塞尼卡病毒与口蹄疫病毒双重RT-PCR鉴别检测方法的建立

论文摘要

2014～2015年,美国、巴西等国爆发了一种症状类似于口蹄疫的水泡性疾病,病原被确定为塞尼卡病毒A（Senecavirus A,SVA）。为了鉴别和诊断塞尼卡病毒A和口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）,本研究针对塞尼卡病毒的VP1基因和口蹄疫的5’UTR基因,合成特异性引物,优化了反应体系和扩增条件,建立了一种可同时检测塞尼卡病毒A和口蹄疫病毒的双重RT-PCR方法。特异性和敏感性试验结果表明,建立的双重RT-PCR检测方法特异性好,敏感性强,对塞尼卡病毒A和口蹄疫病毒最低检出量分别为104 copies/μL、103 copies/μL。本研究建立的方法对临床快速鉴别塞尼卡病毒A和口蹄疫病毒感染具有重要意义。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒与样品
•   1.2 主要试剂
•   1.3 引物合成
•   1.4 引物验证
•   1.5 阳性克隆质粒的构建
•   1.6 反应体系优化
•   1.7 特异性试验
•   1.8 敏感性试验
•   1.9 样品检测结果的验证
• 2 结果
•   2.1 引物特异性验证
•   2.2 扩增条件的优化
•   2.3 特异性结果分析
•   2.4 敏感性结果分析
•   2.5 样品检测结果
•   2.6 样品检测结果验证
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘涛,黄元,陈锦良,向华,肖少波,王晓虎,陈晶,向蓉,何继军,郑海学

关键词: 塞尼卡病毒,口蹄疫病毒,双重

来源: 中国动物传染病学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 广东省农业科学院动物卫生研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站,华中农业大学动物科学技术学院动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所

基金: 国家重点研发计划项目(2016YFD0501500),国家自然科学基金-广东联合基金项目(U1501213),广东省农业厅项目(2016LM2150),广东省农业科学院学科团队建设项目(201631TD),清远市科技计划项目(2017A003)

分类号: S852.65

页码: 16-21

总页数: 6

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