梅毒螺旋体膜蛋白Tp0971激活MAPKs和NF-κB诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β

论文摘要

目的:探讨梅毒螺旋体（Tp）膜蛋白Tp0971诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β的分子机制。方法:课题组前期表达的Tp0971重组蛋白为研究对象,将不同浓度的重组Tp0971刺激巨噬细胞,分别采用ELISA和实时定量PCR检测TNF-α和IL-1β的分泌及其mRNA的表达。采用Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs） p38,ERK1/2以及JNK1/2的磷酸化,并用相应的抑制剂处理观察TNF-α和IL-1β的变化。同时采用Western blot观察核转录因子κB（NF-κB）的核转位情况,并采用抑制剂处理观察其在介导TNF-α和IL-1β分泌中的作用。结果:ELISA结果显示,重组Tp0971能在0.5～10μg/ml剂量范围内诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。并能促进其mRNA表达,采用转录抑制剂放线菌素D（Act D）或翻译抑制剂放线菌酮（CHX）处理后,TNF-α和IL-1β的转录和分泌水平显著降低。Tp0971也可诱导p38,ERK1/2以及JNK1/2磷酸化,采用其相应的抑制剂处理后,TNF-α和IL-1β分泌明显减少。Western blot结果也显示Tp0971能诱导NF-κB p65亚基核转位,采用NF-κB抑制剂PDTC处理后,TNF-α和IL-1β分泌水平降低。结论:Tp0971激活MAPKs和NF-κB诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 细胞培养与刺激
•     1.2.2 ELISA检测TNF-α和IL-1β分泌
•     1.2.3 实时定量PCR检测TNF-α和IL-1βmRNA的表达
•     1.2.4 Western blot检测
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 不同浓度Tp0971蛋白诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β
•   2.2 Tp0971诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β依赖持续的转录与翻译
•   2.3 Tp0971经ERK1/2、JNK1/2和p38诱导TNF-α和IL-1β分泌
•   2.4 Tp0971激活NF-κB诱导TNF-α和IL-1β分泌
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张跃军,蒋传好,肖鹏程,刘佳强,彭俊,吴移谋

关键词: 梅毒螺旋体,膜蛋白,肿瘤坏死因子,白细胞介素

来源: 中国免疫学杂志 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 南华大学病原生物学研究所,株洲市中心医院临床检验中心

基金: 湖南省卫生厅科技计划项目(B2013-134)

分类号: R392

页码: 545-548

总页数: 4

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