导读:本文包含了木瓜凝乳蛋白酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:凝乳,蛋白酶,木瓜,番木瓜,化学,电脉冲,酸乳。
木瓜凝乳蛋白酶论文文献综述
蔡勤安,于志晶,尚丽霞,许诺,曾军[1]（2015）在《木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在原核细胞中的表达》一文中研究指出以青番木瓜总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出木瓜凝乳蛋白酶基因CHY(chymopapain),构建带有His-tag的原核表达载体p EASY-E1-CHY。将该重组载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,重组菌株用IPTG诱导表达,在诱导6 h,IPTG浓度为0.05 mmol/L时重组蛋白表达量最高。SDS-PAGE凝胶电泳和West-ern-Blot杂交分析结果表明蛋白大小为45 k Da。用脱脂奶粉进行凝乳分析,证明此木瓜凝乳蛋白酶具有凝乳活性,此结果为今后利用生物技术进行木瓜凝乳蛋白酶工程化生产奠定了基础。(本文来源于《吉林农业科学》期刊2015年03期）
辛岩,付红岩,陈曦,依淑美[2]（2015）在《姜汁与木瓜蛋白酶复配对凝乳效果的影响》一文中研究指出以鲜牛乳为原料,以凝胶强度、凝乳时间和凝乳感官评价为指标,利用单因素试验,研究姜汁与木瓜蛋白酶联合作用对凝乳效果的影响。结果表明,姜汁与木瓜蛋白酶联合作用凝乳的最佳条件为姜汁添加量15%,木瓜蛋白酶添加量0.1%,凝乳温度60℃。(本文来源于《农产品加工》期刊2015年07期）
张旭,高鑫,徐德昌[3]（2008）在《木瓜凝乳蛋白酶及在微生物中表达研究进展》一文中研究指出木瓜凝乳蛋白酶(Chymopapain)是存在于木瓜乳汁中的一种半胱氨酶蛋白酶,同时具有凝乳酶和蛋白酶的活性。本文综述了木瓜凝乳蛋白酶的分类、结构、活性及其在微生物中表达的研究进展。(本文来源于《中国甜菜糖业》期刊2008年04期）
杨英军,周鹏,李艳梅,沈文涛[4]（2008）在《番木瓜凝乳蛋白酶基因启动子的克隆及功能研究》一文中研究指出采用PCR技术从番木瓜(Carica papaya L.)品种‘穗中红’克隆了木瓜凝乳蛋白酶基因的部分序列及其5′侧翼序列,构建含有两种长度启动子片段的植物表达载体,并用基因枪轰击番木瓜叶组织和农杆菌转化烟草叶盘。结果表明,克隆产物长719bp,163bp的3′侧翼序列与GenBank中的番木瓜凝乳蛋白酶基因序列同源性为99%,556bp的5′侧翼序列有基础启动子区,转录起始位点位于ATG上游38bp的T。序列登录号为AY803756。预测在启动子区存在TATA-box、CAAT-box、WUN和HSE等顺式作用元件。两种启动子片段驱动的GUS基因瞬时表达和稳定表达结果表明,该启动子片段具有乳管特异表达活性。(本文来源于《园艺学报》期刊2008年07期）
熊琼超[5]（2007）在《番木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及其对嗜酸乳杆菌的转化》一文中研究指出凝乳酶是广泛用于干酪制造业的重要的酶制剂,其产值占全世界酶制剂的15%,其中凝乳效果最好的是小牛皱胃酶。由于世界干酪产量逐年增长,所需凝乳酶数量也在大幅提高,皱胃酶供不应求。同时,欧洲不断爆发的动物性传染病,使消费者对来源于动物的凝乳酶产生恐惧心理,还有一些素食主义者也拒绝食用用小牛皱胃酶生产的干酪,所以近年来各国都在积极寻找皱胃酶替代品。番木瓜凝乳蛋白酶是一种具有凝乳作用的植物凝乳酶,克隆番木瓜凝乳蛋白酶基因,转化益生菌嗜酸乳杆菌,用于干酪生产,对解决凝乳酶短缺及满足特殊人群的需要有重要意义,同时有益于身体健康,也为今后用乳酸菌商业化生产人们所需蛋白奠定了基础。本研究以未成熟的番木瓜(Carica papaya L.)果实为试材,用Trizol试剂盒提取其总RNA,反转录获得cDNA第一条链,设计特异引物,引入SacI和XbaI双酶切位点,优化PCR条件,扩增出目的条带,连接到pMD18-T simple vector克隆载体,获得重组载体pMD18T+,经测序并与GenBank上公布的番木瓜凝乳蛋白酶基因(AJ131996)序列比对,其相似性达98 %。以SacI和XbaI分别双酶切克隆载体pMD18T+与表达载体pMG36e,回收目的基因片段和载体片段,连接获得含有木瓜凝乳蛋白酶基因的重组表达载体pMG36e+。活化受体菌株嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus ATCC 4356),优化电脉冲转化法参数,转化获得6个转化子,经酶切和PCR鉴定,重组质粒已成功转入嗜酸乳杆菌(L. acidophilus ATCC 4356)。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2007-07-01）
卢其湘,赵树进[6]（2007）在《木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的构建木瓜凝乳蛋白酶(CP)的表达载体,并在大肠杆菌中表达。方法从生番木瓜中提取mRNA后进行反转录,得到木瓜凝乳蛋白酶的cDNA,PCR产物克隆到pET22-b(+)载体中,重组质粒转化至大肠杆菌BL21,进行诱导表达及表达产物的检测。结果表达产物的SDS-PAGE显示单一条带,相对分子质量约为26000。Western blot表明表达产物可与抗木瓜凝乳蛋白酶特异性抗体结合。结论CP基因已成功在大肠杆菌中克隆表达,为进一步纯化和动物实验奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2007年02期）
舒薇,房师松,崔堂兵,郭勇[7]（2006）在《木瓜凝乳蛋白酶的单甲氧基聚乙二醇化学修饰及其对酶活力和抗原性的影响》一文中研究指出目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰对酶活力和抗原性的影响,为该酶的修饰改性提供实验依据。方法在底物保护和无底物保护下,分别以单甲氧基聚乙二醇的两种活化产物mPEG1和mPEG2对木瓜凝乳蛋白酶进行共价修饰,以叁硝基苯磺酸法测定各修饰酶的平均氨基修饰度;以大分子酪蛋白和小分子BAEE为底物分别测定各修饰酶的酶活性;以ELISA法检测各修饰酶的抗原性。结果①mPEG1和mPEG2修饰均能降低及消除酶的抗原性,其中mPEG2的效果更为明显。②二者的化学修饰均使酶活力有所下降,其中mPEG1修饰酶的酶活力(分别以酪蛋白和BAEE为作用底物,下同)均高于mPEG2修饰酶的酶活力(尤其是当底物为大分子蛋白质时)。③底物保护下的修饰酶酶活力均显着高于无底物保护的酶活力。结论以mPEG1为修饰剂,在底物保护下的Cp修饰能在消除抗原性的同时,获得仍具较高酶活力的修饰酶。(本文来源于《卫生研究》期刊2006年03期）
丁玉兰,杨太成,赵树进[8]（2006）在《木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体的制备及纯化》一文中研究指出目的:制备并纯化木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体,为建立木瓜凝乳蛋白酶免疫学检测方法打下基础。方法:用自纯化的木瓜凝乳蛋白酶免疫新西兰大耳兔,亲和层析纯化多克隆抗体,并用免疫双扩和ELISA法对其进行鉴定。结果:抗血清效价为1∶380000,SDS-PAGE显示纯化后的抗体纯度很高。(本文来源于《中药材》期刊2006年02期）
舒薇,贺丽苹,崔堂兵,郭勇[9]（2006）在《聚乙二醇修饰对木瓜凝乳蛋白酶酶学及药物生物学性质的影响》一文中研究指出采用活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,修饰产物经毛细管电泳检测与分析表明:主产物为平均每分子Cp偶联3~4个mPEG1长链的低修饰度修饰酶.以此修饰酶为研究对象,进行了Cp在修饰前后的主要酶学、药物生物学性质的比较研究.结果表明:Cp经mPEG1修饰后,Kmapp(酪蛋白为底物)有所增加,但与Cp相比,mPEG1修饰酶的pH稳定性、热稳定性以及抗胰蛋白酶的水解能力却均有增强;药代动力学结果还显示,mPEG1-Cp的体内活性半衰期延长,修饰酶体内半衰期是原酶的1.6倍,表明mPEG1修饰酶具有更好的临床应用前景.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2006年01期）
舒薇,郭勇,贺丽苹,温宏睿[10]（2005）在《木瓜凝乳蛋白酶的单链单甲氧基聚乙二醇修饰产物的检测与分析》一文中研究指出在底物保护下,采用叁聚氰氯活化的单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,反应混合物经毛细管电泳(CE)分析及SephadexG75分离纯化获得修饰度为平均每分子Cp偶联3～4个mPEG1长链的修饰纯酶(mPEG1Cp).以叁硝基苯磺酸(TNBS)法与CE法作对比测定了该修饰酶的平均氨基修饰度;以ELISA法检测mPEG1Cp的抗原性;用紫外吸收光谱和荧光发射光谱对mPEG1Cp进行了结构的测定分析.结果表明:Cp的mPEG1修饰产物经毛细管电泳检测为多组分体系,最大产物峰为平均每分子Cp偶联3～4个mPEG1的低修饰度修饰酶,其相对分子质量为40712～46044;该修饰酶抗原抗体结合能力完全消失,体内活性半衰期是原酶的1.6倍,同时酶活力保持在36.5%;紫外吸收光谱和荧光发射光谱分析表明:mPEG1Cp结构有轻度的改变.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2005年03期）
木瓜凝乳蛋白酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以鲜牛乳为原料,以凝胶强度、凝乳时间和凝乳感官评价为指标,利用单因素试验,研究姜汁与木瓜蛋白酶联合作用对凝乳效果的影响。结果表明,姜汁与木瓜蛋白酶联合作用凝乳的最佳条件为姜汁添加量15%,木瓜蛋白酶添加量0.1%,凝乳温度60℃。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
木瓜凝乳蛋白酶论文参考文献
[1].蔡勤安,于志晶,尚丽霞,许诺,曾军.木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在原核细胞中的表达[J].吉林农业科学.2015
[2].辛岩,付红岩,陈曦,依淑美.姜汁与木瓜蛋白酶复配对凝乳效果的影响[J].农产品加工.2015
[3].张旭,高鑫,徐德昌.木瓜凝乳蛋白酶及在微生物中表达研究进展[J].中国甜菜糖业.2008
[4].杨英军,周鹏,李艳梅,沈文涛.番木瓜凝乳蛋白酶基因启动子的克隆及功能研究[J].园艺学报.2008
[5].熊琼超.番木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及其对嗜酸乳杆菌的转化[D].哈尔滨工业大学.2007
[6].卢其湘,赵树进.木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].中国生物制品学杂志.2007
[7].舒薇,房师松,崔堂兵,郭勇.木瓜凝乳蛋白酶的单甲氧基聚乙二醇化学修饰及其对酶活力和抗原性的影响[J].卫生研究.2006
[8].丁玉兰,杨太成,赵树进.木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体的制备及纯化[J].中药材.2006
[9].舒薇,贺丽苹,崔堂兵,郭勇.聚乙二醇修饰对木瓜凝乳蛋白酶酶学及药物生物学性质的影响[J].华南农业大学学报.2006
[10].舒薇,郭勇,贺丽苹,温宏睿.木瓜凝乳蛋白酶的单链单甲氧基聚乙二醇修饰产物的检测与分析[J].华南农业大学学报.2005
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