导读:本文包含了脂肪形成论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:脂肪,干细胞,细胞,内质网,莱菔,低氧,脂质。
脂肪形成论文文献综述
寇艳波,刘庆亚,汤仁仙,王玉刚,颜晓庆[1]（2019）在《急性寒冷刺激诱导小鼠米黄色脂肪细胞形成方法的建立》一文中研究指出目的:建立急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法。方法:连续3天每天4 h预冷刺激使小鼠适应寒冷环境,然后持续24 h进行急性寒冷刺激,诱导小鼠皮下脂肪中米黄色脂肪细胞形成。采用免疫组化检测皮下脂肪中Ucp1阳性细胞,荧光定量PCR检测米黄色脂肪细胞标志性基因Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea的转录,Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Prdm16和Ucp1的表达。结果:急性寒冷刺激后小鼠皮下脂肪中Ucp1阳性细胞数量明显增加,Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea转录明显上调,Prdm16、Ucp1蛋白表达明显升高。结论:本研究建立的急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制的研究。(本文来源于《交通医学》期刊2019年04期）
田思聪[2]（2019）在《莱菔硫烷对肝脏脂肪滴形成的影响及MAM区的调控机制》一文中研究指出非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是以脂滴(lipid droplets,LDs)过度沉积于肝脏为特征的脂代谢紊乱疾病,可直接导致非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、最终发展成肝癌。莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)是富含于十字花科蔬菜中的一种异硫氰酸酯(isothiocyanates,ITCs)类植物化学物,具有多种生物学功能。前期研究发现,SFN能够改善糖尿病、肥胖和酒精性肝损伤等糖脂代谢紊乱引起的代谢型疾病,但SFN对高脂摄入引起的NAFLD是否也具有改善作用,及可能的作用机制尚未见报道。本文采用高脂膳食(highfat diet,HFD)建立NAFLD整体动物模型,以脂肪酸(fatty acid,FA)诱导HHL-5肝细胞为体外模型,并以SFN为干预因素,内质网(ER)与线粒体(MT)偶联区(MAM)作为主要研究核心,探讨SFN对肝脏脂滴形成的影响和改善NAFLD的分子机制。分别用HFD喂养大鼠10周,250 μmol/LFA诱导HHL-5肝细胞5 d,成功建立体内及体外肝细胞脂肪变模型。分别以不同剂量SFN(5,10,20 mg/kg)经口灌胃大鼠10周,及SFN(1,5,10,20μmol/L)处理HHL-5肝细胞,可降低大鼠血清和肝脏及HHL-5肝细胞中甘油叁酯(TG)和总胆固醇(TC)含量。HE和油红O染色病理观察发现,SFN明显改善肝脏病理损伤,减少脂滴数量和平均面积。采用Western blot方法检测脂滴核心组份TG和TC合成关键酶二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)和胆固醇酰基转移酶(ACAT1)蛋白水平发现,SFN抑制其表达。Real-time PCR、免疫组化和Western blot方法检测脂滴表面结构蛋白发现,SFN抑制大鼠肝脏PLIN2和PLIN5 mRNA及蛋白水平表达;FA诱导HHL-5肝细胞10 d,PLIN2和PLIN5表达逐渐上升,SFN从第3 d到第10 d下调PLIN2和PLIN5表达。SFN抑制PLIN2/PLIN5的转录因子PPARγ表达;PPARγ兴奋剂Tro处理HHL-5肝细胞,TG含量上升,PLIN2及PLIN5表达上调。PPARγ兴奋和过表达后,SFN不再抑制PLIN2和PLIN5表达。上述结果提示,SFN不仅降低了脂滴脂肪核心的含量,更是通过抑制PPARγ下调脂滴外周蛋白PLIN2及PLIN5的表达,抑制脂滴形成。FA是合成脂滴脂肪核心的底物,Real-time PCR和Western blot方法检测FA合成相关酶ACC1、SCD1和FAS及其转录因子SREBP1c表达发现,SFN下调其mRNA及蛋白表达。动态观察发现,FA作用24 h后,SFN即下调SREBP1c;FA作用3d后,细胞内TG含量明显减少。ER是合成FA的关键细胞器,肝细胞透射电镜观察发现,SFN可明显修复ER的生理形态,减轻ER肿胀,缩短ER周长;同时改善MT生理形态。内质网应激(ERS)是调控FA合成相关酶的重要途径,Western blot检测发现,SFN下调ERS标志蛋白GRP78表达,降低ERS元件XBP1和PERK的mRNA及蛋白水平表达。采用ERS抑制剂4-PBA处理细胞,XBP1和SREBP1c mRNA表达被抑制,TG含量减少,脂滴形成也明显减少;可见,SFN与ERS抑制剂4-PBA作用类似。综上,SFN通过ERS 两条途径 XBP1-ACC1/SCD1 和 PERK-SREBP1c-FAS 减少脂质积累。ERS发生后,MT与ER形态和功能的变化使二者形成结构偶联区(MAM)。透射电镜观察大鼠肝脏及MT粗提物发现,SFN减轻了肝细胞中MT的膨胀,拉开MT与ER之间的距离,明显下调MAM区连接蛋白PACS2的表达,提示SFN有促进MAM区解体的倾向。SFN明显降低胞浆及MT中Ca2+浓度,从而降低MAM区内通讯信号分子活动。Western blot检测发现,SFN下调ER膜上Ca2+释放通道蛋白IP3R表达和MT内膜上吸收Ca2+的钙离子单向转运蛋白MCU的表达。SFN抑制MAM区中脂滴脂肪核心合成酶DGAT2和ACAT1的表达。高脂摄入严重损害MT的DNA(mtDNA)合成,SFN升高mtDNA表达量,恢复MT膜电位,减少ROS产生,从而减轻MT损伤。SFN提高MT氧化呼吸链中复合物IV的活性,促进ATP合成,改善能量代谢。综上,SFN抑制高脂诱导的肝细胞脂滴形成,其作用机制与抑制ERS,下调MAM区内Ca2+相关蛋白表达、促进MT的氧化磷酸化有关。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2019-06-01）
刘京京[3]（2019）在《IL-28B在SD大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成中的作用研究》一文中研究指出目的:探讨IL-28B对SD大鼠NASH形成中的作用。方法:雄性SD大鼠20只,按完全随机配对把6只大鼠分配到观测组,余下14只按体重随机区组分为对照组和实验组。对照组给予普通饲料,实验组与观测组给予高脂饲料,每4周从观测组随机选取2只大鼠,取大鼠肝脏组织观察病理学改变是否达到NASH。在第12周大鼠肝脏组织病理学改变达到NASH诊断,按体重配对,处死对照组和实验组全部大鼠。取全血离心得血清检测各大鼠的ALT、AST、GGT、TG、LDL、TC、CK-18 M30、ET、IL-28B水平,把一部分肝脏组织行HE染色,另一部分部分肝脏组织匀浆以测IL-28B水平。使用SPSS22.0统计分析软件进行数据分析。计量资料处理:通过正态性检验的用随机区组设计资料的方差分析;未通过正态性检验的,用随机区组设计资料的秩和检验。相关性分析采用spearman相关分析检测血清ALT、TG、LDL、TC、CK-18 M30、IL-28B、ET及肝匀浆IL-28B与肝脏病理评分相关性。分别绘制病理评分、TG、肝匀浆IL-28B、CK-18 M30+血清IL-28B、LDL、血清IL-28B、CK-18M30、TC、ET的ROC曲线,计算并比较各项指标的敏感性与特异性。P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)与对照组相比,实验组大鼠精神状态下降、皮毛光滑度降低、轻度腹泻、体重低(P<0.05)、肝指数高(P<0.05);(2)从第4周开始观测组大鼠肝脏开始出现小叶内炎症、少量气球样变;饲养至第8周,大鼠肝脏表现出脂肪变性和纤维化,但小叶内炎症轻微加重,气球样变未增多;第12周末,大鼠的肝脏脂肪变程度进一步加重,小叶内炎症轻微加重,气球样变未增多,纤维化程度进一步加重,正常肝小叶结构消失,符合NASH的诊断标准,成功建模;(3)实验组大鼠肝脏病理评分高于对照组(P<0.05);(4)实验组大鼠的血清ALT水平高于对照组(P<0.05),实验组大鼠血清AST、GGT水平高于对照组,但均无统计学差异(P>0.05);(5)实验组大鼠的血清TG、LDL、GGT水平均高于对照组(P<0.05);(6)实验组大鼠的血清CK-18 M30、ET水平高于对照组(P<0.05);血清IL-28B、肝匀浆IL-28B水平低于对照组(P<0.05);(7)观测组大鼠随着饲养时间的延长,体重、AST、TC水平变化趋势呈倒“V”形;ALT、GGT、TG、LDL、CK-18 M30、ET、血清IL-28B、肝匀浆IL-28B水平变化呈“V”形;肝指数逐渐下降;病理评分逐渐升高;(8)ALT与肝脏病理评分相关无统计学意义(P>0.05);TG、LDL、TC、CK-18 M30及ET与肝脏病理评分呈正相关(P<0.05);血清IL-28B与肝匀浆IL-28B与肝脏病理评分呈负相关(P<0.05);(9)病理评分、TG、肝匀浆IL-28B、CK-18 M30+血清IL-28B、LDL、血清IL-28B、CK-18 M30、TC、ET的AUC面积分别是1.000、1.000、0.980、0.959、0.939、0.898、0.898、0.898、0.857;(10)各指标的敏感度、特异度,病理评分(1.000,1.000)、TG(1.000,1.000)、肝匀浆IL-28B(1.000,0.857)、CK-18 M30+血清IL-28B(0.857,1.000)、LDL(0.857,0.857)、IL-28B(0.857,0.857)、CK-18 M30(1.000,0.857)、TC(0.857,0.857)、ET(1.000,0.857)。结论:(1)推测SD大鼠NASH形成过程中,IL-28B水平的变化可能是反馈调节的表现。(2)血清IL-28B水平的倒数与CK-18 M30水平联合检测提高了诊断大鼠NASH的诊断效能及特异度,有望成为诊断大鼠NASH的一种新的无创检测方法。(本文来源于《延安大学》期刊2019-06-01）
胡万盛[4]（2019）在《叁维培养高传代脂肪干细胞与内皮集落形成细胞治疗慢性放射性溃疡的实验研究》一文中研究指出背景和目的:干细胞是体内一种可以自我增殖、多向分化以及具有强大的旁分泌功能的细胞。而脂肪干细胞因其大量体内脂肪组织来源,其强大的自我增殖及旁分泌能力可应用于临床,治疗多种疾病,例如糖尿病足的难愈性创面[1]。但干细胞经过体外的培养扩增过程中,细胞会出现衰老,形态会发生改变,其增殖分化潜能会明显的降低,并且细胞更容受到外界的环境影响而死亡[2]。这无疑大大影响了细胞的治疗效果。对于提升干细胞治疗潜能的方法有很多,例如人工支架材料[3]、异种生物材料[4]等。这些方法都不可避免的引入了外来材料,或者加入可能对机体有害的化学试剂[5]。本身存在相对更高的治疗成本,更是引入了相对潜在的危险因素,可能对机体造成损害。根据研究团队成员之前的实验发现可以知道,本身存在于细胞外基质中的成分透明质酸可以用于叁维的细胞培养[6]。其具有非常安全的生物性能。通过叁维培养微球的方式可以增加干细胞的干细胞潜能,细胞的干细胞标志物明显发生上调,细胞存活率大大增加[7],其增殖分化旁分泌功能得到明显提升。同时来自于外周血中的内皮细胞集落形成细胞,其具有非常强的自我增殖潜能。其中高增值潜能的内皮细胞集落形成细胞单个细胞具有集落形成能力。其与脂肪干细胞存在相互作用。一方面可以增加其干细胞潜能。另一方面可以增加脂肪干细胞的存活[8]。本实验的目的在于通过利用透明质酸叁维培养经过反复传代后的衰老脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞构建叁维空间结构,从而增加脂肪干细胞的干细胞潜能,减少其在体内过快死亡,增加对疾病的治疗效果。实验方法:1、获取经过反复传代的衰老脂肪干细胞常规用直径3.5mm多侧孔吸脂针对健康女性病人腹部脂肪进行抽脂。将获取的脂肪注入血袋中,在冰水混合物中静置直至血水与上层脂肪明显分层。放出下层血水,留置上层脂肪分装于50ml离心管至一半。加入25ml磷酸缓冲盐溶液到离心管中,充分摇匀后离心机1200g离心3分钟。弃去下层液体,保留中层的脂肪,倒除上层过多的油滴。配置0.075%胶原酶I溶液消化脂肪组织,放置在37度水浴摇床30分钟。用全培中和胶原酶I,离心后去上层油滴和未消化完的脂肪组织,取下层细胞团接种于培养皿上。反复培养至第八代(即为是衰老脂肪干细胞)。2、获取内皮细胞集落形成细胞抽取健康女性外周血20毫升,1:1混合磷酸盐溶液后加入淋巴细胞分离液。低速离心30分钟。取中间白色云雾状细胞层,即血液中的单个核细胞。接种于胶原I铺板的培养皿中直至细胞集落出现。细胞个数约为2000个时传代。3、本课题实验选取的实验动物为裸鼠,自制小型圆柱形铅柱,中间留一缝隙揪出裸鼠皮肤,透明胶带固定。麻醉裸鼠后固定在放射源下,辐照15格雷。静待一个月使裸鼠皮肤发生慢性纤维化,此时用剪出剪出一个7mm的全层皮肤创面。用叁维培养后的细胞与对照组治疗创面。对照组划分为:第八代脂肪干细胞、叁维培养第八代脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞、内皮细胞集落形成细胞。4、实验结果叁维培养内皮细胞集落形成细胞和脂肪干细胞的组出现类似于血管结构的空间结构,尝试单纯用第八代的脂肪干细胞叁维培养存在大量无法形成空间结构的单个细胞,其漂浮于透明质酸中发生死亡。随着创面治疗时间的推移,所有的实验组和对照组创面都趋于愈合。然而,叁维培养内皮细胞集落形成细胞和脂肪干细胞的组治疗效果最佳,其余叁组之间无明显差异。叁维培养组能更好的组织中存活下来,并且参与组成血管结构,而单纯脂肪干细胞组在宿主体内大量被代谢掉仅少量残存在间质中,也未能参与机体组织结构组成。组织的再生情况也明显不如叁维培养组。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-04-18）
高杨杰[5]（2019）在《内脏脂肪指数和脂质蓄积指数与上尿路结石形成的相关性研究》一文中研究指出目的:通过计算上尿路结石患者的内脏脂肪指数和脂质蓄积指数与体检人群进行对比,结合患者结石病史,高血压、高血脂、糖尿病等代谢性基础疾病进行统计学分析,进一步研究泌尿系结石形成与人体内脏脂肪之间的关系,探讨结石形成的原因以及内脏脂肪指数和脂质蓄积指数在泌尿系结石预防中的作用。方法:1.研究对象:选取2017年12月至2018年12月就诊于我院泌尿外科符合筛选条件的50例上尿路结石患者,并选取同期在我院体检的生物学特征相似的体检人群50例,收集两组人群临床资料。2.研究方法:分析纳入研究的人群临床资料,比较结石组与体检对照组内脏脂肪指数、脂质蓄积指数的差异,分析结石组患者既往结石病史与内脏脂肪指数、脂质蓄积指数的相关性,根据患者是否患有高血压、糖尿病、高血脂等代谢性基础疾病进行分组,比较代谢异常组与代谢正常组在内脏脂肪指数和脂质蓄积指数上的差异,并进行分析。结果:1.结石组中男性29例(58%),女性21例(42%),年龄范围在25-60岁,平均年龄为40.76±8.61岁。对照组男性27例(54%),女性23例(46%),年龄范围在24-59岁,平均年龄为38.7±8.00岁。结石组与对照组在年龄、性别方面无差异(P>0.05)。2.结石组与体检对照组在血清钙离子、血尿酸浓度、血清镁离子、血清磷离子等生化检查方面无明显统计学差异(P>0.05)。3.结石组与体检对照组相比较,血清甘油叁脂浓度明显偏高(P<0.05),血清胆固醇浓度、高密度脂蛋白浓度明显偏低(P<0.05)。4.结石组与体检对照组相比较,BMI指数、LAP指数、VAI指数均较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.结石组中,既往有上尿路结石病史组的平均LAP指数、VAI指数均明显高于既往无上尿路结石病史者(P<0.05),但两组在BMI指数上无明显差异(P>0.05)。代谢异常组中平均LAP指数、VAI指数均明显高于代谢正常组(P<0.05),但两组在BMI指数上无明显差异(P>0.05)。6.体检对照组中,代谢异常组与代谢正常组在LAP指数、VAI指数、BMI指数上无明显差异,结石代谢异常组LAP指数、VAI指数、BMI指数均高于体检代谢异常组,差异有统计学意义(P<0.05),结石代谢正常组LAP指数、VAI指数、BMI指数均高于体检代谢正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:上尿路结石患者的内脏脂肪指数和脂质蓄积指数明显升高,与结石的复发有一定的相关性,LAP指数和VAI指数较BMI指数能更加敏感的提示上尿路结石发生的风险。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-04-18）
徐红月,武冰洁,董瀚林,唐旭东,王雪艳[6]（2019）在《虫草素通过Fsp27和Perilipin1调节脂肪滴形成和降解减肥》一文中研究指出为研究虫草素是否具有减肥的作用及其可能机制,以高脂饮食喂养大鼠构建肥胖型高脂血症动物模型,给予高、中、低不同剂量[50、25、12. 5 mg/(kg·d)]的虫草素,连续灌胃5周后观察大鼠体重和脂肪系数的变化,提取脂肪细胞并用BODIPY染色检测脂滴。培养3T3-L1细胞,给予不同浓度(1. 563,3. 125,6. 25,12. 5,25μg/m L)虫草素,作用168 h,Western blot检测脂滴相关基因Fsp27,Perilipin1的表达。结果表明:虫草素以剂量依赖的方式抑制脂滴的形成,并且诱导成熟脂肪细胞中的脂滴降解,促进脂肪细胞的去分化。虫草素还下调脂滴相关基因Fsp27和Perilipin1。表明虫草素可能通过下调Fsp27抑制脂肪滴的形成,下调Perilipin1来刺激脂解作用。虫草素可以阻止脂滴形成,促进脂滴降解。因此,说明虫草素具有减肥的作用,其可能的作用机制是通过下调Fsp27和Perilipin1的表达抑制脂肪滴的形成和促进其降解,该研究结果将为虫草素作为一种潜在的减肥药物的开发奠定理论基础。(本文来源于《吉林农业大学学报》期刊2019年02期）
周子维,游芳宁,刘彬彬,邓婷婷,赖钟雄[7]（2019）在《摇青机械力对乌龙茶脂肪族类香气形成的影响》一文中研究指出做青是乌龙茶香气品质形成的核心工艺,为明确做青过程中摇青机械力对茶叶脂肪族类香气形成的影响,以乌龙茶品种毛蟹(Camellia sinensis cv. Maoxie)的鲜叶、摇青叶及未摇青等时间摊放叶(简称摊放叶)为供试材料,采用超高效液相色谱-串联质谱法对脂肪族香气前体物质亚油酸、亚麻酸及愈伤酸进行检测,结果表明,摇青机械力能显着降低鲜叶中的亚麻酸及亚油酸含量(P<0.05),摊放处理仅能显着降低鲜叶中亚油酸的含量(P<0.05),摊放叶中愈伤酸的含量虽然较鲜叶有所降低,但仍旧显着高于摇青叶(P<0.05)。通过顶空气相色谱-质谱联用法检测脂肪族类香气物质,结果表明,摇青叶的C6醛类相对含量明显降低,C6醇类和叶醇酯类衍生物相对含量增多;而摊放叶中C6醛类、C6醇类和叶醇酯类的衍生物相对含量均远低于摇青叶。实时荧光定量聚合酶链式反应结果表明,LOX1、ADH基因在摇青叶中表达量最高,LOX2、LOX3、HPL基因在摊放叶中表达量最高。相关性分析表明,不同叶态中LOX1基因的表达水平与C6醛类含量间存在极显着的负相关性(P<0.01),与C6醇、叶醇酯类衍生物含量间均存在显着正相关性(P<0.05),ADH基因表达水平与叶醇酯类衍生物含量间均存在极显着的正相关性(P<0.01),而LOX2、HPL基因表达水平与脂肪族类香气含量间相关性均未达显着水平(P>0.05)。LOX1、ADH基因在做青过程中的上调表达可能与乌龙茶花果香的形成密切相关。(本文来源于《食品科学》期刊2019年13期）
庄俐,张惠莉,张瑞霞[8]（2019）在《棕色脂肪形成的内分泌及环境影响因素研究》一文中研究指出本文主要研究白色脂肪棕色化的内分泌调控及影响棕色脂肪变化的环境因素的最新研究成果,为其在代谢疾病中的治疗潜力提供证据。截至目前,对棕色脂肪的内分泌调控,低温及低氧环境暴露对棕色脂肪的影响,以及脂肪组织在高原上维持能量、代谢和热平衡的相互转化的研究依然较少。深入地了解BAT的潜在能力,能够更好地控制这些细胞,以改善系统能量代谢和葡萄糖稳态,为对抗人类肥胖和相关代谢紊乱提供新的治疗策略。(本文来源于《医学信息》期刊2019年04期）
扈莹莹,王妍,于晶,蒋培宇,孔保华[9]（2019）在《脂肪添加量对发酵香肠脂质和蛋白质氧化及挥发性化合物形成的影响》一文中研究指出通过研究不同脂肪添加量(5%、10%、15%和20%)的香肠在发酵过程中脂质和蛋白质的氧化水平,并对发酵前后的挥发性化合物进行分析,最后对香肠进行感官评价。结果表明,随着脂肪添加量的增加,硫代巴比妥酸值显着增加,肌原纤维蛋白的羰基含量增加,总巯基含量降低(P<0.05),说明增加脂肪添加量会促进发酵香肠中脂肪和蛋白质的氧化;挥发性化合物分析可知,脂肪添加量较高的发酵香肠,因脂质自动氧化产生的醛、酮、酸、醇、酯和烷烃类化合物含量也相应增加(P<0.05);感官评价结果表明,脂肪添加量为15%的发酵香肠,其整体可接受性最佳(P<0.05)。(本文来源于《食品科学》期刊2019年18期）
田新立,江波,颜洪[10]（2019）在《脂肪间充质干细胞来源外泌体对角质形成细胞增殖和迁移的影响与机制》一文中研究指出背景:皮肤烧烫伤是一类非常常见且致死和致残率极高的疾病,探索有效促进伤口愈合的方法意义重大。目的:探讨脂肪间充质干细胞来源外泌体是否对角质形成细胞增殖与迁移产生影响及其潜在机制。方法:采用胰酶消化法培养人角质形成细胞,并利用角质形成细胞特异标记蛋白Keratin14进行鉴定;超速离心法分离人脂肪间充质干细胞来源外泌体,并利用外泌体特异标记蛋白CD9、CD63和CD81进行鉴定;将纯化好的脂肪间充质干细胞来源外泌体,以不同质量浓度(0,10,20,50,100 mg/L)加入第3代角质形成细胞中,在处理的不同时间点(0,12,24,48 h)进行增殖和迁移相关指标检测。结果与结论:脂肪间充质干细胞来源外泌体促进角质形成细胞增殖和迁移,在质量浓度为50 mg/L和处理48 h时增殖最显着,脂肪间充质干细胞来源外泌体可能通过调控ERK、AKT和STAT3蛋白的磷酸化而促进角质形成细胞增殖与迁移。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年01期）
脂肪形成论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是以脂滴(lipid droplets,LDs)过度沉积于肝脏为特征的脂代谢紊乱疾病,可直接导致非酒精性脂肪肝炎、肝硬化、最终发展成肝癌。莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)是富含于十字花科蔬菜中的一种异硫氰酸酯(isothiocyanates,ITCs)类植物化学物,具有多种生物学功能。前期研究发现,SFN能够改善糖尿病、肥胖和酒精性肝损伤等糖脂代谢紊乱引起的代谢型疾病,但SFN对高脂摄入引起的NAFLD是否也具有改善作用,及可能的作用机制尚未见报道。本文采用高脂膳食(highfat diet,HFD)建立NAFLD整体动物模型,以脂肪酸(fatty acid,FA)诱导HHL-5肝细胞为体外模型,并以SFN为干预因素,内质网(ER)与线粒体(MT)偶联区(MAM)作为主要研究核心,探讨SFN对肝脏脂滴形成的影响和改善NAFLD的分子机制。分别用HFD喂养大鼠10周,250 μmol/LFA诱导HHL-5肝细胞5 d,成功建立体内及体外肝细胞脂肪变模型。分别以不同剂量SFN(5,10,20 mg/kg)经口灌胃大鼠10周,及SFN(1,5,10,20μmol/L)处理HHL-5肝细胞,可降低大鼠血清和肝脏及HHL-5肝细胞中甘油叁酯(TG)和总胆固醇(TC)含量。HE和油红O染色病理观察发现,SFN明显改善肝脏病理损伤,减少脂滴数量和平均面积。采用Western blot方法检测脂滴核心组份TG和TC合成关键酶二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)和胆固醇酰基转移酶(ACAT1)蛋白水平发现,SFN抑制其表达。Real-time PCR、免疫组化和Western blot方法检测脂滴表面结构蛋白发现,SFN抑制大鼠肝脏PLIN2和PLIN5 mRNA及蛋白水平表达;FA诱导HHL-5肝细胞10 d,PLIN2和PLIN5表达逐渐上升,SFN从第3 d到第10 d下调PLIN2和PLIN5表达。SFN抑制PLIN2/PLIN5的转录因子PPARγ表达;PPARγ兴奋剂Tro处理HHL-5肝细胞,TG含量上升,PLIN2及PLIN5表达上调。PPARγ兴奋和过表达后,SFN不再抑制PLIN2和PLIN5表达。上述结果提示,SFN不仅降低了脂滴脂肪核心的含量,更是通过抑制PPARγ下调脂滴外周蛋白PLIN2及PLIN5的表达,抑制脂滴形成。FA是合成脂滴脂肪核心的底物,Real-time PCR和Western blot方法检测FA合成相关酶ACC1、SCD1和FAS及其转录因子SREBP1c表达发现,SFN下调其mRNA及蛋白表达。动态观察发现,FA作用24 h后,SFN即下调SREBP1c;FA作用3d后,细胞内TG含量明显减少。ER是合成FA的关键细胞器,肝细胞透射电镜观察发现,SFN可明显修复ER的生理形态,减轻ER肿胀,缩短ER周长;同时改善MT生理形态。内质网应激(ERS)是调控FA合成相关酶的重要途径,Western blot检测发现,SFN下调ERS标志蛋白GRP78表达,降低ERS元件XBP1和PERK的mRNA及蛋白水平表达。采用ERS抑制剂4-PBA处理细胞,XBP1和SREBP1c mRNA表达被抑制,TG含量减少,脂滴形成也明显减少;可见,SFN与ERS抑制剂4-PBA作用类似。综上,SFN通过ERS 两条途径 XBP1-ACC1/SCD1 和 PERK-SREBP1c-FAS 减少脂质积累。ERS发生后,MT与ER形态和功能的变化使二者形成结构偶联区(MAM)。透射电镜观察大鼠肝脏及MT粗提物发现,SFN减轻了肝细胞中MT的膨胀,拉开MT与ER之间的距离,明显下调MAM区连接蛋白PACS2的表达,提示SFN有促进MAM区解体的倾向。SFN明显降低胞浆及MT中Ca2+浓度,从而降低MAM区内通讯信号分子活动。Western blot检测发现,SFN下调ER膜上Ca2+释放通道蛋白IP3R表达和MT内膜上吸收Ca2+的钙离子单向转运蛋白MCU的表达。SFN抑制MAM区中脂滴脂肪核心合成酶DGAT2和ACAT1的表达。高脂摄入严重损害MT的DNA(mtDNA)合成,SFN升高mtDNA表达量,恢复MT膜电位,减少ROS产生,从而减轻MT损伤。SFN提高MT氧化呼吸链中复合物IV的活性,促进ATP合成,改善能量代谢。综上,SFN抑制高脂诱导的肝细胞脂滴形成,其作用机制与抑制ERS,下调MAM区内Ca2+相关蛋白表达、促进MT的氧化磷酸化有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂肪形成论文参考文献
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