H10亚型和N8亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

论文摘要

根据基因库中H10亚型禽流感病毒（AIV）HA基因、N8亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因序列,分别设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,建立了H10亚型和N8亚型AIV三重RT-PCR检测方法。该法对含有H10和N8亚型AIV的模板可特异性扩增出267 bp（H10亚型AIV）、464 bp（N8亚型AIV）和693 bp（AIV）目的条带,对H10亚型AIV扩增出267、693 bp目的条带,对N8亚型AIV扩增出464、693 bp目的条带,对其他亚型AIV仅扩增出693 bp目的条带,对常见禽病病原体均未扩增出任何条带。该法对H10亚型和N8亚型AIV检测下限为103拷贝/μL。120份临床样品检测结果与病毒分离鉴定一致。研究建立的H10亚型和N8亚型AIV三重RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高,为同时快速鉴别检测H10亚型和N8亚型AIV提供一种简便、快速和有效的方法。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 毒株和主要试剂
•   1.2 引物设计
•   1.3 病毒RNA提取与RT-PCR反应条件的优化
•   1.4 标准品的制备
•   1.5 特异性试验
•   1.6 敏感性试验
•   1.7 临床样品检测
• 2 结果与分析
•   2.1 反应条件的优化
•   2.2 特异性试验
•   2.3 敏感性试验
•   2.4 临床样品检测
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 罗思思,谢芝勋,谢志勤,谢丽基,邓显文,范晴,黄娇玲,张艳芳,王盛,曾婷婷,张民秀

关键词: 禽流感病毒,亚型,三重

来源: 中国兽药杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室

基金: 广西科技重大专项(桂科AA17204057),广西科技基地和人才专项(桂科AD16380009),“广西八桂学者”专项(2019.79),国家“万人计划”领军人才专项(W02060083)

分类号: S852.65

页码: 1-5

总页数: 5

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