导读:本文包含了横向分化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,干细胞,脂肪,横向,缝隙,骨髓,生理。
横向分化论文文献综述
李翼飞[1](2016)在《Transwell间接共培养条件下成骨细胞向脂肪细胞横向分化的实验研究》一文中研究指出目的:探讨在Transwell间接共培养体系条件下,将成熟脂肪细胞作为诱导因素,观察成骨细胞成脂横向分化的可能性,为下一步进行体内实验和进一步临床治疗提供参考。方法:1.将3T3-L1小鼠成纤维样前体细胞传至3代,选取对数期的细胞加入成脂诱导液培养10d,用油红O染色鉴定其为成熟脂肪细胞后,将成熟脂肪细胞作为诱导因素来诱导成骨细胞。传代至第3代的MC3T3-E1小鼠成骨样细胞设立为实验组。选取上室下室面积之比为1:4,插入式Transwell培养板,将实验组细胞和小鼠成熟脂肪细胞组细胞分别种于Transwell体系的上室和下室,并记为0d,对照组为用低糖DMEM单独培养的MC3T3-E1小鼠成骨样细胞。2.油红O染色实验检验实验组和对照组7d、14d、21d 3个时间点的脂滴染色情况;3.茜素红染色检验实验组和对照组细胞在7d、14d、21d 3个时间点钙化结节量的表达情况;4.以脂肪条件培养基(FCCM)培养基及低糖DMEM培养基分别培养小鼠成骨样细胞,以MTT法在0h、24h、36h 3个时间点检测实验组与对照组的细胞增殖抑制率;5.检测实验组和对照组细胞在7d、14d、21d 3个时间点甘油叁酯(TG)相对含量表达;6.Western blot检测各组细胞在7d、14d、21d 3个时间点成脂目的蛋白PPARγ2的表达含量。7.数据统计采用SPSS19.0软件分析,使用方差分析进行组内及组间的差异性比较、分析,以α=0.05作为检验标准,实验结果以均数±标准差(±s)表示,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.镜下观察结果:成脂诱导培养10d,前体脂肪细胞的形态由成纤维样变为圆形,胞质内脂滴聚集,经油红O染色后,鉴定为成熟脂肪细胞;实验组细胞共培养7d细胞呈长梭形,细胞内未见脂滴,14d时细胞呈成纤维样,胞质内逐渐出现黑色颗粒物质及少量脂滴,培养至21d,部分细胞由成纤维样变为椭圆形或圆形,胞质内脂滴增多;对照组细胞胞质内容及细胞形态未有明显改变;2.油红O实验结果显示实验组细胞染色区呈递增趋势,对照组细胞染色区无明显变化;3.茜素红染色结果显示实验组细胞自7d、14d、21d呈钙结节量表达减少的趋势;对照组细胞在3个时间点则无明显变化,呈大片着色区;4.MTT法检测结果显示:实验组抑制率分别为0h组(0.1947±0.09)%、24h组(64.917±2.4)%、36h组(71±2.3)%,对照组抑制率为0h组(0.1735±0.05)%、24h组(23.33±3.4)%、36h组(56.33±1)%,实验组与对照组相比及实验组组间比较差异有统计学意义(P<0.05),对照组组间比较差异有统计学意义(P<0.05);5.TG相对含量检测结果显示实验组细胞甘油叁酯聚集量呈递增趋势,随时间的增长而增多,实验组TG表达量为7d组(0.20167±0.015)、14d组(0.25167±0.024)、21d组(0.58167±0.023),对照组的表达量为7d组(0.22±0.027)、14d组(0.19667±0.025)、21d组(0.24±0.042),在3个时间点实验组组间相比及实验组与对照组相比差异有统计学意(P<0.05),对照组组间比较无统计学意义(P>0.05);6.Western blot实验结果显示:实验组细胞PPARγ2蛋白表达量在3个时间点呈递增趋势,实验组目的蛋白表达量为7d组(0.245±0.012)、14d组(0.40817±0.0365)、21d组(0.759±0.039),对照组的表达量为7d组(0.2781±0.043)、14d组(0.2955±0.022)、21d组(0.3849±0.03),而成熟脂肪细胞的目的蛋白表达量为7d组(0.9905±0.32)、14d组(1.1259±0.65)、21d组(0.98999±0.25),实验组组间相比,实验组与成熟脂肪细胞组相比,以及实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.在Transwell间接共培养体系中,成骨细胞在成熟脂肪细胞诱导下呈现出成脂横向分化趋势,脂肪目的蛋白PPARγ2表达量与时间成正比,钙结节量与时间成反比;2.实验组成骨细胞与成熟脂肪细胞相比,目的蛋白PPARγ2表达量有明显差异,实验组细胞是否完全横向分化为成熟脂肪细胞有待下一步考证;3.FCCM条件脂肪细胞培养基能明显抑制成骨细胞的增殖能力。(本文来源于《遵义医学院》期刊2016-05-01)
严会文,陈剑英,高杰,廖文萍,苏敏[2](2016)在《大鼠角膜缘干细胞分离培养及其横向分化能力初探》一文中研究指出目的体外分离培养大鼠角膜缘干细胞(LSCs),并探讨在细胞因子EGF、b FGF联合RA作用下,LSCs体外横向分化为神经干细胞样细胞的能力。方法体外分离培养LSCs并进行p63免疫组化鉴定。在原代培养的LSCs中,设立2个诱导组进行分化实验,诱导组1加入EGF(20 ng/mL)和b FGF(10 ng/mL),诱导组2加入EGF(20 ng/mL)、b FGF(10 ng/mL)和RA(25 ng/mL),同时设立空白对照组。培养7 d后,收集各组细胞作神经元标志物Nestin的免疫组化检测及阳性细胞计数,收集各组细胞蛋白做蛋白免疫印迹分析各组Nestin蛋白表达情况,相关数据作统计学分析。结果免疫组化结果显示,体外分离培养的LSCs p63呈阳性,诱导分化的2组细胞Nestin呈阳性表达,阳性率分别为(77.01±6.32)%和(84.01±5.43)%,诱导组2的诱导率高于诱导组1,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组细胞Nestin呈阴性表达。蛋白免疫印迹结果显示,2个诱导组在240 k Da处可见Nestin蛋白条带,诱导组2 Nestin蛋白表达略高于诱导组1,对照组未见Nestin蛋白条带。结论成功分离培养大鼠LSCs,在细胞因子EGF、b FGF作用下,LSCs具有横向分化为神经干细胞样细胞的能力,同时联合使用RA有促进LSCs向神经干细胞样细胞分化的作用。(本文来源于《局解手术学杂志》期刊2016年04期)
王吉博,曾旋,彭浩,王凤宇,王兆杰[3](2014)在《GJIC渐弱剂18α-甘草次酸对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响》一文中研究指出目的探讨缝隙连接通讯渐弱剂18α-甘草次酸(GA)对脂肪细胞向成骨细胞横向分化及细胞间缝隙连接通讯的影响。方法选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织,分离提取成熟脂肪细胞,使其去分化得到去分化脂肪细胞,取第叁代去分化的脂肪细胞进行成骨诱导,加入GJIC渐弱剂18α-GA设为减弱组,并设立对照组,MTT法观察18α-GA对细胞倍增是否有影响,进行茜素红钙结节染色和I型胶原免疫组化染色对成骨细胞定性检测,Western blot技术和划痕标记染料示踪法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达。结果 MTT法检测结果显示18α-GA对细胞生长增殖无显着影响。茜素红染色显示均发现紫红色结节。免疫组化染色显示减弱组I型胶原表达减弱,SLDT法显示减弱组荧光染料扩散低于对照组,Western blot技术检测结果显示减弱组Cx43蛋白的表达下降。结论 18α-GA可以减弱缝隙连接通讯以降低脂肪细胞向成骨细胞分化的能力。(本文来源于《现代中西医结合杂志》期刊2014年34期)
王吉博,彭浩,王凤宇,齐新文,王兆杰[4](2014)在《GJIC增强剂PGE_2对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响》一文中研究指出目的探讨缝隙连接通讯增强剂前列腺素E2对脂肪细胞向成骨细胞横向分化及细胞间缝隙连接通讯的影响。方法选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织,分离提取成熟脂肪细胞,使其去分化得到去分化脂肪细胞,取第叁代去分化的脂肪细胞进行成骨诱导,加入GJIC增强剂PGE2设为增强组,并设立对照组,MTT法观察PGE2对细胞倍增是否有影响,进行茜素红钙结节染色和I型胶原免疫组化染色对成骨细胞定性检测,Western blot技术和划痕标记染料示踪法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达。结果 MTT法检测结果显示PGE2对细胞生长增殖无显着影响。茜素红染色显示均发现紫红色结节。免疫组化染色显示增强组I型胶原表达增强,SLDT法显示增强组荧光染料扩散高于对照组,Western blot技术检测结果显示增强组Cx43蛋白的表达增高。结论 PGE2可以增强缝隙连接通讯以增强向成骨细胞分化的能力。(本文来源于《中国骨质疏松杂志》期刊2014年09期)
孙哲[5](2013)在《业主社会:横向团结与纵向分化——对于上海两个封闭社区的调查》一文中研究指出业主的出现是否会对于"国家—社会关系"带来根本性的变革?从这一问题意识出发,本研究运用"业主身份—业主社会"的分析框架,对于"中产阶层—市民社会"的既有理论框架进行了进一步的拓展。我们认为要将业主与业主之间的横向关系,与"业主—开发商—政府"的"纵向关系"进行区分。通过对于上海市两个封闭社区的经验研究,我们认为业主在横向关系上已经形成了相应的邻里团结与自我管理,然而这种团结形式在纵向关系的抗争中很容易分化。政治关系通过产权关系得以再现,横向团结与纵向分化并不矛盾,而是治理术的两个面向。当业主陷入纵向关系中的纠纷时,纵向的权力结构会对业主群体进行干预,并最终通过"不成文规则"解决业主与业主之间的矛盾。(本文来源于《中国城市研究》期刊2013年00期)
王兆杰,安荣泽,张弛,赵豪,齐新文[6](2013)在《兔成骨细胞和脂肪细胞横向分化的初步研究》一文中研究指出目的探讨兔成骨细胞和脂肪细胞两者横向分化的能力和方法。方法选取3月龄新西兰大白兔,获取、分离培养脂肪细胞,天花板贴壁法使其去分化,去分化脂肪细胞进行成骨诱导3周后行茜素红、碱性磷酸酶和I型胶原酶免疫组化染色。另选取出生7天内的乳兔,取颅骨骨块利用酶消-组织块培养法培养成骨细胞并传代培养,对其进行成脂诱导3周后行油红O染色、RT-PCR检测PPARγmRNA的表达。(本文来源于《中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编》期刊2013-09-11)
王兆杰,王吉博[7](2013)在《GJIC增强剂PGE2对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响》一文中研究指出目的探讨缝隙连接通讯增强剂前列腺素E2对脂肪细胞向成骨细胞横向分化及细胞间隙连接通讯的影响。方法选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织,分离提取成熟脂肪细胞,使其去分化得到去分化脂肪细胞,取第叁代去分化的脂肪细胞进行成骨诱导,加入GJIC增强剂PGE2设为增强组,并设立对照组,MTT法观察PGE2对细胞倍增是否有影响,进行茜素红钙结节染色和I型胶(本文来源于《中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编》期刊2013-09-11)
黄保胜,王天路,李立新,谢青松,田和平[8](2012)在《骨髓间充质干细胞向功能性神经元的横向分化》一文中研究指出背景:骨髓间充质干细胞定向分化为神经干细胞并探讨提高分化效率的方法,具有重要的理论与实际应用意义。目的:建立以不同诱导方法横向分化大鼠骨髓间充质干细胞为功能神经元的方法。方法:分离、纯化得到骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物。将骨髓间充质干细胞分为神经营养因子诱导组、化学诱导组和对照组,骨髓间充质干细胞分别加入脑源性神经营养因子和碱性成纤维细胞生长因子、二甲亚砜和丁香茴醚、PBS进行诱导。结果与结论:神经营养因子诱导组和化学诱导组诱导后的细胞均表达神经元特异性烯醇化酶和微管相关蛋白2,且2组细胞的表达量接近(P>0.05),而对照组未发现神经元特异性烯醇化酶和微管相关蛋白2阳性表达。膜片钳系统检测发现神经营养因子诱导组诱导后的细胞具有神经细胞特征性的动作电位和兴奋性突触后电流,而化学诱导组和对照组均未发现动作电位和兴奋性突触后电流。提示脑源性神经营养因子联合碱性成纤维细胞生长因子是一种诱导骨髓间充质干细胞横向分化为功能神经元的可靠方法。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年49期)
王吉博[9](2012)在《增强或减弱GJIC对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响》一文中研究指出目的:通过缝隙连接通讯(gap junction intracellular communication, GJIC)增强剂前列腺素E2(Prostaglandin E2, PGE2)或GJIC减弱剂18a-甘草次酸(18α-Glycyrrhetinic acid,18α-GA)对脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响,探讨缝隙连接通讯对脂肪细胞与成骨细胞间横向分化的调控机制。方法:①选取3月龄新西兰大白兔腹股沟处脂肪组织,机械分离和酶消化法分离提取成熟脂肪细胞(Mature adipocytes, MA)。②采用天花板贴壁法(即培养瓶内充满培养基,翻转培养瓶使瓶底朝上)获得去分化脂肪细胞(Dedifferentiated adipocytes, DA),对DA进行传代培养。③取第叁代去分化的脂肪细胞进行成骨诱导(成骨诱导剂:10%FBS的DMEM培养液,10mmol/Lp甘油磷酸钠,0.05mmol/L维生素C和100mmol/L地塞米松),加入GJIC增强剂PGE2设为增强组,加入GJIC减弱剂18α-GA设为减弱组,并设立对照组进行对比。MTT法绘制细胞生长曲线,计算倍增时间,观察PGE2和18α-GA对细胞倍增是否有影响。④成骨分化指标的检测:对诱导2周的叁组细胞进行茜素红钙结节染色对成骨细胞定性检测;对诱导2周后的叁组细胞进行I型胶原免疫组化染色对成骨细胞半定量检测。⑤缝隙连接指标的检测:Western blot(蛋白质印迹)技术检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达;划痕标记染料示踪法(scrape-loading and dye transfer, SLDT)对各组细胞GJIC功能检测;透射电镜(transmission electron microscope, TEM)观察缝隙连接结构并测量缝隙连接的长度。结果:①原代成熟脂肪细胞呈现小圆形指环状,形态规则,呈聚集分布。②天花板贴壁法培养MA,在缺氧缺营养环境下,MA中脂滴逐渐由胞质内脱出,由圆形逐渐变成椭圆形,最终呈长梭形成纤维细胞状的DA。③MTT法绘制细胞的生长曲线,计算倍增时间,组间进行单因素方差分析P=0.982(P>0.05),差异无显着性意义,说明PGE2、18α-GA对去分化脂肪细胞生长增殖无显着影响。④成骨分化检测:茜素红对连续培养2周的叁组细胞进行钙结节染色均发现紫红色结节;I型胶原免疫组化染色灰度值检测,χ±S分别是增强组115.804±8.476、对照组125.479±9.230、减弱组134.551±7.301,分别与对照组比较P值分别是0.046、0.047,均有统计学意义(p<0.05)。⑤透射电镜观察缝隙连接并测量其长度,χ±S分别是增强组2.705±0.109、对照组1.954±0.144、减弱组1.264±0.202,分别与对照组比较(P均=0)有统计学意义;SLDT法对各组细胞GJIC功能检测发现LY扩散层数增强组9-10层、对照组7-8层、减弱组4-5层;Western blot技术检测Cx43蛋白的表达,所得X光胶片用Chemi Imager5500V2.0软件扫描,通过Fluor Chen2.0软件进行定量分析,测得整合光密度值(integrated density value, IDV),x±S分别是增强组54826.69±1909.12、对照组48519.19±1678.50、减弱组44158.92±1356.94,分别与对照组比较P值分别是0和0.001,均有统计学意义(p<0.05)。结论:天花板贴壁法可以使成熟脂肪细胞去分化得到去分化脂肪细胞;去分化的脂肪细胞在成骨诱导环境下可以分化为成骨细胞;PGE2可以增强缝隙连接通讯以增强向成骨细胞分化的能力,18α-GA可以减弱缝隙连接通讯以减弱向成骨分化的能力。说明细胞间信号传导对细胞分化有一定影响。(本文来源于《遵义医学院》期刊2012-05-01)
黄保胜,王天路,李立新[10](2011)在《骨髓间充质干细胞横向分化为功能神经元的实验研究》一文中研究指出目的探索大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)横向分化为功能神经元的方法,为组织工程神经的构建寻找种子细胞的理想来源。方法选取SD大鼠,无菌条件下取股骨骨髓,采用密度梯度离心与贴壁培养相结合的方法分离;纯化得到BMSCs,流式细胞仪检测BMSCs表面标志物。将培养15瓶的BMSCs随机分为A;B;C叁组,每组5瓶细胞,分别在实验A组中加入脑源性神经营养因子(BDNF)和成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导分化剂,实验B组中加入丁香茴醚(BHA)和二甲亚砜(DMSO)两种化学诱导剂,对照C组中仅加入同量PBS液作为对照组。(本文来源于《2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编》期刊2011-10-13)
横向分化论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的体外分离培养大鼠角膜缘干细胞(LSCs),并探讨在细胞因子EGF、b FGF联合RA作用下,LSCs体外横向分化为神经干细胞样细胞的能力。方法体外分离培养LSCs并进行p63免疫组化鉴定。在原代培养的LSCs中,设立2个诱导组进行分化实验,诱导组1加入EGF(20 ng/mL)和b FGF(10 ng/mL),诱导组2加入EGF(20 ng/mL)、b FGF(10 ng/mL)和RA(25 ng/mL),同时设立空白对照组。培养7 d后,收集各组细胞作神经元标志物Nestin的免疫组化检测及阳性细胞计数,收集各组细胞蛋白做蛋白免疫印迹分析各组Nestin蛋白表达情况,相关数据作统计学分析。结果免疫组化结果显示,体外分离培养的LSCs p63呈阳性,诱导分化的2组细胞Nestin呈阳性表达,阳性率分别为(77.01±6.32)%和(84.01±5.43)%,诱导组2的诱导率高于诱导组1,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组细胞Nestin呈阴性表达。蛋白免疫印迹结果显示,2个诱导组在240 k Da处可见Nestin蛋白条带,诱导组2 Nestin蛋白表达略高于诱导组1,对照组未见Nestin蛋白条带。结论成功分离培养大鼠LSCs,在细胞因子EGF、b FGF作用下,LSCs具有横向分化为神经干细胞样细胞的能力,同时联合使用RA有促进LSCs向神经干细胞样细胞分化的作用。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
横向分化论文参考文献
[1].李翼飞.Transwell间接共培养条件下成骨细胞向脂肪细胞横向分化的实验研究[D].遵义医学院.2016
[2].严会文,陈剑英,高杰,廖文萍,苏敏.大鼠角膜缘干细胞分离培养及其横向分化能力初探[J].局解手术学杂志.2016
[3].王吉博,曾旋,彭浩,王凤宇,王兆杰.GJIC渐弱剂18α-甘草次酸对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响[J].现代中西医结合杂志.2014
[4].王吉博,彭浩,王凤宇,齐新文,王兆杰.GJIC增强剂PGE_2对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响[J].中国骨质疏松杂志.2014
[5].孙哲.业主社会:横向团结与纵向分化——对于上海两个封闭社区的调查[J].中国城市研究.2013
[6].王兆杰,安荣泽,张弛,赵豪,齐新文.兔成骨细胞和脂肪细胞横向分化的初步研究[C].中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编.2013
[7].王兆杰,王吉博.GJIC增强剂PGE2对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响[C].中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编.2013
[8].黄保胜,王天路,李立新,谢青松,田和平.骨髓间充质干细胞向功能性神经元的横向分化[J].中国组织工程研究.2012
[9].王吉博.增强或减弱GJIC对兔脂肪细胞向成骨细胞横向分化的影响[D].遵义医学院.2012
[10].黄保胜,王天路,李立新.骨髓间充质干细胞横向分化为功能神经元的实验研究[C].2011中华医学会神经外科学学术会议论文汇编.2011