导读:本文包含了大鼠单克隆抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:层析,单克隆抗体,偏振,心律失常,蛋白,亲和,荧光。
大鼠单克隆抗体论文文献综述
周竞奇[1]（2019）在《Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响》一文中研究指出目的:研究Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响。方法:将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组12只;假手术组只行颅骨开窗手术,其余各组均建立胶质细胞瘤模型。模型组腹腔注射0.9%氯化钠,治疗组腹腔注射NRP-1 MAb,均每日1次。干预14天后取材。对肿瘤组织称重,免疫组化检测Bax和Bcl-2表达,Western blot检测NRP-1蛋白、Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达量,qPCR检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达情况,TUNEL检测细胞凋亡情况。结果:假手术组无肿瘤,治疗组肿瘤组织重量显着小于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示:与假手术组比较,模型组和治疗组Bax表达显着下降,Bcl-2表达显着上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组Bax表达上升,Bcl-2表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组NRP-1蛋白和Bcl-2蛋白表达量显着上升,Bax蛋白表达量显着下降,差异具有统计学意义(P<0. 05);与模型组比较,治疗组NRP-1蛋白和Bcl-2蛋白表达量显着下降,Bax蛋白表达量显着上升,差异具有统计学意义(P <0. 05)。q PCR检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组Bax mRNA表达显着下降,Bcl-2 mRNA表达显着上升,差异具有统计学意义(P <0. 05);与模型组比较,治疗组Bax mRNA表达上升,Bcl-2 mRNA表达下降,差异具有统计学意义(P <0. 05)。TUNEL检测显示:与假手术组比较,模型组和治疗组的细胞凋亡率显着上升,差异具有统计学意义(P <0. 05);与模型组比较,治疗组的细胞凋亡率显着下降,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:NRP-1 MAb可通过抑制NRP-1表达而上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达促进胶质细胞瘤凋亡。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年19期）
牛夏忆,李淼,张倩,陈云雨,刘晓平[2]（2019）在《大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出目的:原核表达和分离纯化人β-catenin(138-781 aa)蛋白并制备特异性大鼠抗人β-catenin多克隆抗体。方法:利用PCR扩增β-catenin基因片段并克隆至pET-30a(+)表达载体构建重组质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)中,经原核表达优化后,诱导β-catenin蛋白表达,以SDS-PAGE和Western blot实验进行鉴定。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin蛋白,以荧光偏振实验进行生物学活性鉴定。用β-catenin蛋白为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体,随后采用ELISA和Western blot实验检测多克隆抗体的效价和抗原特异性。结果:成功进行了β-catenin蛋白的原核表达与分离纯化。荧光偏振实验表明纯化的β-catenin蛋白具有良好的生物学活性。ELISA实验表明抗人β-catenin多克隆抗体效价可达1∶128 000。Western blot实验证实抗人β-catenin多克隆抗体具有良好的抗原特异性。结论:成功进行了大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定,为深入研究β-catenin的生物学功能奠定了实验基础。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年16期）
王晓芳,陈江曼,陶晓莉,窦丽丽,佟伟[3]（2019）在《纳尔逊海湾病毒S3蛋白纯化及大鼠多克隆抗体制备》一文中研究指出目的制备纳尔逊海湾病毒(NBV)S3多克隆抗体。方法首先将构建好的Pris His MB-S3重组基因质粒,转化到大肠杆菌(E.coil)BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。镍柱亲和层析法纯化目的蛋白以获得大量融合重组蛋白,以此为抗原免疫大鼠制备抗S3多克隆抗体并进行鉴定。结果 Pris His MB-S3蛋白的相对分子质量(M_r)约39 000,以包涵体形式存在,通过免疫大鼠成功制备出NBV S3多克隆抗体。间接ELISA测定抗体效价达1∶64 000。间接免疫荧光实验证明S3蛋白成功在细胞内表达并以颗粒状分布在细胞质内。结论成功获得高反应性和高特异性的S3蛋白多克隆抗体。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年05期）
谈悦,徐正中,朱兆成,夏爱鸿,孙林[4]（2019）在《牛肿瘤坏死因子α小鼠单克隆抗体的制备》一文中研究指出目的制备抗牛肿瘤坏死因子α(BoTNF-α)的单克隆抗体(mAb)。方法以原核系统表达的带有组蛋白(His)标签的重组牛TNF-α蛋白(rHis-BoTNF-α)为免疫原,带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)标签的重组牛TNF-α蛋白(rGST-BoTNF-α)为检测原,采用杂交瘤细胞技术制备mAb。Western blot法检测mAb与rHis-BoTNF-α和rGST-BoTNF-α的反应性,间接ELISA检测mAb效价、特异性以及mAb与商品化重组BoTNF-α的反应性,流式细胞术分析mAb识别天然抗原的活性。结果成功筛选出7株稳定分泌抗rBoTNF-αmAb的杂交瘤细胞株。结果证明7株mAb均具有良好的反应性及特异性。流式细胞术分析显示mAb 4G4具有良好的识别天然抗原的活性。结论成功制备了抗BoTNF-α的mAb。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年03期）
杜方原,冯春燕,王彩霞,仇松寅,张永宁[5]（2018）在《抗非洲马瘟VP7蛋白的小鼠单克隆抗体制备及其鉴定》一文中研究指出目的制备抗非洲马瘟病毒(AHSV)蛋白VP7的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定及分析。方法本研究以杆状病毒表达的VP7蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备mAb,通过ELISA、间接免疫荧光法(IFA)及阻断AHSV阳性血清等实验检测mAb的效果,利用mAb亚型分类鉴定试剂盒检测这四株mAb的亚型。结果筛选出20A8、28B3、30G8、47E6四株mAb,其中47E6阻断效果最好。结论成功制备了抗VP7蛋白的mAb。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年12期）
陈云雨,牛夏忆,林媛,刘晓平[6]（2018）在《大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A(Ec-ZipA)原核表达、纯化与大鼠多克隆抗体的制备》一文中研究指出目的制备大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A(Ec-ZipA)第185至328位氨基酸功能蛋白及其特异性大鼠多克隆抗体。方法以基因合成法合成Ec-ZipA第185至328位氨基酸功能蛋白的基因序列,利用DNA重组技术与p ET-30a(+)载体连接构建重组质粒。将重组质粒转化到E. coli BL21(DE3)中进行Ec-Zip A原核表达与表达优化。采用亲和层析方法分离纯化Ec-Zip A后,以荧光偏振(FP)实验进行生物学活性鉴定。以重组Ec-Zip A为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体,采用ELISA和Western blot法检测抗体滴度和抗原特异性。结果 SDS-PAGE分析和Western blot实验证实大肠杆菌成功表达Ec-Zip A蛋白。FP实验表明纯化的Ec-Zip A具有良好的生物学活性。ELISA结果表明多克隆抗体具有较高的抗体滴度,效价可达1∶512 000。Western blot实验证实多克隆抗体具有良好的抗原特异性。结论成功进行了Ec-Zip A原核表达、分离纯化并制备了大鼠抗Ec-Zip A多克隆抗体。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年10期）
薛晓艳,王苗苗,王晓露,杨明珠,吴博威[7]（2018）在《钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素诱发成年大鼠心律失常的抑制作用》一文中研究指出目的观察钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发大鼠心律失常的影响,并探讨其电生理机制。方法利用ISO建立大鼠离体和在体心律失常模型,观察NCX-2D2抗体对心律失常的影响;通过全细胞膜片钳技术,观察NCX-2D2抗体对大鼠心室肌细胞I_(Na/Ca)、I_(Ca-L)和DADs的作用。结果 10 mg·L~(-1) 2D2抗体可明显抑制ISO诱发大鼠离体心脏心律失常的发生(P<0.01);80μg·kg~(-1) 2D2抗体可明显抑制ISO诱发麻醉大鼠心律失常的发生(P<0.01);5 mg·L~(-1) 2D2抗体可部分抑制ISO对大鼠心室肌细胞I_(Na/Ca)的增大作用(P<0.01),以及对I_(Ca-L)的增大效应(P<0.01),并可有效抑制ISO诱发大鼠心室肌细胞DADs的发生(P<0.05)。结论钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2可明显抑制异丙肾上腺素诱发的大鼠室性心律失常,其抗心律失常机制与抑制心肌细胞钠-钙交换体和L-型钙通道,从而减轻钙超载和抑制延迟后除极有关。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2018年09期）
薛晓艳[8]（2018）在《钠—钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素诱发成年大鼠心律失常的抑制作用及其机制研究》一文中研究指出目的:1.建立异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发成年大鼠离体和在体心律失常模型,观察钠-钙交换体抗体NCX-2D2对模型大鼠心律失常的影响。2.应用全细胞膜片钳技术,观察钠-钙交换体抗体NCX-2D2对单个大鼠心室肌细胞钠-钙交换电流(INa/Ca)、L-型钙电流(ICa-L)、延迟后除极(DADs)的影响,并分析其电生理机制。方法:1.异丙肾上腺素诱发大鼠离体和在体心脏心律失常模型的建立(1)异丙肾上腺素诱发大鼠离体心脏心律失常模型的建立随机选取健康SD大鼠,用1%戊巴比妥钠按40 mg·kg-1行腹腔注射麻醉后,开胸迅速取出心脏,游离后悬挂于Langendorff灌流装置上,用纯氧饱和的恒温(37℃)高钙台氏液经主动脉逆行灌流心脏,利用蠕动泵将流速控制在8 ml·min-1进行恒流灌流,记录体表心电图。灌流30 min以上待波形稳定后使用注射泵给药,记录药物干预后30 min内室性早搏个数,室性心动过速的发生率、持续时间,心室颤动的发生率、持续时间。实验分组如下:1)对照组:含2.5 mmol·L-1 Ca Cl2台氏液灌流;2)2D2抗体组:NCX-2D2抗体(10μg·ml-1)和Ca Cl2(2.5 mmol·L-1)的台氏液灌流;3)ISO组:ISO(1μmol·L-1)和Ca Cl2(2.5 mmol·L-1)的台氏液灌流;4)2D2抗体+ISO组:NCX-2D2抗体(10μg·ml-1)、ISO(1μmol·L-1)和Ca Cl2(2.5 mmol·L-1)的台氏液灌流。(2)异丙肾上腺素诱发麻醉大鼠心律失常模型的建立随机选取健康SD大鼠,1%戊巴比妥钠40 mg·kg-1行腹腔注射麻醉后,将大鼠仰卧位固定于鼠板上。采用BL-420F实验系统记录大鼠标准肢体Ⅱ导联心电图,观察30 min以上待心电图稳定后通过尾静脉给药。观察不同组别大鼠体表心电图,记录药物干预后1 h内室性早搏个数,室性心动过速的发生率、持续时间,心室颤动的发生率、持续时间。实验分组如下:1)对照组:生理盐水(1 ml NS)尾静脉注射;2)2D2抗体组:NCX-2D2抗体(80μg·kg-1)溶于1 ml NS中尾静脉注射;3)ISO组:ISO(1.28 mg·kg-1)溶于1 ml NS中尾静脉注射;4)2D2抗体+ISO组:NCX-2D2抗体(80μg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射,5 min后ISO(1.28 mg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射;5)胺碘酮+ISO组:胺碘酮(5 mg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射,5 min后ISO(1.28 mg·kg-1)溶于0.5 ml NS中尾静脉注射。2.单个大鼠心室肌细胞的分离随机选取健康SD大鼠,用1%戊巴比妥钠按40 mg·kg-1行腹腔注射麻醉后,断头颈动脉放血,开胸后迅速取出心脏,置于经纯氧饱和的4℃无钙台氏液中修剪去除多余组织,经主动脉逆行插管悬挂于Langendorff灌流装置。以无钙台氏液灌流心脏8~10 min后,用酶液循环灌流15~20 min,待心脏酶解后,在KB液中将左心室肌组织剪碎,用吸管吹打3~5 min后经滤网过滤(100目孔径)获得单个心室肌细胞,置于KB液中保存稳定后进行实验。3.全细胞膜片钳记录用吸管吸取1~2滴细胞悬液置于倒置显微镜的细胞槽内(约1 ml),贴壁3~5min,再用含1.8mmol·L-1 Ca Cl2台氏液复钙灌流(流速2 ml·min-1)。玻璃电极用电极拉制仪拉制并充灌记录相应电流的电极内液,电极电阻控制在3~5 MΩ。镜下挑选纹理清晰、无自主收缩的长杆状细胞为实验对象,用玻璃电极给予负压封接待稳定后,施以瞬间负压破膜,在进行膜电容补偿和串联电阻补偿后行全细胞记录,电压钳模式记录单个大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流(INa/Ca),L-型钙电流(ICa-L);电流钳模式记录单个大鼠心室肌细胞动作电位(AP),施加条件刺激(15 ms 3Hz)诱发延迟后除极(DADs)。用Clampex10.3软件进行数据采集及分析。结果:1.单克隆抗体NCX-2D2可显着抑制异丙肾上腺素诱发的大鼠离体心脏心律失常的发生NCX-2D2抗体(10μg·ml-1)可显着抑制异丙肾上腺素诱发的大鼠离体心脏心律失常的发生。在离体大鼠心脏异丙肾上腺素组,室性心动过速发生率为100%,心室颤动发生率为57.14%;给予NCX-2D2(10μg·ml-1)抗体干预后30 min内,室性早搏个数由328±22减少至104±9(P<0.01);室性心动过速发生率降至42.8%,持续时间显着缩短,由(187.81±23.14)s缩短至(11.29±15.84)s(P<0.01);心室颤动完全消失。2.单克隆抗体NCX-2D2可显着抑制异丙肾上腺素诱发的麻醉大鼠心律失常的发生NCX-2D2抗体(80μg·kg-1)可显着抑制异丙肾上腺素诱发的麻醉大鼠心律失常的发生。结果表明,异丙肾上腺素组100%大鼠发生室性心动过速,57.14%大鼠出现心室颤动;当提前5 min给予80μg·kg-1的NCX-2D2抗体干预后,在观察期(1h)内室性早搏个数由774±31减少至168±33(P<0.01);室性心动过速发生率降低至42.8%,持续时间明显减少,由(40.73±3.06)min缩短至(0.90±1.13)min(P<0.01);心室颤动完全消失。经比较发现,80μg·kg-1的NCX-2D2抗体抑制麻醉大鼠异丙肾上腺素性室性心律失常的作用与胺碘酮相似,在抑制室性早搏方面甚至略优于胺碘酮。3.单克隆抗体NCX-2D2可部分抑制异丙肾上腺素对单个大鼠心室肌细胞钠-钙交换电流(INa/Ca)的增大作用钳制电位+50 m V和-100 m V时,异丙肾上腺素组心肌细胞INa/Ca外向和内向电流分别为8.71±0.12和-7.59±0.11(p A/p F),显着大于对照组外向(3.95±0.16)和内向电流(-3.85±0.12)(p A/p F,P<0.01)。异丙肾上腺素存在的情况下给予5μg·ml-1的NCX-2D2抗体后,INa/Ca的外向(+50 m V)和内向(-100 m V)电流分别降低至6.31±0.12和-6.11±0.10(p A/p F),与异丙肾上腺素组相比明显降低(P<0.01),但并未完全恢复至正常对照组水平。4.单克隆抗体NCX-2D2可部分抑制异丙肾上腺素对单个大鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的增大作用研究结果表明,异丙肾上腺素组心肌细胞ICa-L为-6.75±0.22(p A/p F),与对照组-4.33±0.20(p A/p F)相比明显增大(P<0.01)。应用5μg·ml-1的NCX-2D2抗体后,ICa-L降低至-5.50±0.20(p A/p F),与异丙肾上腺素组相比明显降低(P<0.01),但并未完全恢复至正常对照组水平。5.单克隆抗体NCX-2D2可有效抑制异丙肾上腺素诱发的单个大鼠心室肌细胞延迟后除极的发生研究结果表明,在异丙肾上腺素组,单个大鼠心室肌细胞DADs的发生率是85.71%,给予5μg·ml-1的NCX-2D2抗体后,单个大鼠心室肌细胞DADs发生率降低为14.29%。与异丙肾上腺素组相比,抗体干预组(异丙肾上腺素合并2D2抗体组)单个大鼠心室肌细胞DADs发生率明显降低(P<0.05)。结论:钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2可显着抑制异丙肾上腺素诱发大鼠室性心律失常的发生,其抗心律失常机制与抑制心肌细胞钠-钙交换体和L-型钙通道从而减轻胞内钙超载和抑制延迟后除极有关。(本文来源于《山西医科大学》期刊2018-06-02）
罗军超[9]（2018）在《负载CD80单克隆抗体微溶胶静电纺丝支架的构建及其促进大鼠半横断脊髓损伤修复的研究》一文中研究指出目的:通过微溶胶电纺技术将生物材料负载免疫分子,营造一个促进急性脊髓损伤(SCI)修复的局部微环境,该环境既能控制SCI继发炎症,同时又有桥连损伤神经的生物材料,协同促进SCI修复。方法:1.用微溶胶静电纺丝技术制备负载CD80mAb的左旋聚乳酸(PLLA)静电纺丝纤维支架后:(1)比较PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb叁组支架的理化性能及生物相容性:使用透射电镜(TEM)检测纤维支架的内部结构,使用扫描电子显微镜(SEM)检测纤维支架的形貌特征,使用力学拉伸测试纤维支架的应变力。(2)检测CD80mAb在PLLA支架的负载情况,以及释放效率。(3)CCK-8法比较PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb纤维支架浸出液对细胞增殖的影响,检测纤维的生物相容性。2.建立SD大鼠胸椎第9节段(T9)右侧脊髓半横断损伤模型:34只健康雄性6周龄SD大鼠G根据手术情况随机分为4组:1,假手术组(n=7);2,SCI组(n=10);3,PLLA移植组(n=7);4,PLLA-CD80mAb移植组(n=10)后:(1)在术后8周内统计大鼠死亡率,每周进行一次BBB评分评价神经功能恢复情况。(2)术后8周行组织学检查及免疫组化:抗胶质纤维酸性蛋白(anti-GFAP)、抗神经丝蛋白200(anti-NF-200)、抗诱导型一氧化氮合酶(anti-i NOS)、抗白介素1β(anti-IL-1β)、抗白介素6(anti-IL-6)等检查。结果:(1)PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb之间的形貌基本一致,直径变化不明显,透射电镜示负载抗体后有明显的核壳结构,力学拉伸实验证明负载抗体前后,不改变纤维支架的力学性能。(2)通过荧光染色技术,验证PLLA成功的负载CD80mAb,释放曲线表明PLLA-CD80mAb可以有效的缓慢释放CD80mAb。(3)CCK-8法显示PLLA,PLLA-IgG,PLLA-CD80mAb各组之间增殖无统计学差异,显示良好的生物相容性。(4)4只老鼠因不完全半横断而被淘汰(SCI组2,PLLA组1只,PLLA-CD80mAb组1只),最后留30只老鼠。左下肢术后PLLA-CD80mAb组第2和3周的评分明显高于SCI组,右下肢术后PLLA-CD80mAb组BBB评分略高于PLLA-IgG组,明显高于SCI组,PLLA-CD80mAb组的生存率高于PLLA-IgG组,远高于SCI组。(5)免疫组化显示:PLLA-CD80mAb组的GFAP表达要明显少于SCI组和PLLA-IgG组,而其NF-200表达则明显高于SCI组。PLLA-IgG组的NF-200表达要高于SCI组。同时SCI组的IL-1β,IL-6,i NOS的表达均明显高于PLLA-CD80mAb组,PLLA-IgG组的IL-1β,IL-6,i NOS的表达也高于PLLA-CD80mAb组。结论:通过微溶胶法实现静电纺丝纤维负载CD80mAb的方法,获得具有生物学活性的免疫调节功能支架,并可通过抑制炎症因子,调节脊髓损伤后的局部炎症环境,协同纤维支架的物理桥梁作用共同促进脊髓损伤的恢复。(本文来源于《苏州大学》期刊2018-05-01）
范从红,李根,廖晓燕,辜定钎,曹丽丽[10]（2017）在《二甲双胍对多囊卵巢综合征大鼠排卵及卵巢颗粒细胞中B淋巴细胞瘤-2和兔抗人单克隆抗体表达的影响》一文中研究指出目的探究二甲双胍(MET)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠排卵及卵巢颗粒细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和兔抗人单克隆抗体(Bax)表达的影响。方法用来曲唑(LTZ)皮下埋植方法诱导PCOS。称量大鼠体质量和卵巢质量,HE染色卵巢并在显微镜下进行形态学观察。采用放射免疫法(RIA)方法检测血清中促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、孕酮(P)和睾酮(T)含量水平。最后用实时聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(western blotting)分别检测颗粒细胞中Bcl-2和Bax基因、蛋白的表达。结果 PCOS SD雌性大鼠出现体质量增长减慢、卵巢组织质量增加、血清中LH和T含量水平增加、E_2和P含量水平下降,差异有统计学意义(F=71.457、54.052、24.341、162.981、62.593、172.848,均P<0.05),具有PCOS典型症状。然而PCOS+MET组大鼠的上述症状均较PCOS组大鼠明显缓解。PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中Bcl-2的表达下降,Bax的表达上升,差异有统计学意义(F=15.179、13.375,均P<0.05);MET上调PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中Bcl-2的表达,下调Bax的表达。结论 MET通过增加PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中Bcl-2的表达和降低Bax的表达,抑制颗粒细胞的凋亡,从而促进PCOS大鼠的排卵作用。(本文来源于《中国妇幼保健》期刊2017年24期）
大鼠单克隆抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:原核表达和分离纯化人β-catenin(138-781 aa)蛋白并制备特异性大鼠抗人β-catenin多克隆抗体。方法:利用PCR扩增β-catenin基因片段并克隆至pET-30a(+)表达载体构建重组质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)中,经原核表达优化后,诱导β-catenin蛋白表达,以SDS-PAGE和Western blot实验进行鉴定。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin蛋白,以荧光偏振实验进行生物学活性鉴定。用β-catenin蛋白为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体,随后采用ELISA和Western blot实验检测多克隆抗体的效价和抗原特异性。结果:成功进行了β-catenin蛋白的原核表达与分离纯化。荧光偏振实验表明纯化的β-catenin蛋白具有良好的生物学活性。ELISA实验表明抗人β-catenin多克隆抗体效价可达1∶128 000。Western blot实验证实抗人β-catenin多克隆抗体具有良好的抗原特异性。结论:成功进行了大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定,为深入研究β-catenin的生物学功能奠定了实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
大鼠单克隆抗体论文参考文献
[1].周竞奇.Neuropilin1单克隆抗体对胶质瘤大鼠Bcl-2/Bax表达的影响[J].现代肿瘤医学.2019
[2].牛夏忆,李淼,张倩,陈云雨,刘晓平.大鼠抗人β-catenin多克隆抗体的制备与鉴定[J].中国免疫学杂志.2019
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[5].杜方原,冯春燕,王彩霞,仇松寅,张永宁.抗非洲马瘟VP7蛋白的小鼠单克隆抗体制备及其鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志.2018
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