靶向两亲性多肽P23包载阿霉素及其体外释药动力学研究

论文摘要

21世纪,癌症已严重威胁人类的健康。大部分抗癌药物的溶解性差,体内循环时间短,无靶向识别能力,且会对人体器官造成严重伤害,为降低抗癌药对人体的毒副作用,两亲性多肽作为药物运输载体,已成为一大研究热点。两亲性多肽具有良好的生物活性,且可以在生物体内降解,不会发生生物免疫反应。两亲性多肽在水溶液或者有机溶剂中可自组装形成纳米微球、纳米纤维及纳米管等,因而可作为抗癌药物运输载体,可提高疏水性药物的溶解度和利用率,减少药物对人体的毒副作用;具有靶向序列的多肽还可提高抗癌药的靶向性,增加药物在体内循环的时间。因此,两亲性多肽有望作为药物载体用于癌症治疗,且在生物医药领域具有广阔前景。本论 文 自 主 设计 并合成 两 亲 性 多 肽DGRKKKKAAVALLPAVLLALLAP（P23）,P23与阿霉素（DOX）相互作用并采用正向透析法制得P23载药胶束（P23@DOX）。通过液质联用仪、红外光谱分析仪、透射电镜和纳米粒度分析仪对材料进行表征;通过酸碱滴定实验,考察材料的pH缓释能力;通过体外细胞实验,研究材料对细胞的毒性以及对肿瘤细胞的靶向作用;通过体外模拟药物释放实验,研究材料对药物的包载能力和释放特性;通过5种动力学方程模拟体外释放行为,确定最佳拟合模型。具体研究结果包括以下三个部分:（1）质谱表征结果与P23理论分子量一致,红外光谱表征结果与P23特征官能团一致。优化了P23自组装形成胶束的条件,最佳条件为pH 7.4、浓度为0.1 mg·mL-1。酸碱滴定实验中,pH 5.3～7.4时,缓冲能力为18.96%,说明P23在酸性条件下具有pH缓释能力,可延长DOX体内停留时间。（2）P23胶束的CMC为1.018 mg·L-1,P23@DOX平均粒径为93 nm,载药量和包封率分别是22.65%和35.1%。P23对HUVEC细胞和4T1细胞均呈低毒性,浓度为0～200 0μg·mL-1时,对HUVEC细胞存活率始终保持在85%以上。浓度为200μg·mL-1时,DOX和P23@DOX对4T1细胞的抑制率为58.9%和84.6%,说明P23@DOX比DOX对4T1细胞抑制作用强。细胞摄取实验中,P23@DOX在肿瘤细胞内富集,说明P23@DOX可以靶向将药物传递到肿瘤细胞。（3）体外释药实验说明P23@DOX在pH 1.2的释放率最高,为84.6%。利用5种方程对释放结果进行模拟,Weibull方程对体外释药模拟的拟合度最高,拟合方程为Q=78.47009（1-e-（0.06166（t+10.56962）^3.28518））。在pH 4.6和6.8的释放率分别为55.10%和36.19%,拟合方程分别为Q=53.952（1-e-（0 10778（t+3.69179）^1.51503））和Q=29.83676（1-e-（0.14539（t+3.05137）^1.93247））。综上所述,本文制备了一种药物运输载体（P23@DOX）,该药物载体可以在酸性条件下释放药物,可靶向识别4T1细胞,有效抑制4T1细胞增殖且对正常细胞毒副作用小,因此有望被应用于癌症治疗中。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
•   1.1 引言
•   1.2 药物载体的种类及应用
•     1.2.1 脂质体
•     1.2.2 磁性微球
•     1.2.3 聚合物胶束
•   1.3 两亲性多肽自组装
•   1.4 选题意义及研究内容
• 第2章 靶向两亲性多肽P23的合成及其自组装特性
•   2.1 引言
•   2.2 实验部分
•     2.2.1 实验试剂
•     2.2.2 实验仪器
•     2.2.3 P23的合成及表征
•     2.2.4 P23的pH缓释能力
•     2.2.5 P23自组装特性
•   2.3 结果与讨论
•     2.3.1 P23高效液相色谱、质谱和红外光谱分析
•     2.3.2 P23的pH缓释能力
•     2.3.3 浓度对P23自组装影响
•     2.3.4 pH对P23自组装影响
•   2.4 本章小结
• 第3章 靶向两亲性多肽P23包载DOX及体外毒性实验
•   3.1 引言
•   3.2 实验部分
•     3.2.1 实验试剂
•     3.2.2 实验仪器
•     3.2.3 P23肽CMC测定
•     3.2.4 DOX标准曲线测定
•     3.2.5 P23药物包载实验
•     3.2.6 CCK-8溶液的配制
•     3.2.7 P23体外细胞毒性测试
•     3.2.8 细胞摄取实验
•   3.3 结果与讨论
•     3.3.1 P23 CMC的测定
•     3.3.2 DOX标准曲线测定
•     3.3.3 P23药物包载及表征
•     3.3.4 P23体外细胞毒性测试
•     3.3.5 细胞摄取实验结果
•   3.4 本章小结
• 第4章 P23@DOX体外释药动力学研究
•   4.1 引言
•   4.2 实验部分
•     4.2.1 实验试剂
•     4.2.2 实验仪器
•     4.2.3 P23体外释药实验
•     4.2.4 体外释药动力学研究
•   4.3 结果与讨论
•     4.3.1 体外释药实验
•     4.3.2 体外释药动力学研究
•   4.4 本章小结
• 第五章 结论与展望
•   5.1 结论
•   5.2 展望
• 致谢
• 参考文献

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 晋珍珍

导师: 葛飞,张旭光

关键词: 两亲性多肽,自组装,药物载体,靶向性,阿霉素

来源: 安徽工程大学

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 有机化工,药学

单位: 安徽工程大学

分类号: R943

总页数: 55

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