广西红壤土壤微生物溶磷基因的克隆与表达

论文摘要

本研究对广西红壤土壤微生物溶磷基因进行克隆,并在大肠杆菌中诱导表达。从广西红壤中提取宏基因组DNA,克隆了GabY基因,构建大肠杆菌原核表达载体p ETDuet-1,转化大肠杆菌DH5α得到重组工程菌。通过酶切验证重组体。重组体在诱导条件下24 h对难溶矿物质磷Ca3（PO4）2的溶磷量为（40.73±1.32）μg/mL,而对照组仅为（5.11±0.08）μg/mL。重组体和对照随着诱导时间的增加,培养基pH值均有下降趋势,但重组体培养基pH值变化显著大于对照组,产酸能力显著优于对照组。证明成功克隆得到土壤微生物溶磷基因,并在大肠杆菌中得到表达。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 土壤宏基因组DNA的提取
•   1.2 GabY基因的PCR扩增
•   1.3 重组表达载体的构建和鉴定
•   1.4 溶磷试验
•     1.4.1 PKO固体培养基上的溶磷圈
•     1.4.2 PKO液体培养基中有效磷含量变化
•     1.4.3 LB液体培养基pH值变化
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 土壤样本
•   3.2 培养基及试剂
•   3.3 菌株、载体和限制性内切酶
•   3.4 土壤基因组提取
•   3.5 目的基因扩增
•   3.6 载体构建及表达
•   3.7 溶磷试验
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 宋贤冲,郭丽梅,唐健,邓小军,金辉,吴雪

关键词: 溶磷,基因,克隆与表达

来源: 基因组学与应用生物学 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

专业: 生物学,农业基础科学,农艺学

单位: 广西壮族自治区林业科学研究院,广西优良用材林资源培育重点实验室,国家林业局中南速生材繁育实验室,广西壮族自治区亚热带作物研究所,广西壮族自治区产品质量检验研究院

基金: 广西优良用材林资源培育重点实验室项目(14B0301),广西林业科技项目(桂林科字[2013]第3号)共同资助

分类号: S154.3

DOI: 10.13417/j.gab.038.000665

页码: 665-669

总页数: 5

文件大小: 220K

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