择D101-1大孔吸附树脂固定化反应底物柚皮苷,考察α-L-鼠李糖苷酶水解柚皮苷转化普鲁宁的工艺条件,结果表明,其最适条件为:α-L-鼠李糖苷酶用量30 U/mL,最适酶反应温度60℃,pH=4.0,底物质量浓度2.4 g/L,振荡速率80 r/min。在此条件下酶解反应420 min,柚皮苷转化率达到78%。此外,研究发现,高浓度的Mn2+、Fe2+对酶解反应有极强的促进作用。Lineweaver-Burk双倒数拟合曲线的Km=5.12 g/L,Vmax=0.013 g/(L·min)。利用薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)对酶解产物进行分析,并验证得出,反应完全后可得到纯的反应产物普鲁宁。

论文目录

  • 0 引言
  • 1 材料与方法
  •   1.1 重组α-L-鼠李糖苷酶的制备
  •   1.2 α-L-鼠李糖苷酶活力的测定
  •   1.3 大孔吸附树脂的预处理
  •   1.4 柚皮苷的固定化
  •   1.5 柚皮苷吸附量的测定
  •   1.6 α-L-鼠李糖苷酶催化固定化柚皮苷水解过程分析
  •   1.7 柚皮苷转化率的计算
  •   1.8 α-L-鼠李糖苷酶水解固定柚皮苷的动力学分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 固定化柚皮苷树脂载体的选择
  •   2.2 α-L-鼠李糖苷酶催化固定化柚皮苷水解过程分析
  •   2.3 最优工艺验证和1 L放大试验
  •   2.4 酶解反应动力学
  •   2.5 TLC和HPLC法分析反应产物
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 焦超,李婧雅,李利君,杨秋明,翁惠芬,肖安风

    关键词: 普鲁宁,底物固定化,柚皮苷,酶法转化

    来源: 集美大学学报(自然科学版) 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工

    单位: 集美大学食品与生物工程学院,福建省食品微生物与酶工程重点实验室,福建省海洋功能食品工程技术研究中心

    基金: 福建省科技计划项目(2016N0021)

    分类号: TQ28

    DOI: 10.19715/j.jmuzr.2019.02.04

    页码: 110-117

    总页数: 8

    文件大小: 5064K

    下载量: 111

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